顺铂通过影响miR-141表达促进膀胱癌细胞凋亡的机制研究
发布时间：2021-07-14 02:34
目的第一部分:探讨不同浓度梯度顺铂（Cisplatin,DDP）溶液培养下的膀胱癌细胞凋亡情况和miR-141表达含量的差异性及分析。第二部分:探讨顺铂通过下调miR-141表达促进膀胱癌细胞凋亡的分子机制,从miR-141与沉默信息调节因子1（Sirt1）调控关系的角度进行阐述,以期为临床检测及治疗膀胱癌提供帮助。方法第一部分:选择膀胱癌T24细胞株进行培养,选取第三代生长细胞作为研究对象;将其分成以下几组:Control组（添加等量PBS缓冲溶液）;H-DDP组（高剂量组,50μmol/L DDP培养24小时）;M-DDP组（中剂量组,20μmol/L DDP培养24小时）;L-DDP组（低剂量组,10μmol/L DDP培养24小时）;利用实时荧光定量核酸扩增检测系统（RT-PCR）检测上述各组细胞miR-141的表达水平;MTT检测各组细胞增殖情况;Transwell检测细胞侵袭情况;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;DNA倍体检测细胞周期;线粒体跨膜电位检测线粒体电位;透射电镜检测细胞器变化,并做出相应的统计分析。第二部分:在第一部分分组的基础上,Control组（等量PBS）,H...
【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校
【文章页数】：109 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
RT-PCR检测各组膀胱癌T24细胞miR-141含量分析
图 1-2：各组膀胱癌 T24 细胞 miR-141 溶解曲线分析。表 1-1 miR-141 在各组膀胱癌 T24 细胞中的表达( x±s)组别 2-ΔΔCtt 值 P 值Control 0.97±0.06 15.564 0.004L-DDPM-DDPH-DDP0.33±0.09*0.28±0.06*#0.17±0.02*#$13.22410.56310.4450.0150.0230.020备注：*表示 H-DDP 组、M-DDP 组、L-DDP 组与 Control 组比较，P<0.05，差异具有统计学意义；#表示 H-DDP、M-DDP 与 L-DDP 组比较，P<0.05，差异具有统计学意义；$表示H-DDP 组与 M-DDP 组相比，P<0.05，差异具有统计学意义。
图 1-3：miR-141 在各组膀胱癌 T24 细胞中的表达分析1.2.2 HE 染色分析各组 T24 膀胱癌细胞 HE 染色结果如图 1-4 所示。对照组细胞整体上数量较多，密度较大，细胞周围的血管以及绒毛数量较多，膀胱癌细胞的凋亡趋势较弱。在顺铂充分干预下，细胞的形状逐渐不规则，整体密度低，细胞空隙较大，充斥较多组织液，细胞多是不规则的多边形。随着顺铂浓度的增加，细胞的密度逐渐降低，细胞周围的空隙逐渐增大，由规则的立方形逐渐变成不规则的多边形，提示细胞凋亡增多，随着顺铂浓度的增加，膀胱癌 T24 的凋亡趋势逐渐明显，细胞破坏的程度逐渐严重，提示顺铂对膀胱癌细胞具有一定的干预作用。
【参考文献】：
期刊论文
[1]黄芩苷通过影响miR-141上调Sirt1表达而抑制高糖诱导的小鼠肾小球系膜细胞凋亡[J]. 吴军,夏瑗瑜,陈杰,肖玲,王优,赵媛媛,叶刚,尹青桥. 中国病理生理杂志. 2018(09)
[2]免疫治疗在膀胱癌中的最新研究进展和未来展望[J]. 曹达龙,叶定伟. 中国癌症杂志. 2018(02)
[3]miR-138靶向调控SIRT1表达及其对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响[J]. 黄卓雅,缪伟贤,王晓冰,朱淑玲,武彤彤. 临床肿瘤学杂志. 2017(04)
[4]缺氧通过下调miR-132表达促进前列腺癌细胞的体外生长和侵袭[J]. 查娟民,徐晓峰,李大鹏,桂琦,梁容瑞,周秀敏. 中华男科学杂志. 2016(12)
[5]microRNA调控膀胱癌侵袭转移机制的研究进展[J]. 古亚楠,畅朋康,贺大林,吴开杰. 现代泌尿外科杂志. 2016(12)
[6]microRNA在睾丸肿瘤中的最新进展[J]. 谭于龙,钱辉军. 实用癌症杂志. 2016(04)
