HDAC2在鼻息肉中的表达及在激素治疗敏感性中的作用研究

  本文关键词：Tfh细胞及其相关因子Bcl-6和IL-21在CRSwNP病人鼻息肉中的表达和意义的研究，由笔耕文化传播整理发布。

《复旦大学》 2014年

HDAC2在鼻息肉中的表达及在激素治疗敏感性中的作用研究

王欢  

【摘要】：目的：研究组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)在鼻息肉组织中的表达以及鼻黏膜上皮细胞中HDAC2的表达对激素抗炎作用的影响。方法：门诊随访鼻内镜术后的鼻息肉患者,共收集成年鼻息肉患者28例,包括13例复发和15例未复发的患者。分别采用免疫组织化学方法(SP法)检测HDAC2在复发鼻息肉患者、未复发鼻息肉患者以及11例正常中甲黏膜组织中的表达,并分析吸烟和HDAC2表达的关系。取正常中甲鼻黏膜,利用0.05%蛋白酶ⅪⅤ消化法分离上皮细胞进行体外培养。在有/无丙酸氟替卡松(Fluticasone Propionate)存在的情况下,利用IL-1p刺激鼻黏膜上皮细胞,24小时后收集细胞上清,利用酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay ELISA)测定鼻黏膜上皮细胞分泌白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素(IL-8)的水平。再分别采用HDAC2抑制剂(TSA) +IL-1β和HDAC2特异性小干扰RNA (siRNA)+IL-1β对鼻黏膜上皮细胞进行干预,用western blot检测siRNA对HDAC2表达的干扰效率,采用ELISA法进一步观察不同刺激对激素调控鼻黏膜上皮细胞分泌细胞因子II-6、8的影响。结果：HDAC2在所有患者的鼻息肉组织和正常黏膜的上皮层和固有层均有表达。HDAC2在鼻息肉组织的黏膜上皮层和固有层表达均显著低于正常黏膜的表达(P0.05),而HDAC2在复发鼻息肉患者和未复发鼻息肉患者中的表达未见显著性差异。吸烟对鼻息肉组织中HDAC2的表达没有影响(P0.05)。利用0.05%蛋白酶ⅪV消化分离法能够成功分离鼻黏膜上皮细胞,倒置显微镜下观察见贴壁生长的鼻黏膜上皮细胞呈铺路石样形态;细胞培养约8d后可进行传代培养,传代培养2-3代的上皮细胞依然保持上皮细胞的形态和增殖特性。IL-1β刺激鼻黏膜上皮细胞24h后可激活上皮细胞,表现为上皮细胞分泌IL-6和IL-8水平显著增高；梯度浓度丙酸氟替卡松(10-6-10-10M)可抑制IL-1 β刺激鼻黏膜上皮细胞释放IL-6和IL-8；TSA或HDAC2特异性siRNA干预能抑制鼻黏膜上皮细胞HDAC2的表达,从而降低丙酸氟替卡松对鼻黏膜上皮细胞分泌IL-6和IL-8的抑制作用。结论：HDAC2在鼻息肉组织中的低表达可能在鼻息肉发生发展中起到一定的作用。鼻黏膜上皮细胞中HDAC2可能参与介导了激素的抗炎作用。

【关键词】：
【学位授予单位】：复旦大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R765.25
【目录】：

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