基于蛋白质的抗癌药物运输及药物作用靶点研究
发布时间：2021-04-25 14:07
癌症,又称恶性肿瘤,是严重危害人类健康的主要公共卫生问题之一。目前癌症的治疗方法主要包括手术、化疗、放疗和免疫治疗等。近年来通过对癌症和抗癌药物以及其他相关学科的创新研究,极大地推动了抗癌新药物和癌症治疗新技术的不断发展。在诸多的癌症治疗策略中,无论是单独使用,还是与手术或放疗联合使用,化疗都是应用最广泛的癌症治疗选择之一。由于传统的化疗药物的药代动力学特性较差,因此常规化疗通常只具有较低的治疗窗口期。除此之外,传统的化疗药物并不是特异性地作用于肿瘤细胞,它们还可以影响细胞增殖速度较快的正常细胞,而这可能会导致癌症患者出现危及生命的副作用。因此解决传统化疗药物所具有的相关问题并改善其药理特性对于化疗来说是十分重要的事情。此外,研究一些金属药物与蛋白质的作用,可以进一步开发现有金属药物的治疗潜能,并使之有望取代原有的一些毒副作用大或者药效较差的药物,从而为癌症治疗时的给药方案提供更多的选择。本论文首先在第一章对基于蛋白质的抗癌药物载体及药物作用靶点的相关研究进行了综述,主要涉及以蛋白质为运输载体的纳米药物运输体系的介绍,然后介绍了以单克隆抗体和纳米抗体等功能性蛋白用于药物的主动靶向运输,...
【文章来源】：中国科学技术大学安徽省 211工程院校 985工程院校
【文章页数】：123 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第1章 绪论
1.1 癌症的危害及其治疗策略
1.2 基于蛋白质载体的纳米药物在癌症治疗中的应用
1.2.1 纳米药物运输体系
1.2.2 基于蛋白质载体的纳米药物
1.3 抗体药物偶联物在癌症治疗中的应用
1.3.1 单克隆抗体
1.3.2 纳米抗体
1.4 以蛋白质为作用靶点的金属药物在癌症治疗中的应用
1.4.1 金属药物及其与蛋白质的作用
1.4.2 急性早幼粒细胞白血病（APL）与PML-RARα
1.4.3 三氧化二砷在治疗急性早幼粒细胞白血病中的应用
1.5 本课题的选题目的和主要内容
参考文献
第2章 共运输维甲酸增强白蛋白-紫杉醇纳米药物的抗肿瘤转移效果
2.1 引言
2.2 实验材料
2.2.1 主要试剂及材料
2.2.2 细胞及培养
2.2.3 实验动物
2.3 实验方法
2.3.1 紫杉醇-维甲酸纳米药物颗粒的制备
2.3.2 紫杉醇-维甲酸纳米药物颗粒的粒径的测量
2.3.3 纳米药物颗粒中紫杉醇和维甲酸包封率和载药量的测定
2.3.4 紫杉醇-维甲酸纳米药物颗粒的稳定性检测
2.3.5 紫杉醇-维甲酸纳米药物颗粒中药物的释放
2.3.6 紫杉醇-维甲酸纳米药物颗粒的细胞毒性检测
2.3.7 紫杉醇-维甲酸纳米药物颗粒抑制肿瘤细胞的迁移和侵袭能力
2.3.8 紫杉醇-维甲酸纳米药物颗粒降低基质金属蛋白酶的活性
2.3.9 紫杉醇-维甲酸纳米药物颗粒降低肿瘤干细胞水平
2.3.10 紫杉醇-维甲酸纳米药物颗粒抑制肿瘤生长
2.3.11 紫杉醇-维甲酸纳米药物颗粒抑制肿瘤转移
2.4 结果与讨论
2.4.1 纳米颗粒的表征
2.4.2 纳米药物颗粒中药物负载量的测定
2.4.3 纳米药物颗粒中药物的体外释放
2.4.4 白蛋白纳米药物颗粒的细胞毒性检测
2.4.5 白蛋白纳米药物颗粒对肿瘤细胞的迁移和侵袭能力的抑制
2.4.6 白蛋白纳米药物颗粒的抗肿瘤效果
2.4.7 白蛋白纳米药物颗粒的抗肿瘤转移效果
