MicroRNA-20b通过NFAT信号通路对胸腺瘤伴重症肌无力T细胞的影响

发布时间：2017-12-29 16:34

  本文关键词：MicroRNA-20b通过NFAT信号通路对胸腺瘤伴重症肌无力T细胞的影响　出处：《吉林大学》2017年博士论文　论文类型：学位论文

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【摘要】：目的:研究microRNA-20b对胸腺瘤伴重症肌无力T细胞的影响。方法:1.运用RT-PCR方法,比较miR-20b在胸腺瘤及正常胸腺组织中的表达。2.通过MTT等方法研究miR-20b对T细胞增殖及活化功能的影响。3.应用miRanda及TargetScan软件预测miR-20b的靶基因,利用RT-PCR及western blot方法验证靶向关系。4.应用MTT法检测靶基因对Jurkat细胞增殖和活化的影响。5.选用RT-PCR法及Western blot等方法分析miR-20b与NFAT5及CAMTA1在胸腺瘤中的关系。6.利用MTT及Western blot等方法通过沉默靶基因验证miR-20b对靶基因的调控作用及分析调控作用的机制。结果:1.相对于无重症肌无力患者和单纯有重症肌无力但不伴胸腺瘤的患者,胸腺瘤伴重症肌无力患者血清中miR-20b的表达水平明显下降。2.活化的Jurkat细胞及CD4+T细胞中miR-20b的表达水平下降,miR-20b转染组G0/G1期细胞比例明显升高、S期细胞比例有所降低、G2/M期细胞比例亦有所降低,而Anti-miR-20b转染组则完全相反,差异具有统计学意义(P0.05)。3.细胞内靶基因的表达在转染miR-20b mimics后明显下降,而转染anti-miR-20b后明显升高。4.Jurkat细胞系转染miR-20b mimics后,IL2、IL10、CD25及CD69的表达明显下降,细胞增殖活性明显受到抑制,而转染anti-miR-20b后则均升高。5.miR-20b与靶基因在胸腺瘤中呈明显的负相关。6.Jurkat细胞转染miR-20b mimics后能产生明显的抑制细胞增殖和活化的作用,而且沉默靶基因引起的抑制作用可以被低表达的miR-20b部分消除。这些都有利的证明了NFAT5及CAMTA1是miR-20b在胸腺瘤伴重症肌无力中调控的靶基因。结论:因其对T细胞增殖以及活化的抑制作用,miR-20b在胸腺瘤伴重症肌无力患者细胞免疫中发挥着负调控作用。其免疫调节作用是通过对NFAT5及CAMTA1基因的调控而完成的。由于明显的低表达特性,使得miR-20b可以作为诊断胸腺瘤的肿瘤标志物。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R736.3;R746.1

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本文编号：1351001