非梗阻性无精子症患者接受供精人工授精治疗的影响因素分析及精浆分子标记物研究

发布时间：2018-03-14 00:41

  本文选题：供精人工授精　切入点：临床妊娠率　出处：《北京协和医学院》2017年博士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的:回顾性分析非梗阻性无精子症(non-obstructive azoospermia,NOA)患者的 3880 个供精人工授精(artificial insemination with donor sperm,AID)治疗周期,探讨可能影响AID临床妊娠率的相关因素,以期进一步提高AID助孕技术的成功率。对这些NOA患者的精浆miRNAs表达谱进行分析,筛选与NOA相关的精浆分子标记物,为NOA的诊断和治疗手段的选择提供思路。方法:1.回顾性分析2010年1月至2016年12月因男方NOA于国家卫计委科研所计划生育生殖健康技术服务中心接受AID手术治疗的患者2030例,共3880个治疗周期。探讨AID临床妊娠率与女方年龄、不孕年限、不孕类型、治疗周期数、治疗方案、手术方式、精液参数等因素的关系。首先采用单因素Logistic回归计算各变量比值比(OR)和95%置信区间(95%CI),再将单因素分析有统计学意义的相关变量纳入到多因素Logistic回归模型中,探讨可能影响AID妊娠结局的因素。2.针对有病理分型的部分接受AID治疗的NOA患者,按照睾丸病理组织类型分为唯支持细胞综合征(sertoli cell only syndrome,SCOS)组和生精阻滞(spermatogenesis arrest,SA)组,以1年内配偶怀孕并正常分娩的男性作为正常对照组,样本数分别为SCOS组7例,SA组6例和正常对照组3例。利用Illumina HiSeq X10高通量测序平台对各组精浆miRNAs的表达谱进行测序分析,获得不同睾丸病理组织类型NOA患者的精浆miRNAs表达谱,并对全部miRNAs的靶基因进行预测,对组间差异显著的miRNAs的靶基因进行功能注释和富集分析。3.使用qRT-PCR方法检测miR-34c-5p和miR-202-3p这两个与精子发生相关的睾丸特异性差异miRNAs在接受AID治疗的NOA患者精浆中的表达,SCOS组、SA组和正常对照组每组各1 0例样本。4.使用qRT-PCR方法对预测的富集在NOTCH信号通路上的差异miNRAs的靶基因Hes 5在接受AID治疗的NOA患者精浆中的表达进行检测,SCOS组、SA组和正常对照组每组各5例样本。结果:AID临床妊娠915人,累积临床妊娠率45.1%,周期临床妊娠率23.58%,流产96人(10.5%),单胎妊娠781人(85.4%),多胎妊娠38人(4.1%),截止2016年12月的分娩数为683个,其中活婴分娩数680个(99.56%),出生缺陷4例(0.59%)。AID临床妊娠率影响因素分析:(1)年龄与妊娠率呈负相关;(2)继发不孕妇女妊娠的几率比原发不孕妇女高;(3)手术方式为1次宫颈管内人工授精(ICI)的妊娠率最低,其他三种手术方式妊娠率与1次ICI相比差异有统计学意义;(4)促排并不增加AID妊娠率但会增加多胎率;(5)AID治疗周期数、不孕年限、前向运动精子总数(processed total motile sperm count,PTMS)和精子浓度等精液参数与AID妊娠率没有统计学相关性;NOA患者精浆分子标记物研究:(1)不同睾丸病理组织类型NOA患者的精浆miRNAs表达差异研究:①所有样品共预测出3107个miRNAs,其中已知miRNAs1667个,新预测miRNAs1440个;②miRNAs差异表达分析结果显示与正常对照组相比,SCOS组有78种差异表达的miRNAs,其中4种miRNAs表达上调,74种miRNAs表达下调;SA组有35种差异表达的miRNAs,其中3种miRNAs表达上调,32种miRNAs表达下调;SCOS组精浆miRNAs表达谱与SA组相比,9种miRNAs表达上调,没有下调的差异miRNAs;③聚类分析结果显示不同组间精浆miRNAs表达谱可以明显区分;④全部miRNAs共预测到19669个靶基因,有19651个获得注释信息。对这些注释的靶基因行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析,发现受差异miRNAs调控的靶基因参与的代谢通路中富集程度最高的是NOTCH信号通路。(2)精浆差异miRNAs的验证及NOA可能分子机制探讨:qRT-PCR结果显示miR-34c-5p和miR-202-3p这两个睾丸特异性差异miRNAs在NOA的两组精浆中的相对表达量均显著低于正常对照组,且SCOS组精浆中的表达量比SA组低,差异有统计学意义(P0.05);NOTCH信号通路上的差异miRNAs靶基因Hes5在SA组精浆中的相对表达量显著高于正常对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:AID是一种安全、有效的助孕方式。女方年龄是影响AID临床妊娠率的最重要因素;不孕类型、手术方式也是AID临床妊娠率的重要影响因素;促排卵并不增加AID妊娠率,但会增加多胎妊娠的风险;IUI处理前、处理后前向运动精子总数和精子浓度与AID临床妊娠率无统计学意义;精液常规分析合格的供精者精液实际的临床累积妊娠率却有明显差异。不同睾丸病理组织类型NOA患者的精浆miRNAs表达谱不同;多个差异miRNAs的靶基因富集在NOTCH信号通路上,靶基因Hes5在NOA患者精浆中的表达明显升高;精浆miR-34c-5p和miR-202-3p的表达丰度在正常生育力男性和不同睾丸病理组织类型NOA患者中差异明显,可能成为评价NOA的潜在分子靶标。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：北京协和医学院
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R698.2