2.4.8 白蛋白纳米药物颗粒对基质金属蛋白酶（MMPs）活性影响
2.4.9 白蛋白纳米药物颗粒对肿瘤干细胞水平的影响
2.5 本章小结
参考文献
第3章 一种具有磁共振造影功能的纳米抗体药物偶联物用于铂药的靶向运输
3.1 引言
3.2 实验材料
3.2.1 主要试剂及材料
3.2.2 细胞及培养
3.2.3 实验动物
3.3 实验方法
3.3.1 马来酰亚胺基顺铂前药的合成
3-tag模型肽与Mal-Pt的反应"> 3.3.2 C3-tag模型肽与Mal-Pt的反应
3.3.3 蛋白表达与纯化
3+的结合"> 3.3.4 蛋白与顺铂前药的偶联及与钆离子Gd3+的结合
3.3.5 纳米抗体铂药偶联物与DNA的反应
3.3.6 Western Blot检测EGFR的表达水平
3.3.7 融合蛋白的FITC荧光标记
3.3.8 流式细胞术检测融合蛋白的细胞靶向性
3.3.9 激光共聚焦检测融合蛋白的细胞靶向性
3.3.10 铂的细胞摄取
3.3.11 细胞毒性检测
3.3.12 细胞凋亡检测
3.3.13 白蛋白结合分析
3.3.14 药代动力学分析
3.3.15 药物组织分布
3.3.16 肿瘤生长抑制活性分析
3.3.17 肝功能和肾功能检测
3.3.18 TUNEL染色
3.3.19 纵向弛豫率r1的测定
1加权磁共振成像"> 3.3.20 T1加权磁共振成像
3.4 结果与讨论
3.4.1 马来酰亚胺基顺铂前药的合成与表征
3-tag模型肽与Mal-Pt的反应"> 3.4.2 C3-tag模型肽与Mal-Pt的反应
3.4.3 蛋白质的表达与纯化
3+的结合"> 3.4.4 蛋白与顺铂前药的偶联及与钆离子Gd3+的结合
3.4.5 纳米抗体铂药偶联物与DNA的反应
3.4.6 EGFR高水平表达细胞的鉴定
3.4.7 融合蛋白对EGFR高水平表达细胞的靶向性鉴定
3.4.8 纳米抗体介导的铂药靶向摄取分析
3.4.9 纳米抗体铂的细胞毒性分析
3.4.10 抗白蛋白纳米抗体介导的白蛋白结合和血液循环时间延长
3.4.11 药物组织分布
3.4.12 抗肿瘤效果评价
3.4.13 系统毒性评价
3.4.14 磁共振成像（MRI）
3.5 本章小结
参考文献
第4章 一种能够诱导APL细胞的分化和凋亡的芳基钌化合物的研究
4.1 引言
4.2 实验材料
4.2.1 主要试剂及材料
4.3 实验方法
4.3.1 细胞培养
4.3.2 细胞毒性检测
4.3.3 Western Blot （WB）
4.3.4 免疫荧光染色（IF）
4.3.5 流式细胞术检测NB4细胞的分化
4.3.6 NBT还原实验
4.3.7 细胞周期检测
4.3.8 细胞凋亡检测
4.3.9 钌类化合物的细胞摄取
4.3.10 NB4细胞中基因组DNA的钌化
4.3.11 基因组DNA与钌化合物的反应
4.3.12 PML蛋白的表达与纯化
4.3.13 荧光滴定
4.3.14 圆二色谱（CD）的测定
4.3.15 质谱（ESI-MS）的测定
1H-15N-HSQC二维核磁共振图谱的测定"> 4.3.16 1H-15N-HSQC二维核磁共振图谱的测定
4.4 结果与讨论
4.4.1 细胞毒性分析
4.4.2 芳基钌化合物介导PML-RARα的降解
4.4.3 芳基钌化合物介导APL细胞的分化
4.4.4 Ru-1与Zn-PML环指结构域的结合
4.4.5 Ru-1对Zn-PML环指结构域空间折叠的影响
4.4.6 四种芳基钌化合物药效不同的探究
