癌基因RMP与抑癌基因PTEN的相互拮抗作用及其对肝癌细胞增殖的影响

发布时间：2017-12-16 12:33

  本文关键词：癌基因RMP与抑癌基因PTEN的相互拮抗作用及其对肝癌细胞增殖的影响

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【摘要】：目的:研究癌基因RMP在肿瘤细胞和正常细胞中的功能差异性,探索抑癌基因PTEN与癌基因RMP的拮抗作用及其对肝癌细胞增殖与凋亡的影响。方法:1.选取了多种肿瘤细胞与正常细胞,收集了部分肝癌组织与癌旁组织,检测了RMP的m RNA和蛋白表达水平,并测定HBX、AFP、BCL-2、BAX、BAD蛋白表达水平,分析RMP与各因子之间的相关性。2.通过MTT增殖实验检测RMP对于多种肿瘤细胞与正常细胞增殖的影响;通过增殖实验与凋亡实验验证了RMP对肿瘤细胞与正常细胞的影响差异。3.对比正常肝细胞与肝癌细胞中RMP与PTEN的表达差异,并构建PTEN的腺病毒载体感染肝癌细胞,探寻外源性的PTEN是否通过抑制RMP的表达,调控RMP介导的细胞增殖和细胞凋亡。4.通过对比Ad-PTEN与AKT信号通路抑制剂LY294002分别处理的肝癌细胞,探寻RMP与AKT信号通路的关系。5.选择人肝癌Hep G2细胞以及RMP过表达/干扰的Hep G2细胞系建立裸鼠人肝癌移植瘤模型,进一步观察Ad-PTEN对裸鼠肝癌移植瘤生长的影响。结果:1.RMP在肿瘤细胞中普遍高表达而在正常细胞中低表达;RMP在肝癌组织中高表达,并且与AFP,HBX,BCL-2的表达量呈正相关,与BAX、BAD的表达量呈负相关。2.过表达RMP能够促进肿瘤细胞与正常细胞的增殖,干扰RMP能够显著抑制肿瘤细胞的增殖,但是RMP干扰对正常细胞增殖影响不显著。3.干扰RMP表达能够促进肝癌细胞的凋亡,而正常肝细胞凋亡则不受RMP表达量的影响,相反过表达RMP能抑制肝癌Hep G2细胞的凋亡,但不影响肝癌SMMC-7721细胞和正常肝细胞的细胞凋亡。4.与RMP相反,PTEN在肝癌细胞中低表达;PTEN能够抑制RMP表达且呈剂量依赖效应,同时,RMP的促增殖和抑凋亡作用也受PTEN调控。5.PTEN可以通过调控AKT信号通路抑制RMP的表达,进而抑制BAD磷酸化,从而抑制肝癌细胞的增殖。6.PTEN能够抑制RMP过表达肝癌细胞株的裸鼠皮下成瘤能力。结论:RMP在肿瘤细胞和正常肝细胞中扮演了不同的角色,RMP明显影响肝癌细胞的增殖,而对正常肝细胞增殖的影响较小,即肝癌等肿瘤细胞对RMP的敏感性高,而正常细胞对RMP的敏感性较低。在肝癌细胞中,PTEN可以通过AKT信号通路抑制RMP的表达,在肝癌细胞的增殖中呈现相互拮抗的作用。
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.7

【参考文献】

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本文编号：1296050