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 高榜华;叶英;万奇;;精浆锌的简易测定方法[J];四川医学;1988年03期

2 孙杰,黄旭元,薄隽杰,陈斌,顾志东,王益鑫;精浆前列腺特异性抗原的检测[J];上海第二医科大学学报;2005年02期

3 姚兵;李西营;赵志明;蔡永林;邵永;戈一峰;崔英霞;夏欣一;黄宇烽;;早泄患者精浆生化指标测定及其意义[J];中华男科学杂志;2007年12期

4 蔡文伟;毛金观;;禁欲时间对精浆柠檬酸检测结果的影响[J];中国卫生检验杂志;2010年11期

5 王贵;;不孕患者精浆锌浓度检测[J];医学信息(上旬刊);2011年07期

6 缪钟瑞;郭建;杨惠钟;;正常成年男性血清和精浆性激素浓度季节性变化的初步观察[J];男性学杂志;1988年01期

7 苏建堂;尤国才;;精浆中的免疫抑制物质[J];男性学杂志;1989年01期

8 王英,刘晓端;97例不育男子精浆中微量元素的研究[J];生殖与避孕;1990年01期

9 銘清,侯一平,吴海筠;用人类精浆致敏胶乳最适条件的探讨(摘要)[J];华西医科大学学报;1991年02期

10 张之燕;不育和正常男子精浆中的锌水平[J];国外医学(计划生育分册);1991年03期

相关会议论文 前10条

1 姚兵;李西营;蔡永林;邵永;戈一峰;崔英霞;夏欣一;黄宇烽;;早泄患者精浆生化指标测定及其意义[A];中华医学会第八次全国男科学学术会议论文集[C];2007年

2 王少刚;白剑;席启林;胡东亮;苏世强;刘继红;;慢性非细菌性前列腺炎患者血清和精浆中细胞因子的检测与意义[A];中华医学会第八次全国男科学学术会议论文集[C];2007年

3 王少刚;白剑;席启林;胡东亮;苏世强;刘继红;;慢性非细菌性前列腺炎患者血清和精浆中细胞因子的检测与意义[A];湘鄂赣首届性与生殖健康学术研讨会论文汇编[C];2007年