4.4.7 Ru-1与DNA的结合
4.4.8 Ru-1对NB4细胞周期的影响
4.4.9 Ru-1介导的NB4细胞凋亡
4.5 本章小结
参考文献
总结与展望
致谢
在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果
【参考文献】：
期刊论文
[1]叶酸介导表没食子儿茶素没食子酸白蛋白纳米粒的制备及其体外靶向性与活性评价[J]. 祖元刚,袁帅,赵修华,张俞,张晓楠,姜茹. 药学学报. 2009(05)
本文编号：3159521
【文章来源】：中国科学技术大学安徽省 211工程院校 985工程院校
【文章页数】：123 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第1章 绪论
1.1 癌症的危害及其治疗策略
1.2 基于蛋白质载体的纳米药物在癌症治疗中的应用
1.2.1 纳米药物运输体系
1.2.2 基于蛋白质载体的纳米药物
1.3 抗体药物偶联物在癌症治疗中的应用
1.3.1 单克隆抗体
1.3.2 纳米抗体
1.4 以蛋白质为作用靶点的金属药物在癌症治疗中的应用
1.4.1 金属药物及其与蛋白质的作用
1.4.2 急性早幼粒细胞白血病（APL）与PML-RARα
1.4.3 三氧化二砷在治疗急性早幼粒细胞白血病中的应用
1.5 本课题的选题目的和主要内容
参考文献
第2章 共运输维甲酸增强白蛋白-紫杉醇纳米药物的抗肿瘤转移效果
2.1 引言
2.2 实验材料
2.2.1 主要试剂及材料
2.2.2 细胞及培养
2.2.3 实验动物
2.3 实验方法
2.3.1 紫杉醇-维甲酸纳米药物颗粒的制备
2.3.2 紫杉醇-维甲酸纳米药物颗粒的粒径的测量
2.3.3 纳米药物颗粒中紫杉醇和维甲酸包封率和载药量的测定
2.3.4 紫杉醇-维甲酸纳米药物颗粒的稳定性检测
2.3.5 紫杉醇-维甲酸纳米药物颗粒中药物的释放
2.3.6 紫杉醇-维甲酸纳米药物颗粒的细胞毒性检测
2.3.7 紫杉醇-维甲酸纳米药物颗粒抑制肿瘤细胞的迁移和侵袭能力
2.3.8 紫杉醇-维甲酸纳米药物颗粒降低基质金属蛋白酶的活性
2.3.9 紫杉醇-维甲酸纳米药物颗粒降低肿瘤干细胞水平
2.3.10 紫杉醇-维甲酸纳米药物颗粒抑制肿瘤生长
2.3.11 紫杉醇-维甲酸纳米药物颗粒抑制肿瘤转移
2.4 结果与讨论
2.4.1 纳米颗粒的表征
2.4.2 纳米药物颗粒中药物负载量的测定
2.4.3 纳米药物颗粒中药物的体外释放
2.4.4 白蛋白纳米药物颗粒的细胞毒性检测
2.4.5 白蛋白纳米药物颗粒对肿瘤细胞的迁移和侵袭能力的抑制
2.4.6 白蛋白纳米药物颗粒的抗肿瘤效果
2.4.7 白蛋白纳米药物颗粒的抗肿瘤转移效果
2.4.8 白蛋白纳米药物颗粒对基质金属蛋白酶（MMPs）活性影响
2.4.9 白蛋白纳米药物颗粒对肿瘤干细胞水平的影响
2.5 本章小结
参考文献
第3章 一种具有磁共振造影功能的纳米抗体药物偶联物用于铂药的靶向运输
3.1 引言
3.2 实验材料
3.2.1 主要试剂及材料
3.2.2 细胞及培养
3.2.3 实验动物
3.3 实验方法
3.3.1 马来酰亚胺基顺铂前药的合成
3-tag模型肽与Mal-Pt的反应"> 3.3.2 C3-tag模型肽与Mal-Pt的反应
3.3.3 蛋白表达与纯化
3+的结合"> 3.3.4 蛋白与顺铂前药的偶联及与钆离子Gd3+的结合
3.3.5 纳米抗体铂药偶联物与DNA的反应
