IL-17和Notch信号通路在胰腺癌中相互作用机制的探索

发布时间：2018-01-06 14:43

本文关键词：IL-17和Notch信号通路在胰腺癌中相互作用机制的探索　出处：《北京协和医学院》2017年博士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：背景及目的胰腺癌恶性程度高、早期诊断困难、治疗效果不理想,病死率始终居高不下。胰腺癌的进展过程中存在大量信号通路的异常激活/失活,这些通路的异常状态可由突变的积累导致,也可能受到其他信号通路的调控。同时,慢性胰腺炎是胰腺癌的高危因素之一,多种炎症细胞、细胞因子对肿瘤微环境中的免疫状态及肿瘤的生物学行为均有重要调节作用。本实验希望利用胰腺癌细胞系,研究IL-17A信号通路与Notch信号通路在胰腺癌发生、进展中的功能及其相互作用的机制,为丰富“炎癌转化”理论做出贡献,同时为临床中联合使用两通路抑制剂治疗胰腺癌提供理论依据和实验基础。方法选用MiaPaCa-2、PANC-1及BxPC-3三株胰腺癌细胞系,通过Notch信号通路阻断剂DAPT的孵育或补充外源IL-17A因子刺激细胞,干预其Notch和/或IL-17信号通路。通过CCK-8法、AnnexinV-PI染色法、Transwell法、干细胞成球等实验,探究Notch及IL-17A通路对胰腺癌细胞增殖、凋亡、迁移、细胞干性的影响;并通过qPCR及Western Blot等分子生物学手段,验证IL-17A因子对Notch信号通路的调控作用。结果DAPT可在转录、翻译两个水平上抑制Notch通路下游靶基因HES1、HEY1的表达,即抑制Notch信号通路活性;Notch信号通路能够促进胰腺癌细胞的增殖、抑制凋亡,同时能促进迁移、维持部分胰腺癌细胞的干细胞特性。IL-17A因子同样能够促进胰腺癌细胞的增殖、抑制凋亡,促进肿瘤迁移能力,并在一定程度上增加胰腺癌细胞的干性。此外,IL-17A因子能够上调胰腺癌细胞Notch信号通路多种受体、配体的表达,并可能通过经典及非经典的NICD-RBPJk-MAML途径增加Notch信号通路的活化强度。结论Notch信号通路及IL-17A信号通路均能上调胰腺癌细胞的恶性程度,且Th17细胞在体内可能通过持续分泌IL-17A因子的方式,上调胰腺腺泡细胞/胰腺癌细胞Notch信号通路多种受体、配体的表达,增加Notch信号通路的活化强度、促进胰腺癌的进展、提高胰腺癌细胞的恶性程度。
[Abstract]:The effects of Notch and IL - 17A on the proliferation , apoptosis , migration and cell dryness of pancreatic cancer cells were investigated by means of CCK - 8 , AnnexinV - PI staining , Transwell method and stem cells .

【学位授予单位】：北京协和医学院
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R735.9

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