4 李虹;赵晖;;人精浆抗菌活性及精浆小分子抗菌肽的研究[A];第十五届全国泌尿外科学术会议论文集[C];2008年

5 王鸿祥;陈斌;胡凯;卢永宁;王毓斌;范宇平;韩银发;王益鑫;黄翼然;;精索静脉曲张不育患者精浆中性α糖苷酶及果糖的分析[A];第十五届全国泌尿外科学术会议论文集[C];2008年

6 石晓星;商学军;黄宇烽;;精浆弹性蛋白酶活性与附属性腺功能低下的关系[A];21世纪男科学——中华医学会第五次全国男科学学术会议论文集[C];2004年

7 卢永宁;胡凯;范辉;马逸;韩银发;陈斌;王益鑫;;冻存时间延迟对精浆中性α糖苷酶及果糖检测结果的影响[A];中华医学会第八次全国男科学学术会议论文集[C];2007年

8 孙自学;王祖龙;陈帅垒;王春霞;;男性不育症患者精浆弹性蛋白酶与精浆生化的相关性研究[A];第七次全国中西医结合男科学术会议及全国中西医结合男科提高班论文汇编及讲义[C];2011年

9 李克;商学军;陈永刚;;高效液相色谱法测定精浆过氧化脂质水平及其在不育症研究中的应用[A];21世纪男科学——中华医学会第五次全国男科学学术会议论文集[C];2004年

10 孙自学;王祖龙;陈帅垒;王春霞;;男性不育症患者精浆弹性蛋白酶与精浆生化的相关性研究[A];中华中医药学会第十一届男科学术大会论文集[C];2011年

相关重要报纸文章 前2条

1 陈金伟;精浆中多种因子在CP的发病中起重要作用[N];中国医药报;2006年

2 ;针挑合手术治疗精索静脉曲张不育[N];中国中医药报;2005年

相关博士学位论文 前5条

1 杨晓玉;人类精浆糖基化蛋白质组学研究[D];南京医科大学;2015年

2 张蔚;非梗阻性无精子症患者接受供精人工授精治疗的影响因素分析及精浆分子标记物研究[D];北京协和医学院;2017年

3 黄诗韵;精浆游离mRNA一般特征及附睾液游离mRNA功能的初步研究[D];华中科技大学;2010年

4 孙玲;蛋白质芯片技术对男性不育精浆相关蛋白质群的分析[D];第一军医大学;2007年

5 倪良玉;聚精汤对少弱精性不育患者精浆中纤溶酶原激活因子的影响及“精瘀”理论探讨[D];南京中医药大学;2005年

相关硕士学位论文 前10条

1 张晨雨;VEGF和ADAMTS1在不育男性精浆中的表达及其与精液参数相关性分析[D];郑州大学;2016年

2 朱文秀;精浆弹性蛋白酶在男性不育中的临床意义[D];大连医科大学;2017年

3 孙杨;精浆中酞酸酯类代谢产物与精子质量及血清生殖激素水平间的相关性研究[D];华中科技大学;2016年

4 赵阳;香烟烟雾对雄性大鼠性激素、精浆生化的影响研究[D];山西医科大学;2011年

5 李杰;双向电泳分析精索静脉曲张不育患者精浆蛋白质的表达差异[D];重庆医科大学;2009年

6 杨银涛;精索静脉曲张不育患者精浆生化分析[D];昆明医科大学;2013年

7 张晗;精浆中白介素23的含量测定及与精液质量的关系[D];浙江大学;2007年

8 田英;无精症患者血清、精浆性激素水平与生精细胞检测的相关性研究[D];兰州大学;2008年

9 段平川;精浆AMH与精子质量参数的关系及麒麟丸对精浆AMH的影响[D];北京中医药大学;2015年

10 张欣宗;精浆中IL-17水平与精液质量关系的研究[D];浙江大学;2007年

，

本文编号：1608852