基于定量蛋白质组学探究β1肾上腺素能受体自身抗体表达增强诱发心房颤动的作用机制

发布时间：2024-06-25 19:24

　　目的:构建β1肾上腺素能受体自身抗体(β1ARAb)表达增强的主动免疫兔模型,研究β1ARAb表达增强对心房电生理特性及心房颤动(房颤)诱发率的影响。使用TMT定量蛋白质组学技术筛选造模完成后的免疫组和对照组兔左心房组织之间表达水平差异有统计学意义的蛋白质,进行后续蛋白质功能注释、生物学分析、蛋白相互作用网络构建,探讨β1ARAb表达增强诱发房颤的可能作用机制,并进一步在动物模型、房颤患者中进行验证。方法:1)设计并合成β1肾上腺素能受体(β1AR)的细胞外第二环功能表位肽段(ECL2)。将16只成年雄性新西兰大白兔随机分为对照组和与免疫组,免疫组给予人工合成的β1AR的ECL2混合弗氏佐剂注射,构建β1ARAb过表达的主动免疫兔模型,对照组不给予β1AR的ECL2注射。每两周通过ELISA测定两组实验兔的血清β1ARAb表达水平、通过ELISA方法比较造模前后两组实验兔血清cAMP表达水平变化、通过蛋白质印迹方法(Western blot)测定两组实验兔左心房β1AR蛋白表达水平。造模结束后对所有实验兔进行心房电生理检查,包括测量静息心率、记录5分钟内自发性心律失常情况;测量心房有效...

【文章页数】：137 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要 ABSTRACT 前言 第一部分 β1肾上腺素能受体自身抗体表达增强的主动免疫兔模型构建及其对心房电生理特性及房性心律失常的影响
1 研究方法与内容
    1.1 实验动物、分组
    1.2 实验所需仪器设备
    1.3 动物模型建立方法
    1.4 主动免疫兔模型的验证
    1.5 心房电生理检查及房性心律失常的诱发与记录
    1.6 统计学处理及分析
2 结果
3 讨论
4 小结 第二部分 基于TMT技术的β1肾上腺素能受体自身抗体表达增强主动免疫兔模型的心房差异表达蛋白质筛选及生物信息学分析
1 研究方法与内容
    1.1 实验标本及研究流程
    1.2 实验所需仪器设备
    1.3 蛋白质组学技术鉴定差异表达蛋白质
    1.4 生物信息学分析
2 结果
3 讨论
4 小结 第三部分 β1肾上腺素能受体自身抗体表达增强通过促进心房纤维化诱发心房颤动的验证研究(一)—β1肾上腺素能受体自身抗体表达增强对免疫兔模型心房结构重构的作用
1 研究方法与内容
    1.1 实验动物与造模方法
    1.2 实验所需仪器设备
    1.3 心脏超声检查
    1.4 组织学病理染色检测
    1.5 透射电镜检查
    1.6 左心房纤维化相关蛋白的蛋白表达水平检测
    1.7 左心房纤维化相关蛋白的m RNA表达水平检测
    1.8 统计学分析
2 结果
3 讨论
4 小结 第四部分 β1肾上腺素能受体自身抗体表达增强通过促进心房纤维化诱发心房颤动的验证研究(二)—阵发性心房颤动患者血清β1肾上腺素能受体自身抗体水平与心房纤维化水平的相关性分析
1 研究对象与方法
    1.1 伦理委员会批准、知情同意
    1.2 研究对象及分组
    1.3 临床资料获取
    1.4 统计学方法
2 结果
3 讨论
4 小结 结论 致谢 参考文献 综述
参考文献 攻读博士学位期间获得的学术成果 个人简历 导师评阅表



本文编号：3995789