血清miRNA作为胃癌和食管鳞癌诊断标志物的研究

发布时间：2018-05-14 18:39

本文选题：胃癌 + 血清miRNA　；参考：《南京医科大学》2017年博士论文

【摘要】：背景:胃癌是全球发病率及死亡率较高的恶性肿瘤之一。由于胃癌患者早期缺乏特异性临床表现,且我国普查手段尚未全面推广,大多数患者往往就诊不及时,确诊时已处于进展期。考虑到传统肿瘤标志物敏感性和特异性的相对不足,本研究通过对胃癌患者血清miRNA在较大样本中的系统性分析,旨在寻找对胃癌具有潜在诊断价值的血清miRNA标志。方法:运用Exiqon miRNA qPCR panel进行初筛,以初步获取胃癌患者与正常对照人群静脉血清pool中差异表达的miRNA,随后进一步通过qRT-PCR技术分别在训练集和验证集两个独立样本中验证所获得的结果。并在组织样本、动脉血清以及血清外泌体中对表达差异的miRNA进行验证,同时在组织中进一步探索了 miRNA的预后价值。结果:初筛阶段,通过芯片共获得58个差异表达的候选miRNA,其中包括在胃癌血清pool中高表达的51个miRNA和7个低表达miRNA。通过qRT-PCR在训练集和验证集中对候选miRNA行进一步验证,结果表明miR-10b-5p、miR-132-3p、miR-185-5p、miR-195-5p、miR-20a-3p 和 miR-296-5p 在胃癌患者血清中呈明显高表达。同时,这6个miRNA组成的分子标签可以作为区分胃癌患者和正常对照人群的分子标志物。通过受试者工作特征曲线(ROC)分析,该分子标签在训练集和验证集所对应的曲线下面积(AUC)分别为0.764和0.702。除了 miR-132-3p,另外5个miRNA在胃癌组织均呈高表达,miR-10b-5p和miR-296-5p具有统计学显著性差异。并且在未接受化疗的胃癌患者中,组织中miR-10b-5p和miR-296-5p相对高表达的患者预后欠佳。另外,在胃癌患者血清外泌体中,miR-10b-5p、miR-195-5p、miR-20a-3p 和 miR-296-5p 均呈明显高表达。然而,这6个miRNA在动静脉血中的表达并未呈现统计学差异。结论:血清 miR-10b-5p、miR-132-3p、miR-185-5p、miR-195-5p、miR-20a-3p和miR-296-5p可作为胃癌的潜在诊断标志物,且这6个miRNA所组成的分子标签能够有效的区分胃癌患者和正常人群。背景:食管癌是全球常见的恶性消化道肿瘤之一,中国更是食管癌高发国家。食管鳞癌是我国食管癌的主要病理类型。根治性手术是最主要的能治愈食管鳞癌的手段,但由于患者往往就诊不及时,食管鳞癌患者术后复发转移的几率仍较高,预后并不理想。目前尚无理想、可靠的食管鳞癌诊断标志物。因此,寻找能早期诊断食管鳞癌的分子标志物,或可为食管鳞癌诊断和预后的改善提供新的策略。本研究通过对食管鳞癌患者的血清miRNA进行筛选分析,以期为血清miRNA更好地成为诊断食管鳞癌的标志物提供证据。方法:本研究通过多个阶段的独立试验对血清miRNA进行筛选。运用Exiqon miRNA qPCR panel获取食管鳞癌患者与正常对照人群静脉血清pool中差异表达的miRNA,随后在训练集、验证集以及额外验证集中,通过qRT-PCR相对定量法进一步验证初筛得到的miRNA。另外,在组织样本、动脉血清、血清外泌体中对筛选的miRNA进行血清中存在形式的分析。结果:在芯片初筛阶段,共筛选出36个miRNA成为候选miRNA,其中33个miRNA在食管鳞癌患者血清poo1中高表达,3个miRNA低表达。通过qRT-PCR技术在训练集和验证集两个阶段对候选的miRNA进行进一步检测验证,最终结果证实 miR-20b-5p、miR-28-3p、miR-192-5p、miR-223-3p 和 miR-296-5p 在食管鳞癌患者血清中呈明显高表达。独立的额外验证集实验进一步验证了这5个高表达的血清miRNA。另外,我们将这5个miRNA整合为一个分子标签,发现该标签具有鉴别食管鳞癌患者和正常对照人群的能力。随后我们通过受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)分析,得出该分子标签在训练集、验证集和额外验证集三个阶段所对应的曲线下面积(Area Under ROC Curve,AUC)分别为 0.753、0.763 和 0.966。同时 5 个候选 miRNA在食管鳞癌组织均呈一致性高表达,并且miR-20b-5p、miR-28-3p和miR-192-5p具有统计学差异,而miR-296-5p在食管鳞癌患者血清外泌体中表达明显上调。这5个miRNA在食管鳞癌患者动静脉血清中的表达无明显差异。结论:本研究发现了血清 miR-20b-5p、miR-28-3p、miR-192-5p、miR-223-3p和miR-296-5p在食管鳞癌患者中呈显著高表达,由这5个miRNA所组成的分子标签可作为食管鳞癌的潜在诊断标志物。
[Abstract]:Background : Gastric cancer is one of the most common malignant tumors with high morbidity and mortality . The results are as follows : In addition , the expression of miR - 10b - 5p , miR - 133 - 5p , miR - 10b - 5p and miR - 296 - 5p in the serum pool of gastric cancer is highly expressed by using Exiqon miRNA qPCR panel . The results showed that the expression of miR - 20b - 5p , miR - 28 - 3P , miR - 192 - 5p , miR - 223 - 3P and miR - 296 - 5p in esophageal squamous cell carcinoma was detected by qRT - PCR . The results showed that the expression of miR - 20b - 5p , miR - 28 - 3P , miR - 192 - 5p , miR - 223 - 3P and miR - 296 - 5p in esophageal squamous cell carcinoma was significantly higher . miR - 28 - 3P , miR - 192 - 5p , miR - 223 - 3P and miR - 296 - 5p are highly expressed in esophageal squamous cell carcinoma , and the molecular label composed of these five miRNA can be used as a potential diagnostic marker for esophageal squamous cell carcinoma .

【学位授予单位】：南京医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R735

【参考文献】