养血固肾汤对大鼠骨折愈合影响的实验观察研究

发布时间：2018-02-22 19:51

本文关键词： 养血固肾汤骨折愈合试验研究钙磷乘积　出处：《广州中医药大学》2017年博士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的:骨折是临床上常见的疾病之一,主要分为骨小梁中断裂和骨皮质断裂,而当中最棘手的问题是骨折不愈合或延迟愈合。骨折的愈合过程是一个极其复杂的过程,当中牵涉组织学、生物学、内分泌学及生物力学等知识。影响骨折愈合的因素众多,包括全身因素和局部因素、医源性因素、骨生长因子、微量元素、生物力学因素。对于如何促进骨折的愈合过程、恢复骨的正常功能及结构一直是医学界研究的焦点及热点。学者们经过不同的研究及实验方法,从多角色去探讨,才有现今对骨折愈合过程的认识。现行的治疗骨折的方法很多,而且部份疗效显着,但亦有好多的不足,在这样立足点上,祖国医治骨折病症的长远经验及技术累积可以好好发挥作用,因其有简单方便、安全有效、毒副作用低及成本低廉等优点,一直被医生及患者认可。本课题在祖国医学理论指导下,展开"养血固肾汤"对骨折愈合过程的促进作用效果的研究,尝试从多角度着手,透过不同层面的观察,剖析养血固肾汤对骨折愈合的干涉作用及解释当中的机制。基于文献记录上,有关观察"养血固肾汤"对骨折愈合过程的促进作用效应研究目前未见报导。本文起着先导的作用,于不同研究层面上,对"养血固肾汤"进行观察,从而提高对"养血固肾汤"于骨折愈合过程的理解,以利指导临床工作,为推动中医药的普及使用出一分绵力。研究方法:动物模型准备工作:80只SD雄性大鼠,开始体重为168.5～237.2g,四肢无畸形,活动自如,生命体征平稳,饮食正常,无传染病,整个饲养及实验过程在SPF级环境内进行。到体重合适时实验开始,于大鼠左胫骨中段行开放性骨折模型造模,行克氏针骨髓腔逆行内固定,缝合切口,不包扎。手术后挑选造模成功的72只大鼠,按体重随机分为空白组、对照组及养血固肾汤剂组,每组24只。空白组、对照组及养血固肾汤剂组分别给予纯净水、恒古骨伤愈合剂及养血固肾汤按体重灌胃给药。第一部份生化指标观察:术后d7,d14,d24及d35各组按之前随机编定的数字,各解剖6只动物,采取血液样本。用全自动生化检测仪器,检查血钙、血磷及ALP三项生化指标。第二部份组织病理学观察:于前述每段时间随机解剖的6只动物中,处死后取左下肢胫骨连股骨中下段的部分作成标本,作组织病理学分析;根据组织病理学指导下,检测组织标本,用光学显微镜随性取3个视野点,观察骨小梁面积百分数、成骨细胞指数及破骨细胞指数。第三部份微计算器断层扫描技术(Micro-CT)观察:于前述每段时间随机解剖的6只动物中,随机取当中3只动物,取左下肢胫骨连股骨中下段的部分作成标本,送往检测中进行Micro-Ct检测。使用Micro-CT检测骨折部位,选取感兴建区(region of interest,ROD),利用软件重塑图像,透过分析图像及系统检测,采集BMD,BV/TV,TV,Tb.Th,Tb.Sp,Tb.N及SMI等多项骨参数。统计学分析:所有数据采用(x±s)表示,应用SPSS 21.0软件进行统计分析;计量资料数据方差齐,或数据经转换后方差齐,则采用单因素方差分析;若数据经转换后方差仍不齐,采用秩和检验进行统计分析。成果:于生化指标上,养血固肾汤剂组实验早期相比空白组及对照组明显增加血磷值(P0.05),以及增加钙磷乘积值(P0.01),促进钙盐沉积,血钙值伴随减低(P0.05),从而令到血液中的钙离子进入基质,由于成骨细胞的作用,使钙及磷积聚及结合,形成钙盐沉积,加速骨痂的建立及重塑,有利于骨折愈合的发展。而当中血清的钙离子浓度亦会相应降低。于组织病理学上,d7,相比空白组,养血固肾汤剂组在骨痂出现的基础上,更早出现软骨痂及骨小梁的排列,个别动物可见机化的血肿,骨痂内可见大量软骨细胞及稀疏的骨小梁。d14,相比空白组,养血固肾汤剂组动物骨折处可见纤维性骨痂及大量软骨、致密的骨小梁,于数量上比较多。d24,相比空白组,养血固肾汤剂组大部分动物的骨小梁及骨痂转变加快,表现为骨小梁明显增粗,外骨痂开始形成板状骨,骨痂内可见少量软骨细胞,个别动物骨髓腔再通几方面。d35,空白组与养血固肾汤剂组部分动物俱见外骨痂形成板状骨,骨髓腔内可见骨髓细胞,部分动物骨痂内可见少量软骨细胞和增粗的骨小梁。反映养血固肾汤能促进骨痂的产生时间,而且对骨痂其后的改变,如软骨性骨痂及硬骨痂的产生时间都有促进作用;于骨小梁结构方面同样有作用,表现为催使骨小梁的结构提早出现及结构稠密度增加两方面,更能促进骨折愈合。于Micro-CT采集的骨参数结果中,有关BMD,BV/TV,TV,Tb.Th,Tb.Sp,Tb.N及SMI各组间未见统计学差异。d35,相比空白组,SMI数值明显接近0,代表骨小梁多呈板状骨,亦代表骨小梁的强度相比较高,对比Micro CT数据所整合的平面图像,相比空白组,养血固肾汤能加促骨髓腔再通的时间,于骨小梁结构方面同样有作用,表现为催使骨小梁的结构提早出现及结构稠密度增加两方面,更能促进骨折愈合。结论:1.养血固肾汤能够升高血磷,使钙磷乘积高峰显着升高,促进钙盐沉积,提高骨折愈合中血清碱性磷酸酶的活性,增强体内成骨细胞的活动,促进骨折愈合。2.养血固肾汤能促进骨痂的产生时间,而且对骨痂其后的改变,如软骨性骨痂及硬骨痂的产生时间都有促进作用;于骨小梁结构方面同样有作用,表现为催使骨小梁的结构产生及结构稠密度增加两方面,促进骨折愈合。3.养血固肾汤于Micro-CT采集的骨参数及所整合的平面图像中,反映能加促骨髓腔再通的时间,致密性骨小梁及骨性骨痂的出现提早。
[Abstract]:Objective : To study the effect of nourishing blood and kidney soup on fracture healing process . A total of 72 rats were randomly divided into blank group , control group and blood - nourishing solid - kidney decoction group . In comparison with the blank group , there was no statistical difference in bone callus formation and bone callus formation . Compared with blank group , nourishing blood and strengthening kidney soup can increase blood phosphorus , increase the activity of serum alkaline phosphatase in fracture healing and promote fracture healing .

【学位授予单位】：广州中医药大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285.5

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