血小板通过释放ADP治疗骨关节炎的机制研究

发布时间：2017-04-22 20:13

  本文关键词：血小板通过释放ADP治疗骨关节炎的机制研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：骨关节炎是最常见的骨科疾病和老年人功能致残的主要原因,缺乏有效的治疗方式。近年研究表明血小板是一个有效治疗骨关节炎的潜在方式,但具体机制不明。本研究以大鼠作为骨关节炎的模型动物,通过建立血小板与软骨细胞体外共培养的模型,评估与血小板共培养后软骨细胞的生物学功能指标的改变以及探索血小板修复骨关节炎中受损软骨的机制。结果显示：(1)移植血小板处理后的软骨细胞到单碘乙酸钠诱导的大鼠骨关节炎模型中能够显著提高软骨损伤的修复作用；(2)血小板能够明显促进软骨细胞的增殖能力(EdU试剂盒检测)；同时,血小板显著降低了软骨细胞的分解代谢活性(MMP13和ADAMTS5的表达)；(3)通过基因芯片分析,获得了与血小板共培养后主要引引起改变的软骨细胞靶点基因为BMP7,并验证BMP7诱导软骨细胞增殖是通过下游信号分子ERK的活化以及CDK1和cyclin B1的胞内累积； (4)通过共培养体系中的抑制实验,筛选出血小板释放的ADP是促进软骨细胞增殖的重要成分,ADP作用于软骨细胞的相应受体为P2Y1；并且在大鼠骨关节炎模型中验证了关节腔内直接注射甲基化ADP有利于受损关节软骨的修复。因此,本研究揭示了血小板通过释放ADP作用于软骨细胞P2Y1受体引起BMP7生成以及诱导下游信号通路ERK/CDK1/cyclin B1的活化从而促进软骨细胞增殖。
【关键词】：血小板 ADP 软骨细胞 骨关节炎
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R684.3
【目录】：

• 致谢5-6
• 摘要6-8
• ABSTRACT8-10
• 缩略词10-13
• 1 引言13-16
• 2 材料和方法16-41
• 2.1 实验对象16
• 2.2 主要实验器材16-17
• 2.3 抗体及相关试剂17-19
• 2.4 主要实验试剂的配制19-26
• 2.5 实验方法26-41
• 3 实验结果41-63
• 3.1 移植血小板处理的软骨细胞有利于关节软骨的修复41-47
• 3.2 血小板促进软骨细胞的增殖47
• 3.3 血小板降低软骨细胞分解代谢因子的活性47-48
• 3.4 血小板通过诱导软骨细胞BMP7的生成促进软骨细胞增殖48-50
• 3.5 血小板诱导的ERK/CDK1/cyclin B1的活化依赖于BMP7的生成50-51
• 3.6 血小板通过释放ADP促进软骨细胞增殖51-54
• 3.7 ADP诱导的ERK/CDK1/cyclinB1的活化依赖于软骨细胞BMP7的生成54-56
• 3.8 ADP有利于骨关节炎中关节软骨的修复56-62
• 3.9 血小板通过释放血栓烷A2,ADP以及TGF-β调控软骨细胞合成和分解代谢因子的活性62-63
• 4 讨论63-66
• 参考文献66-73
• 综述73-95
• 参考文献83-95
• 附录一95-96
• 附录二96-122
• 作者简历及在学期间所取得的科研成果122-123

  本文关键词：血小板通过释放ADP治疗骨关节炎的机制研究，由笔耕文化传播整理发布。

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本文编号：321210