3.3.6 Western Blot检测EGFR的表达水平
3.3.7 融合蛋白的FITC荧光标记
3.3.8 流式细胞术检测融合蛋白的细胞靶向性
3.3.9 激光共聚焦检测融合蛋白的细胞靶向性
3.3.10 铂的细胞摄取
3.3.11 细胞毒性检测
3.3.12 细胞凋亡检测
3.3.13 白蛋白结合分析
3.3.14 药代动力学分析
3.3.15 药物组织分布
3.3.16 肿瘤生长抑制活性分析
3.3.17 肝功能和肾功能检测
3.3.18 TUNEL染色
3.3.19 纵向弛豫率r1的测定
1加权磁共振成像"> 3.3.20 T1加权磁共振成像
3.4 结果与讨论
3.4.1 马来酰亚胺基顺铂前药的合成与表征
3-tag模型肽与Mal-Pt的反应"> 3.4.2 C3-tag模型肽与Mal-Pt的反应
3.4.3 蛋白质的表达与纯化
3+的结合"> 3.4.4 蛋白与顺铂前药的偶联及与钆离子Gd3+的结合
3.4.5 纳米抗体铂药偶联物与DNA的反应
3.4.6 EGFR高水平表达细胞的鉴定
3.4.7 融合蛋白对EGFR高水平表达细胞的靶向性鉴定
3.4.8 纳米抗体介导的铂药靶向摄取分析
3.4.9 纳米抗体铂的细胞毒性分析
3.4.10 抗白蛋白纳米抗体介导的白蛋白结合和血液循环时间延长
3.4.11 药物组织分布
3.4.12 抗肿瘤效果评价
3.4.13 系统毒性评价
3.4.14 磁共振成像（MRI）
3.5 本章小结
参考文献
第4章 一种能够诱导APL细胞的分化和凋亡的芳基钌化合物的研究
4.1 引言
4.2 实验材料
4.2.1 主要试剂及材料
4.3 实验方法
4.3.1 细胞培养
4.3.2 细胞毒性检测
4.3.3 Western Blot （WB）
4.3.4 免疫荧光染色（IF）
4.3.5 流式细胞术检测NB4细胞的分化
4.3.6 NBT还原实验
4.3.7 细胞周期检测
4.3.8 细胞凋亡检测
4.3.9 钌类化合物的细胞摄取
4.3.10 NB4细胞中基因组DNA的钌化
4.3.11 基因组DNA与钌化合物的反应
4.3.12 PML蛋白的表达与纯化
4.3.13 荧光滴定
4.3.14 圆二色谱（CD）的测定
4.3.15 质谱（ESI-MS）的测定
1H-15N-HSQC二维核磁共振图谱的测定"> 4.3.16 1H-15N-HSQC二维核磁共振图谱的测定
4.4 结果与讨论
4.4.1 细胞毒性分析
4.4.2 芳基钌化合物介导PML-RARα的降解
4.4.3 芳基钌化合物介导APL细胞的分化
4.4.4 Ru-1与Zn-PML环指结构域的结合
4.4.5 Ru-1对Zn-PML环指结构域空间折叠的影响
4.4.6 四种芳基钌化合物药效不同的探究
4.4.7 Ru-1与DNA的结合
4.4.8 Ru-1对NB4细胞周期的影响
4.4.9 Ru-1介导的NB4细胞凋亡
4.5 本章小结
参考文献
总结与展望
致谢
在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果
【参考文献】：
期刊论文
[1]叶酸介导表没食子儿茶素没食子酸白蛋白纳米粒的制备及其体外靶向性与活性评价[J]. 祖元刚,袁帅,赵修华,张俞,张晓楠,姜茹. 药学学报. 2009(05)
本文编号：3159521
本文链接：https://www.wllwen.com/shoufeilunwen/yxlbs/3159521.html
教材专著
