巨噬细胞在预诱导软骨块成骨过程中的作用探究

发布时间：2024-07-11 03:13

　　第一部分体外预诱导软骨块的培养和鉴定研究目的:分离和鉴定小鼠骨髓间充质干细胞,并且在体外制备预诱导软骨块。材料与方法:利用全骨髓贴壁法分离原代C57BL/6小鼠的骨髓来源间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs),培养至第三代,通过流式细胞术(flow cytometry,FCM)鉴定其干细胞特征性表面标志的表达情况,利用对应诱导培养基对细胞进行成骨、成脂向分化,并通过茜素红和油红O染色进行鉴定;随后将第三代BMSCs接种至商用明胶海绵(Spongostan○R)(10⁶细胞/个),经过一周的增殖培养基和四周的软骨块诱导培养基培养后,利用实时荧光定量聚合酶链式反应(Quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测肥大软骨细胞特征性标志,并通过Safranin O染色观察软骨块切片。实验结果:流式细胞术结果显示本研究分离的小鼠BMSCs特征性高表达CD44、CD29和Sca-1,同时基本不表达造血系细胞标志CD31和CD34;成骨诱导培养后茜素红染色可见深红...

【文章页数】：105 页

【学位级别】：博士

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论文创新点
中文摘要
Abstract
引言
文献综述
第一部分 体外预诱导软骨块的培养和鉴定
    实验一 小鼠骨髓间充质干细胞的体外分离培养和鉴定
    实验二 小鼠骨髓间充质干细胞诱导为软骨块
第二部分 清除受体小鼠的单核/巨噬细胞对软骨块皮下成骨成血管的影响..
    实验一 清除小鼠血液循环中的单核/巨噬细胞
    实验二 清除单核/巨噬细胞影响软骨块皮下成骨效应
第三部分 软骨块植入正常小鼠后趋化的巨噬细胞的M2/M1 表型变化
    1 实验材料和仪器
    2 实验方法
    3 实验结果
    4 讨论
第四部分 软骨块与巨噬细胞相互作用的体外研究
    实验一 软骨块对巨噬细胞极化的影响及机制
    实验二 极化后的巨噬细胞对软骨块成骨成血管指标的影响
全文总结
参考文献
攻博期间的科研成果
个人简历
附页
致谢



本文编号：4005165