白果内酯对胃溃疡的保护作用及其机制研究

发布时间：2018-01-02 17:35

  本文关键词：白果内酯对胃溃疡的保护作用及其机制研究　出处：《南方医科大学》2017年博士论文　论文类型：学位论文

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【摘要】：目的:探讨白果内酯在胃上皮细胞及两种小鼠胃溃疡模型中对胃黏膜的保护作用及其机制。方法:第一章体外培养人胃上皮细胞(GES-1),给予不同浓度白果内酯(10、20、40μM)作用24h后,H202(400μM)刺激1h。MTT 检测细胞活力,观察白果内酯对H202诱导的人胃上皮细胞的影响。收集细胞上清液,采用ELISA试剂盒检测其中TNF-α、IL-6和IL-1β的含量;Western blot技术测定细胞中 P-JNK、JNK、P-Erk、Erk、P-P38、P38、P-IKKα、IKKα、P-IKKβ、IKKβ、P-IκBα、IκBα、P-NF-κBp65、NF-κBp65 等蛋白水平的表达。第二章 50只小鼠随机平均分为5组:对照组、乙醇组、奥美拉唑组、白果内酯(3mg/kg)组、白果内酯(6mg/kg)组。造模成功后对胃组织进行HE染色;测定血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、TNF-α、IL-6和IL-Iβ的含量;测定胃组织中SOD、MDA和髓过氧化物酶(MPO)的含量。Western blot技术测定胃组织中 P-JNK、JNK、P-Erk、Erk、P-P38、P38、P-IKKα、IKKα、P-IKKβ、IKKβ、P-IκBα、IκBα、P-NF-κBp65、NF-κBp65 等蛋白水平的表达。第三章 50只小鼠随机平均分为5组:对照组、醋酸组、奥美拉唑组、白果内酯(3mg/kg)组、白果内酯(6mg/kg)组。造模成功后对胃组织进行HE染色;测定血清中SOD、MDA、TNF-α、IL-6 和 IL-1β 的含量;测定胃组织中 SOD、MDA 和 MPO的含量。Western blot 技术测定胃组织中 P-JNK、JNK、P-Erk、Erk、P-P38、P38、P-IκBα、IκBα、P-NF-κBp65、NF-κBp65、LC3-I、LC3-II、LAMP1、mTOR、p-p70S6K、p70S6K、p-4EBP1、4EBP1 等蛋白水平的表达。结果:第一章MTT实验结果表明,白果内酯能够改善H202诱导的人胃上皮细胞活力损伤;白果内酯能够显著降低细胞上清液中TNF-α、IL-6和IL-1β 的含量,降低细胞中 P-JNK、P-Erk、P-P38、P-IKKα、P-IKKβ、P-IκBα、P-NF-κBp65等蛋白的含量。第二章与乙醇组相比,白果内酯能够改善乙醇诱导的胃组织病理损伤;显著降低血清中MDA、TNF-α、IL-6和IL-1β的含量,增加SOD的含量;降低胃组织中MDA、MPO的含量,增加胃组织中SOD的含量;抑制胃组织中 P-JNK、P-Erk、P-P38、P-IKKα、P-IKKβ、P-IKBα、P-NF-κBp65等蛋白的含量。第三章与醋酸组相比,白果内酯能够改善醋酸诱导的胃组织病理损伤;显著降低血清中MDA、TNF-α、IL-6和IL-1β的含量,增加SOD的含量;降低胃组织中MDA、MPO的含量,增加胃组织中SOD的含量;抑制胃组织中 P-JNK、P-Erk、P-P38、P-IκBα、P-NF-κBp65、LC3-I、LC3-II、LAMP1、mTOR、p-p70S6K、p-4EBP1 等蛋白的含量。结论:白果内酯对H202诱导的人胃上皮细胞损伤具有一定的保护作用,其机制可能通过抑制MAPK/NF-κB信号通路发挥体外保护胃上皮细胞的作用;白果内酯对小鼠急慢性胃溃疡(乙醇诱导的急性模型和醋酸诱导的慢性模型)具有保护作用,其机制可能通过抑制氧化应激、MAPK/NF-κB信号通路发挥作用;另外,白果内酯对醋酸诱导的小鼠胃溃疡还可能通过抑制自噬信号通路发挥抗溃疡的作用。
[Abstract]:Objective: To investigate the effect of bilobalide in gastric epithelial cells and two gastric ulcer in mice model of gastric mucosal protective effect and its mechanism. Methods: in the first chapter of cultured human gastric epithelial cells (GES-1), with different concentrations of bilobalide (10,20,40 M) 24h, H202 (400 M) stimulation of 1h.MTT cell detection to observe the effect of bilobalide activity on H202 induced human gastric epithelial cells. The cell supernatant was collected, using ELISA kit to detect the content of IL-6 and TNF- alpha, IL-1 beta cells; Determination of P-JNK, Western blot JNK, P-Erk, Erk, P-P38, P38, P-IKK alpha, IKK alpha, P-IKK beta, IKK beta, P-I kappa B alpha, I kappa B alpha, P-NF- kappa Bp65, expression of NF- kappa Bp65 protein level. In the second chapter, 50 mice were randomly divided into 5 groups: control group, ethanol group, omeprazole group, bilobalide (3mg/kg) group, bilobalide (6mg/kg) group. After the success of modeling the gastric tissue was stained by HE assay; 琛，

本文编号：1370246