补骨脂治疗溃疡性结肠炎活性物质筛选及机制研究

发布时间：2020-12-30 13:16

　　溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,UC）是一种反复发作的慢性非特异性炎症疾病,其特征是腹泻和直肠出血,炎症通常从直肠开始,涉及结肠黏膜和黏膜下层,然后随着时间的推移扩散到整个结肠。因其病因复杂,发病环节多,治愈难度大,复发率高,预后较差且增加患结肠癌的风险而被世界卫生组织列为现代难治病之一。中医临床常用补骨脂及含补骨脂的制剂治疗脾肾两虚型慢性溃疡性结肠炎,并取得了较好的疗效,但其药效物质基础及作用机制尚不明确。目前已经从补骨脂中分离出多种化学成分,主要包括香豆素类、黄酮类、查尔酮类和单酚萜类等。补骨脂中的成分具有广泛的药理活性,如抗炎、抗菌、抗氧化、抗肿瘤、抗抑郁、雌激素样作用、促进骨生长和神经保护等。本研究建立了补骨脂药材指纹图谱研究方法,测定了来自10个产地29批次补骨脂药材中补骨脂素、异补骨脂素、异补骨脂二氢黄酮、新补骨脂异黄酮、补骨脂甲素、欧前胡素、补骨脂宁、补骨脂定、4.5-去氢异补骨脂定、补骨脂乙素、异补骨脂色烯查尔酮和补骨脂酚等12种成分的含量。我们发现补骨脂酚、补骨脂素、异补骨脂素和补骨脂乙素为补骨脂药材中含量最高的4种成分。在补骨脂指纹图谱建立的基础... 

【文章来源】：沈阳药科大学辽宁省

【文章页数】：116 页

【学位级别】：博士

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摘要
Abstract
缩略语表
第1章 绪论
    1.1 溃疡性结肠炎研究概况
        1.1.1 流行病学和发病因素
        1.1.2 治疗研究进展
    1.2 化学药物和细菌诱导的UC动物模型及其在药物研究中的应用
        1.2.1 葡聚糖硫酸钠诱导的结肠炎
        1.2.2 恶唑酮诱导的结肠炎
        1.2.3 醋酸性结肠炎
        1.2.4 沙门菌引起的结肠炎
        1.2.5 不同溃疡性结肠炎动物模型在药物研究中的比较评价
    1.3 法尼酯衍生物X受体与UC黏膜屏障保护研究进展
    1.4 补骨脂药理作用研究概况
        1.4.1 化学成分
        1.4.2 药理作用
    1.5 本研究立题依据
第2章 补骨脂药材指纹图谱及主要成分含量检测研究
    2.1 实验材料
        2.1.1 受试药材
        2.1.2 标准品
        2.1.3 试剂
        2.1.4 仪器
    2.2 实验方法和结果
        2.2.1 色谱条件
        2.2.2 供试品溶液的制备方法
        2.2.3 对照品溶液的制备方法
        2.2.4 指纹图谱研究
        2.2.5 指标成分含量测定
    2.3 讨论
    2.4 小结
第3章 补骨脂多成分体内分析方法建立及大鼠药代动力学研究
    3.1 材料与仪器
        3.1.1 药材与试剂
        3.1.2 仪器
        3.1.3 实验动物
    3.2 实验方法
        3.2.1 分析方法的建立
        3.2.2 方法学验证
        3.2.3 补骨脂活性成分体内药代动力学研究
    3.3 实验结果
        3.3.1 离子化方式选择
        3.3.2 方法学验证结果
        3.3.3 LC/MS/MS法检测补骨脂药材中主要成分含量
        3.3.4 大鼠药代动力学结果
    3.4 讨论
    3.5 小结
第4章 补骨脂主要成分治疗UC表型筛选
    4.1 实验材料
        4.1.1 实验动物
        4.1.2 实验材料与试剂
    4.2 实验方法
        4.2.1 模型建立
        4.2.2 剂量选择依据
        4.2.3 受试物配置
        4.2.4 动物分组及给药
        4.2.5 小鼠病理指标统计
        4.2.6 试验动物取材
        4.2.7 血清总胆汁酸和炎症因子测定
        4.2.8 结肠内容物总胆汁酸测定
        4.2.9 结肠组织病理学分析
        4.2.10 统计分析
    4.3 实验结果
        4.3.1 补骨脂中各组分对结肠炎小鼠疾病表型的影响
        4.3.2 补骨脂中各组分对血清炎症因子的影响
        4.3.3 补骨脂中各组分对血清和结肠内容物总胆汁酸的影响
        4.3.4 补骨脂中各组分对结肠组织病理学的影响
    4.4 讨论
    4.5 小结
第5章 补骨脂素治疗DSS致小鼠UC作用机制初步研究
    5.1 实验材料
        5.1.1 实验动物
        5.1.2 主要试剂和主要仪器
    5.2 实验方法
        5.2.1 模型建立
        5.2.2 剂量选择
        5.2.3 受试物配置
        5.2.4 动物分组及给药
        5.2.5 小鼠疾病活动指数
        5.2.6 实验动物取材
        5.2.7 血清总胆汁酸和炎症因子测定
        5.2.8 结肠内容物总胆汁酸测定
        5.2.9 反转录-荧光定量PCR （RT-PCR）
        5.2.10 蛋白免疫印迹分析（Western blot）
        5.2.11 结肠组织病理学分析
        5.2.12 统计分析
    5.3 实验结果
        5.3.1 补骨脂素对结肠炎小鼠疾病表型的影响
        5.3.2 补骨脂素对血清炎症因子的影响
        5.3.3 补骨脂素对血清和粪便总胆汁酸的影响
        5.3.4 补骨脂素对结肠组织IL-6、IL-1 β和TNF-α mRNA表达的影响
        5.3.5 补骨脂素对回肠组织Fxr、Fgf15和Shp mRNA表达的影响
        5.3.6 补骨脂素对回肠组织转运体Asbt、Ost α、Ost β和l-Babp mRNA表达的影响
        5.3.7 补骨脂素对回肠FXR和FGF15蛋白表达
        5.3.8 补骨脂素对肝脏cyp7a1 mRNA以及CYP7A1蛋白表达
        5.3.9 补骨脂素对结肠组织病理学的影响
    5.4 讨论
    5.5 小结
全文结论
参考文献
攻读博士学位期间取得的学术成果
致谢
附件