[7]SIRT1通过调节Noxa表达影响非小细胞肺癌细胞株A549对顺铂的敏感性[J]. 曹彬,何晓峰,王文公,史敏科. 中国肺癌杂志. 2016(02)
[8]两种方法建立的睾丸癌顺铂耐药细胞株的比较[J]. 李贝贝,董淑英,樊宗兵,吴小祥,巫剑峰,童旭辉. 南方医科大学学报. 2015(12)
[9]miRNAs在膀胱癌诊治中的研究进展[J]. 梁敏,王海峰,王剑松. 医学与哲学（B）. 2015(06)
[10]miR-141-3p靶向调控前列腺癌LNCaP细胞雄激素受体的表达[J]. 王琛,欧阳永日,路蔓,卫军霞,张惠中. 细胞与分子免疫学杂志. 2015(06)
本文编号：3283231
【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校
【文章页数】：109 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
RT-PCR检测各组膀胱癌T24细胞miR-141含量分析
图 1-2：各组膀胱癌 T24 细胞 miR-141 溶解曲线分析。表 1-1 miR-141 在各组膀胱癌 T24 细胞中的表达( x±s)组别 2-ΔΔCtt 值 P 值Control 0.97±0.06 15.564 0.004L-DDPM-DDPH-DDP0.33±0.09*0.28±0.06*#0.17±0.02*#$13.22410.56310.4450.0150.0230.020备注：*表示 H-DDP 组、M-DDP 组、L-DDP 组与 Control 组比较，P<0.05，差异具有统计学意义；#表示 H-DDP、M-DDP 与 L-DDP 组比较，P<0.05，差异具有统计学意义；$表示H-DDP 组与 M-DDP 组相比，P<0.05，差异具有统计学意义。
图 1-3：miR-141 在各组膀胱癌 T24 细胞中的表达分析1.2.2 HE 染色分析各组 T24 膀胱癌细胞 HE 染色结果如图 1-4 所示。对照组细胞整体上数量较多，密度较大，细胞周围的血管以及绒毛数量较多，膀胱癌细胞的凋亡趋势较弱。在顺铂充分干预下，细胞的形状逐渐不规则，整体密度低，细胞空隙较大，充斥较多组织液，细胞多是不规则的多边形。随着顺铂浓度的增加，细胞的密度逐渐降低，细胞周围的空隙逐渐增大，由规则的立方形逐渐变成不规则的多边形，提示细胞凋亡增多，随着顺铂浓度的增加，膀胱癌 T24 的凋亡趋势逐渐明显，细胞破坏的程度逐渐严重，提示顺铂对膀胱癌细胞具有一定的干预作用。
【参考文献】：
期刊论文
[1]黄芩苷通过影响miR-141上调Sirt1表达而抑制高糖诱导的小鼠肾小球系膜细胞凋亡[J]. 吴军,夏瑗瑜,陈杰,肖玲,王优,赵媛媛,叶刚,尹青桥. 中国病理生理杂志. 2018(09)
[2]免疫治疗在膀胱癌中的最新研究进展和未来展望[J]. 曹达龙,叶定伟. 中国癌症杂志. 2018(02)
[3]miR-138靶向调控SIRT1表达及其对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响[J]. 黄卓雅,缪伟贤,王晓冰,朱淑玲,武彤彤. 临床肿瘤学杂志. 2017(04)
[4]缺氧通过下调miR-132表达促进前列腺癌细胞的体外生长和侵袭[J]. 查娟民,徐晓峰,李大鹏,桂琦,梁容瑞,周秀敏. 中华男科学杂志. 2016(12)
[5]microRNA调控膀胱癌侵袭转移机制的研究进展[J]. 古亚楠,畅朋康,贺大林,吴开杰. 现代泌尿外科杂志. 2016(12)
[6]microRNA在睾丸肿瘤中的最新进展[J]. 谭于龙,钱辉军. 实用癌症杂志. 2016(04)
[7]SIRT1通过调节Noxa表达影响非小细胞肺癌细胞株A549对顺铂的敏感性[J]. 曹彬,何晓峰,王文公,史敏科. 中国肺癌杂志. 2016(02)
[8]两种方法建立的睾丸癌顺铂耐药细胞株的比较[J]. 李贝贝,董淑英,樊宗兵,吴小祥,巫剑峰,童旭辉. 南方医科大学学报. 2015(12)
[9]miRNAs在膀胱癌诊治中的研究进展[J]. 梁敏,王海峰,王剑松. 医学与哲学（B）. 2015(06)
[10]miR-141-3p靶向调控前列腺癌LNCaP细胞雄激素受体的表达[J]. 王琛,欧阳永日,路蔓,卫军霞,张惠中. 细胞与分子免疫学杂志. 2015(06)
本文编号：3283231
本文链接：https://www.wllwen.com/shoufeilunwen/yxlbs/3283231.html
教材专著
