吡哆醛异烟酰腙对肝脏核受体FXR的抑制效应在异烟肼肝损伤中的作用研究

发布时间：2021-04-28 23:19

　　目的异烟肼（isoniazid,INH）所致肝损伤是临床常见问题,但其机制仍未完全阐释清楚。近年来在INH肝损伤研究中,发现肝脏法尼醇受体（farnesoid X receptor,FXR）的表达及活性显著降低,但肝脏FXR与INH诱导的肝损伤之间的关系未被阐明。基于此,本文拟通过体内外实验,1)明确肝脏FXR活性抑制在INH致肝损伤中的作用;2)从INH及其主要代谢物、INH与维生素B6（vitamin B6,VB6）的加合物吡哆醛异烟酰腙（pyridoxal isonicotinoyl hydrazine,PIH）及VB6中筛选潜在的FXR抑制剂;3)考察补充外源性VB6对INH肝损伤及其药动学的影响,为INH肝损伤的防治提供一定的依据。方法本论文涉及4部分的实验方法:（1）肝脏核受体FXR抑制效应在异烟肼所致肝损伤中的作用研究实验一:Wistar雄性大鼠采用INH（60、180、300及600 mg/kg）或INH（300mg/kg）加奥贝胆酸（OCA,10 mg/kg）干预1周后,收集血清、肝脏样本,测定血清生化指标并观察肝脏病理学变化;采用HPLC-MS/MS法测定血清及肝脏... 

【文章来源】：兰州大学甘肃省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：115 页

【学位级别】：博士

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中文摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 结核的发病率
        1.1.1 全球TB发病率及死亡率
        1.1.2 中国TB的发病率及死亡率
    1.2 结核的治疗
    1.3 抗结核药物引起的肝损伤
    1.4 异烟肼引起肝损伤的机制
        1.4.1 INH的体内过程
        1.4.2 INH所致的肝损伤及其机制
    1.5 胆酸盐在INH肝损伤中的作用
        1.5.1 胆酸盐的合成及代谢途径
        1.5.2 BAs的肝细胞运输
        1.5.3 BAs的肝细胞调控
        1.5.4 BAs在 INH肝损伤中的作用
    1.6 本文的立题依据
第二章 肝脏核受体FXR抑制效应在异烟肼所致肝损伤中的作用研究
    2.1 引言
        2.1.1 FXR在肝脏再生中的作用
        2.1.2 FXR在肝脏损伤修复中的作用
        2.1.3 FXR在肝脏纤维化中的作用
        2.1.4 FXR在胆结石中的作用
        2.1.5 FXR在胆汁淤积疾病中的作用
        2.1.6 FXR功能缺失与胆汁淤积疾病
        2.1.7 肝脏FXR受体抑制效应
        2.1.8 肝脏FXR受体抑制效应与INH肝损伤
    2.2 实验仪器与材料
        2.2.1 实验仪器
        2.2.2 实验材料
    2.3 不同剂量异烟肼所致大鼠肝损伤及其机制探究
        2.3.1 实验方法
        2.3.2 实验结果
    2.4 OCA对 INH所致肝损伤的保护作用
        2.4.1 实验动物及分组
        2.4.2 实验方法
        2.4.3 实验结果
    2.5 基于FXR探究INH对 HepaRG细胞的胆酸盐的影响
        2.5.1 实验方法
        2.5.2 实验结果
    2.6 讨论
        2.6.1 INH诱导的大鼠肝损伤的病理及生化特征
        2.6.2 INH可引起肝脏胆酸盐蓄积
        2.6.3 INH干预后可使肝脏核受体FXR的表达及功能降低
        2.6.4 OCA可通过上调FXR的表达及功能拮抗INH所致的肝损伤
        2.6.5 INH导致的胆酸盐依赖性细胞毒性与FXR有关
        2.6.6 INH或其代谢物中可能存在潜在的FXR抑制剂
    2.7 结论
第三章 基于INH及其主要代谢物筛选FXR潜在抑制剂
    3.1 引言
        3.1.1 FXR配体的虚拟筛选
        3.1.2 TR-FRET FXR共激活因子检测
    3.2 实验仪器与材料
    3.3 分子对接技术评价异烟肼及其代谢物与FXR受体间的相互作用
        3.3.1 实验方法
        3.3.2 实验结果
    3.4 体外实验验证INH、ACINH、INA、PIH、VB6对FXR的抑制作用
        3.4.1 实验方法
        3.4.2 实验结果
    3.5 PIH对大鼠肝脏FXR活性的抑制作用研究
        3.5.1 实验动物及分组
        3.5.2 实验方法
        3.5.3 实验结果
    3.6 讨论
        3.6.1 PIH为 FXR的抑制剂
        3.6.2 PIH通过抑制FXR功能而引起早期肝脏BAs蓄积
    3.7 结论
第四章 VB6在INH肝损伤中的作用研究
    4.1 引言
    4.2 实验仪器与材料
    4.3 实验方法
        4.3.1 实验动物及分组
        4.3.2 实验方法
    4.4 实验结果
        4.4.1 VB6对INH肝损伤的保护作用
        4.4.2 VB6对INH肝损伤大鼠血清及肝脏胆酸盐的影响
        4.4.3 VB6对INH肝损伤大鼠肝脏FXR及其靶基因mRNA表达的影响
        4.4.4 VB6对INH肝损伤大鼠血清及肝脏INH及其代谢物的影响
    4.5 讨论
        4.5.1 VB6对INH诱导的肝损伤具有保护作用
        4.5.2 VB6能显著降低INH引起的胆酸盐升高
        4.5.3 VB6能增加FXR基因的表达及功能
    4.6 结论
第五章 VB6与INH的药动学相互作用
    5.1 引言
    5.2 实验仪器与材料
        5.2.1 实验仪器
        5.2.2 实验材料
    5.3 实验方法
        5.3.1 实验动物及分组
        5.3.2 HPLC-MS/MS测定血清及组织中INH及其代谢物、VB6 含量
        5.3.3 统计学分析
    5.4 实验结果
        5.4.1 VB6与INH的药动学相互影响
        5.4.2 VB6对INH代谢物的药动学影响
        5.4.3 VB6与INH组织分布的相互影响
        5.4.4 VB6对INH代谢物组织分布的影响
    5.5 讨论
        5.5.1 INH与VB6的药动学相互影响
        5.5.2 VB6对INH代谢物的药动学影响
    5.6 结论
第六章 总结
    6.1 研究主要结论
    6.2 研究展望
参考文献
缩略词表
在学期间的研究成果
致谢



本文编号：3166365