PRRC2C对肝细胞癌生物学行为的影响及其临床意义的研究
发布时间：2021-04-16 06:37
一、研究背景及目的在全球范围内,肝细胞癌（HCC）的发病率、死亡率居高不下,缺乏特异性肿瘤分子标记物及治疗靶点是重要原因之一。基于本课题组前期生物信息学分析筛选及文献研究,PRRC2C（proline rich coiled-coil2C）在HCC中与正常肝组织存在表达差异,目前尚未有在肝细胞癌中作用的报道,亦不了解其作用机制。本课题组提出PRRC2C是HCC的驱动基因并促进HCC细胞增殖及转移的假设。据此,我们设计了实验步骤,分别从细胞水平,动物模型上,人肝癌组织芯片三个层面研究PRRC2C对肝细胞癌生物学行为的影响、作用机制及临床意义,探讨其作为肿瘤分子标记物及治疗靶点的潜在价值。二、方法1.验证PRRC2C基因在4种人肝癌细胞系BEL-7402、BEL-7404、SMMC-7721、Hep G2细胞中表达丰度;2.利用慢病毒介导的RNAi技术,构建BEL-7404、SMMC-7721细胞的PRRC2C基因沉默细胞模型（实验组shPRRC2C,对照组shCtrl）;3.利用Celigo细胞计数检测、Annexin V-APC单染法流式细胞仪检测、细胞克隆形成检测、MTT实验检测肝癌...
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：124 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１－１?ＧＶ１Ｉ５载体双酶Ｆｉｇｕｒｅ?１－１?ＧＶ１１５?ｖｅｃｔｏｒ?ｄｏｕｂｌ
１．１．３．１?ＰＲＲＣ２Ｃ重组ＲＮＡ干扰载体的鉴定??ＳＩ??１?２?３??图１－１?ＧＶ１Ｉ５载体双酶切结果??Ｆｉｇｕｒｅ?１－１?ＧＶ１１５?ｖｅｃｔｏｒ?ｄｏｕｂｌｅ?ｅｎｚｙｍｅ?ｄｉｇｅｓｔｉｏｎ??对ＧＶ１１５空载体用Ａｇｅ?Ｉ和ＥｃｏＲ?ｌ限制性内切酶进行双酶切，用１?％的琼脂??糖凝胶电泳（图１－１）显示：没有酶切的载体质粒有两条条带（泳道３）（是由??于质粒提取试剂盒获取的质粒打两条完整的双链或带ｆｊ■一条完整１?丫ｔ链和一条断??裂的单链）；经过Ａｇｅ?１和ＥｃｏＲｌ双酶切线性化后的载体质粒变成单一的条带，??说明载体己成功切开（泳道２）。??１?２?３?４?５?６?７?８??图１－２?ＧＶＵ５重组千扰载体ＰＣＲ鉴定??Ｆｉｇｕｒｅ?１－２?ＧＶ１１５?ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ?ｉｎｔｅｒｆｅｒｉｎｇ?＼?ｃｃｔｏｒ?ｂ＞?ＰＣＲ??２７??
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【参考文献】：
期刊论文
[1]Epigenetics in hepatocellular carcinoma: An update and future therapy perspectives[J]. Li Ma,Mei-Sze Chua,Ourania Andrisani,Samuel So. World Journal of Gastroenterology. 2014(02)
[2]N-钙黏蛋白在胃癌组织中的表达[J]. 赵文文,丁爱萍,周泉,迟程,张茜,孙笑笑,邱文生. 青岛医药卫生. 2013(03)
[3]Beyond tumorigenesis: cancer stem cells in metastasis[J]. Benjamin Tiede,JoanMassagué. Cell Research. 2007(01)
本文编号：3140936
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：124 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１－１?ＧＶ１Ｉ５载体双酶Ｆｉｇｕｒｅ?１－１?ＧＶ１１５?ｖｅｃｔｏｒ?ｄｏｕｂｌ
１．１．３．１?ＰＲＲＣ２Ｃ重组ＲＮＡ干扰载体的鉴定??ＳＩ??１?２?３??图１－１?ＧＶ１Ｉ５载体双酶切结果??Ｆｉｇｕｒｅ?１－１?ＧＶ１１５?ｖｅｃｔｏｒ?ｄｏｕｂｌｅ?ｅｎｚｙｍｅ?ｄｉｇｅｓｔｉｏｎ??对ＧＶ１１５空载体用Ａｇｅ?Ｉ和ＥｃｏＲ?ｌ限制性内切酶进行双酶切，用１?％的琼脂??糖凝胶电泳（图１－１）显示：没有酶切的载体质粒有两条条带（泳道３）（是由??于质粒提取试剂盒获取的质粒打两条完整的双链或带ｆｊ■一条完整１?丫ｔ链和一条断??裂的单链）；经过Ａｇｅ?１和ＥｃｏＲｌ双酶切线性化后的载体质粒变成单一的条带，??说明载体己成功切开（泳道２）。??１?２?３?４?５?６?７?８??图１－２?ＧＶＵ５重组千扰载体ＰＣＲ鉴定??Ｆｉｇｕｒｅ?１－２?ＧＶ１１５?ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ?ｉｎｔｅｒｆｅｒｉｎｇ?＼?ｃｃｔｏｒ?ｂ＞?ＰＣＲ??２７??
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【参考文献】：
期刊论文
[1]Epigenetics in hepatocellular carcinoma: An update and future therapy perspectives[J]. Li Ma,Mei-Sze Chua,Ourania Andrisani,Samuel So. World Journal of Gastroenterology. 2014(02)
[2]N-钙黏蛋白在胃癌组织中的表达[J]. 赵文文,丁爱萍,周泉,迟程,张茜,孙笑笑,邱文生. 青岛医药卫生. 2013(03)
[3]Beyond tumorigenesis: cancer stem cells in metastasis[J]. Benjamin Tiede,JoanMassagué. Cell Research. 2007(01)
本文编号：3140936
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