牵引力与PKCε参与调节B细胞活化及功能的机理研究

发布时间：2021-06-06 08:55

　　B淋巴细胞（B细胞）识别抗原发生免疫活化、增殖、分化,最终分泌抗体,介导体液免疫。B细胞接触磷脂平面呈递的抗原而发生活化时,细胞体会产生铺展和收缩的动态变化,这是由细胞产生的牵引力引起的。然而由于缺乏适合于B细胞的牵引力测量方法,迄今还没有研究对B细胞活化过程中牵引力的时空动态情况进行表征,也没有研究探索牵引力对于B细胞活化的生理意义。本研究通过凝胶表面接枝单层荧光颗粒等方法改进了传统牵引力显微镜技术,实现了B细胞活化过程中牵引力时空动态表征的捕获观察。模拟体内条件下,发现B细胞活化过程中产生随时间增长的向心牵引力,最大值约10-20n N。进一步的实验发现,B细胞受体BCR识别特异性抗原是牵引力产生的必要条件,BCR也将牵引力传导至抗原,将其向细胞与抗原接触面的中央区域聚集,促进免疫突触的形成,最终提升B细胞的活化水平。机理上,细胞内肌动蛋白的重构、以及肌球蛋白和动力蛋白在细胞骨架上的滑动为牵引力的产生提供了动力。近膜BCR信号分子与BCR微簇体和马达蛋白间的桥接分子对于正常产生牵引力必不可少。包括记忆B细胞在内的Ig G型B细胞,相比未经类别转换的Ig M型B细胞能产生更强的牵引力... 

【文章来源】：清华大学北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：博士

【部分图文】：

B细胞与免疫系统的关系及功能概览图

第1章引言4体(Gulati,2010)。这种表达了IgM型BCR的B细胞也被称为IgM型B细胞，它在遭遇特定抗原时可能直接分泌IgM型抗体，也可能与T细胞相互作用而发生类别转化，表达其他类型的BCR并最终分泌对应类型的抗体。图1.2膜联IgM（membrane-boundIgM，mIgM）型BCR示意图(Gulati,2010)图中lightchain——轻链；heavychain——重链，用红色色边框标出；每条肽链N端用不规则形状标出可变区，其对特异性抗原有识别（recognition）能力；其余规则形状示恒定区，轻、重链分别有1个和4个；细黑线示肽链之间的二硫键；Igα与Igβ所含ITAM拥有信号起始（signaling）能力。Igα与Igβ的结构相似，均为单次跨膜蛋白。Igα与Igβ的胞外段各包含了一个与免疫球蛋白类似的结构域；胞外近膜区有一条二硫键将二者连为一体；胞内段则各是一段免疫受体酪氨酸活化基序（immunoreceptortyrosine-basedactivationmotif，ITAM），这两个ITAM的序列在不同物种的BCR之间非常保守，其功能主要为将接触到特异性抗原的信号向胞内传递，已有研究证明Igα或Igβ的缺失将导致B细胞无法正常活化(TehandNeuberger,1997)。B细胞活化过程中，BCR的mIg部分主要进行抗原特异性识别，而Igα与Igβ部分中ITAM上所含的酪氨酸残基被蛋白酪氨酸激酶（proteintyrosinekinase，PTK）催化磷酸化，从而引起一系列的级联信号反应，二者在B细胞的免疫应答中均发

第1章引言8图1.3BCR活化信号通路示意图(Yinshengetal.,2014)图示BCR识别结合抗原后，活化信号经由正文中所述各激酶、信号分子、第二信使、转录因子等最终调控基因表达。GTPase：GTP酶、G蛋白；GAP：GTPaseactivatingprotein，GTP酶激活蛋白；GEF：鸟苷酸转移酶；CRAC与Orali是细胞膜上的钙离子通道。综上，B细胞的活化是一个起始于BCR识别并结合特异性抗原引起的BCR寡聚化，导致细胞内多种信号分子被招募到BCR微簇体下方近膜侧，共同构成一个信号体复合物，进而通过磷酸化激活等过程引发一系列受控的级联放大反应，


本文编号：3214046