桃花提取物对大鼠胃肠运动的影响及其机制研究

发布时间：2017-04-19 15:12

  本文关键词：桃花提取物对大鼠胃肠运动的影响及其机制研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：[背景和目的]桃花系蔷薇科桃属落叶乔木桃树Prunus persica (L.) Batsch的花瓣,且桃树在我国的大部分地区广泛种植。桃花作为一种传统的中草药,具有广泛的药理学作用,特别是其对胃肠运动的促进作用。然而,对于桃花促进胃肠运动的活性部位以及其促进胃肠运动的机制尚不清楚。本研究将通过大鼠胃排空、小肠推进比以及结肠平滑肌收缩实验筛选桃花提取物中主要的活性部位,探索其可能的促进胃肠运动的机制。[方法]1.本研究采取系统溶剂法将桃花提取为乙酸乙酯、正丁醇、石油醚以及氯仿等4个部位,检测不同提取物对大鼠胃排空率、小肠推进比以及对大鼠离体结肠平滑肌条收缩活动的作用；ELISA法测定乙酸乙酯提取物对大鼠不同时间点血清中胃动素和胃泌素表达的影响。2.选取桃花乙酸乙酯提取物做进一步的研究,观察河豚毒素、阿托品、去甲肾上腺素、EGTA、吲哚美辛、新安替根、西咪替丁以及酮替芬等不同阻滞剂、拮抗剂及钙离子螯合剂作用后桃花乙酸乙酯对大鼠离体结肠平滑肌条的影响；3.用甲苯胺蓝染色以及免疫荧光的方法检测桃花乙酸乙酯提取物对大鼠结肠组织内肥大细胞和类胰蛋白酶的影响。放免法测定桃花乙酸乙酯提取物对大鼠离体结肠组织内和分泌液中的组胺含量的影响。[结果]通过桃花各提取物对在体大鼠胃排空率以及小肠推进比的实验,结果表明桃花乙酸乙酯提取物(0.9 g/kg)对大鼠胃排空率以及小肠推进比的作用最为明显,与阴性对照组相比,结果具有显著性差异(p0.01)。而其和阳性对照组相比,结果无显著性差异(p0.05)。而桃花正丁醇、氯仿、石油醚提取物未表现出明显的促进作用。在给予桃花乙酸乙酯提取物(0.9g/kg)30min、60min后,大鼠血清中胃动素和胃泌素的含量明显上升,在给药60 min时,血清中胃动素和胃泌素的升高与阴性对照组相比,有显著性差异(p0.05),与给予乙酸乙酯提取物前相比同样具有显著性差异(p0.05)。通过桃花乙酸乙酯提取物对大鼠离体结肠平滑肌条收缩的作用,发现其对大鼠离体结肠平滑肌条有双向调节作用,但是以收缩作用为主。桃花乙酸乙酯提取物在浓度为10-8-10-5 g/mL时对大鼠离体结肠平滑肌条的收缩活动有着明显的增强作用,表现为收缩振幅明显增大,收缩频率也相应增加,并且呈现剂量-效应依赖关系。而其在10-4-10-3g/mL浓度的时候却表现为对收缩活动的抑制作用。乙酸乙酯提取物在浓度为10-6 g/mL时对大鼠离体结肠平滑肌的收缩的振幅为150.4士13.12%,与给药前相比,具有显著性差异(p0.01)。用河豚毒素、阿托品、去甲肾上腺素、EGTA及吲哚美辛等药物抑制大鼠离体结肠平滑肌条的收缩活动后,乙酸乙酯提取物对其抑制后的平滑肌条运动具有促进收缩的作用。但是新安替根、西咪替丁以及酮替芬抑制大鼠离体结肠平滑肌的收缩活动后,乙酸乙酯提取物对大鼠离体结肠平滑肌条的收缩无促进作用。对大鼠结肠组织的甲苯胺蓝染色结果发现,给予乙酸乙酯提取物(0.9 g/1(g)之后,大鼠结肠组织内的肥大细胞数量明显增多,与阴性对照组相比,其结果有显著性差异(p0.05)。并且可以观察到给予乙酸乙酯提取物后大鼠结肠组织内的肥大细胞成簇或者成群的聚集,形状呈圆形、梭形或者成不规则形,细胞核呈蓝色,胞浆成紫红色,分布于结肠组织粘膜或者粘膜下层,毗邻血管、淋巴管或者是肠神经周围,其中可以观察到正在脱颗粒的肥大细胞。免疫荧光的结果显示在给予乙酸乙酯提取物的大鼠结肠组织中,可以看到类胰蛋白酶表达的肥大细胞数量较多,且呈梭形或者成不规则形,且在肥大细胞外亦可见类胰蛋白酶的表达。乙酸乙酯提取物(10-6 g/mL)作用后,大鼠离体结肠组织内的组胺含量降低为0.46±0.05ng/mg,与给药前(0.68±0.05ng/mg)相比,具有显著性差异(p0.01)。但是结肠组织经过酮替芬(100μM)预处理再给予乙酸乙酯提取物后其组胺含量为0.66±0.07ng/mg,乙酸乙酯提取物并没有对组胺含量产生明显影响,与给药前相比,结果无显著性差异(p0.05)。但是乙酸乙酯提取物(10-6g/mL)作用后,孵育离体结肠组织上清液中组胺的含量升高为0.30士0.03ng/mL,与给药前(0.15±0.02ng/mL)相比,具有显著性差异(p0.01)。但是结肠组织经过酮替芬(100μM)预处理之后上清液中的组胺含量为0.18士0.03 ng/mL,乙酸乙酯提取物同样没有对上清液组胺含量的变化产生影响,与给药前相比,结果无显著性差异(p0.05)。[结论]1.采取系统溶剂法将桃花提取为桃花乙酸乙酯、正丁醇、石油醚以及氯仿等四个活性部位,其中乙酸乙酯提取物为桃花各提取物中主要的促进胃肠运动的活性部位。2.桃花乙酸乙酯提取物在低剂量时表现为对胃肠运动的促进作用,而高剂量时则为抑制作用,但其作用主要表现为促进作用,并且呈现一定的剂量-依赖性。3.桃花乙酸乙酯提取物不仅能促进大鼠胃动素和胃泌素的分泌,而且能够促进大鼠结肠组织内肥大细胞数量的增加,并促使其脱颗粒。4.桃花乙酸乙酯提取物促进大鼠胃肠运动的机制可能与其促进胃肠激素的分泌以及促进大鼠肠组织内的肥大细胞脱颗粒进而释放组胺有关。
【关键词】：桃花 乙酸乙酯提取物 胃肠动力 肥大细胞 酮替芬 组胺
【学位授予单位】：兰州大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R285.5
【目录】：

• 中文摘要3-6
• Abstract6-11
• 前言11-13
• 第一部分 桃花促进胃肠动力活性部位的筛选13-27
• 实验材料13-14
• 实验步骤14-19
• 实验结果19-25
• 小结25-27
• 第二部分 桃花乙酸乙酯提取物对大鼠离体结肠平滑肌运动的影响27-43
• 实验材料27-28
• 实验步骤28-29
• 实验结果29-41
• 小结41-43
• 第三部分 桃花乙酸乙酯提取物促进胃肠动力的机制研究43-55
• 实验材料43-45
• 实验步骤45-48
• 实验结果48-53
• 小结53-55
• 讨论55-65
• 结论65-66
• 研究展望66-67
• 参考文献67-72
• 文献综述72-78
• 综述参考文献76-78
• 在学期间研究成果78-79
• 缩略语表79-80
• 致谢80-81
• 附录81-82

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前6条

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本文编号：316546