【参考文献】：
期刊论文
[1]补骨脂中对脂多糖诱导RAW 264.7细胞产生一氧化氮抑制作用的补骨脂酚及其衍生物[J]. 吕倩,许青霞,张英涛,杨秀伟.  中草药. 2020(02)
[2]朱丹溪以脾为本论治泄泻特色举隅[J]. 张盼.  浙江中医杂志. 2020(01)
[3]刘佃温教授采用四神丸贴脐疗法治疗溃疡性结肠炎经验[J]. 高莉莉,刘廷富,仝若平,刘畅,冯娇娇,魏鹏辉,杨会举.  中医研究. 2019(10)
[4]中国药典2015年版及《临床用药须知》收载治疗溃疡性结肠炎成方制剂的用药特点分析[J]. 吴子聪,邓剑平,王一飞,王治平.  中国现代应用药学. 2019(15)
[5]补骨脂的化学成分及主要毒性研究进展[J]. 魏蒙蒙,王树瑶,杨维,李鹰飞,李川.  中国实验方剂学杂志. 2019(07)
[6]补骨脂化学成分及药理作用研究进展[J]. 鲁亚奇,张晓,王金金,李凯,周宁,张振凌.  中国实验方剂学杂志. 2019(03)
[7]黄土汤合四神丸加味口服治疗脾肾阳虚型溃疡性结肠炎的临床疗效[J]. 武赞仁,李丰林.  中国肛肠病杂志. 2018 (05)
[8]Dextran sodium sulfate colitis murine model: An indispensable tool for advancing our understanding of inflammatory bowel diseases pathogenesis[J]. Derrick D Eichele,Kusum K Kharbanda.  World Journal of Gastroenterology. 2017(33)
[9]炎症性肠病患者血清胆汁酸谱的研究[J]. 陆霞娟,周敏,瞿春莹,葛文松,陈颖伟.  胃肠病学. 2017(05)
[10]中药内服联合灌肠治疗溃疡性结肠炎概况[J]. 王雪,李桂贤,蒙竹韵,刘丹,李哮天.  湖南中医杂志. 2017(04)



本文编号：2947707