Gax表达在血管平滑肌细胞表型转化中的作用研究
发布时间：2021-08-15 13:51
第一部分Gax在胸主动脉瘤组织中的表达及其对胸主动脉平滑肌细胞表型转化的作用研究目的:探讨Gax在胸主动脉瘤组织中的表达水平,以及Gax对胸主动脉平滑肌细胞表型转化的影响方法:收集2016年9月至2017年9月在本院进行手术治疗的16例退行性变升主动脉瘤患者的胸主动脉瘤壁组织,正常对照组标本16例取自同一时期进行冠脉搭桥术的冠心病患者。通过Real-time PCR和Western blot方法检测Gax在胸主动脉瘤壁中膜组织中的mRNA和蛋白表达水平;应用消化贴壁法原代培养正常人胸主动脉平滑肌细胞和胸主动脉瘤血管平滑肌细胞,并通过细胞免疫荧光染色检测α-actin和Gax的表达水平;应用Ad-Gax或Ad-Gax siRNA转染VSMCs,通过Western blot方法检测Gax过表达对有或无PDGF-BB刺激下VSMCs中Calpoin和SM-MHC 11蛋白表达的影响;通过CCK8方法检测Gax过表达或低表达对有或无PDGF-BB刺激下VSMCs增殖的影响;通过Transwell方法检测Gax过表达或低表达对有或无PDGF-BB刺激下VSMCs迁移的影响。结果:Real-tim...
【文章来源】：上海交通大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：58 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
Gax蛋白在主动脉壁中膜组织中表达水平的Westernblot检测，与对照组比较，*表示P<0.05
上海交通大学医学院2016级博士学位论文14Westernblot结果显示，Gax蛋白在胸主动脉瘤壁中膜组织中的表达水平显著低于正常胸主动脉壁中膜组织，差异有统计学意义（P<0.05）,见图2。图2Gax蛋白在主动脉壁中膜组织中表达水平的Westernblot检测，与对照组比较，*表示P<0.05。Figure2TheexpressionlevelofGaxproteininvasculartunicamediafromaorticwalltissuesbyWesternblot.Comparedwiththatincontrolgroup,*indicatedP<0.05.2.2血管平滑肌细胞的原代培养消化贴壁法培养主动脉中膜组织块1周后，组织块边缘爬出细胞，源于冠心病患者在行冠脉搭桥手术过程中与升主动脉桥血管吻合时打孔取下的正常主动脉壁组织的VSMCs细胞呈梭形，能隐约看到肌丝，并存在细胞极性；源于手术切除的升主动脉瘤病变组织的VSMCs成不规则形，细胞极性弱，见图3。图3消化贴壁法原代培养VSMCs，A：正常胸主动脉平滑肌细胞；B：胸主动脉瘤VSMCs。Figure3PrimaryculturedVSMCsbythemethodofenzymedigestionandadherent.A:Normalthoracicaorticsmoothmusclecells.B:VSMCsfromthoracicaorticaneurysmtissues.2.3血管平滑肌细胞的鉴定α-acitn细胞免疫荧光染色结果显示，培养的细胞显著表达α-acitn蛋白（红色荧光），表明为主动脉平滑肌细胞；从图4中可见，源于正常胸主动脉组织的VSMCs中α-acitn表达显著高于源于胸主动脉瘤组织的VSMCS，表明胸主动脉瘤中的VSMCs发生由收缩表型向合成表型的转化。AB
细胞4细胞免疫荧胞；B：胸主动荧光染色方法
【参考文献】：
期刊论文
[1]Gax基因调控血管平滑肌细胞研究进展[J]. 郑辉,薛松. 广东医学. 2010(21)
[2]兔血管平滑肌细胞体外培养及生长特性研究[J]. 郑辉,薛松,连锋,黄日太,胡振雷. 上海交通大学学报(医学版). 2010(09)
本文编号：3344672
【文章来源】：上海交通大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：58 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
Gax蛋白在主动脉壁中膜组织中表达水平的Westernblot检测，与对照组比较，*表示P<0.05
上海交通大学医学院2016级博士学位论文14Westernblot结果显示，Gax蛋白在胸主动脉瘤壁中膜组织中的表达水平显著低于正常胸主动脉壁中膜组织，差异有统计学意义（P<0.05）,见图2。图2Gax蛋白在主动脉壁中膜组织中表达水平的Westernblot检测，与对照组比较，*表示P<0.05。Figure2TheexpressionlevelofGaxproteininvasculartunicamediafromaorticwalltissuesbyWesternblot.Comparedwiththatincontrolgroup,*indicatedP<0.05.2.2血管平滑肌细胞的原代培养消化贴壁法培养主动脉中膜组织块1周后，组织块边缘爬出细胞，源于冠心病患者在行冠脉搭桥手术过程中与升主动脉桥血管吻合时打孔取下的正常主动脉壁组织的VSMCs细胞呈梭形，能隐约看到肌丝，并存在细胞极性；源于手术切除的升主动脉瘤病变组织的VSMCs成不规则形，细胞极性弱，见图3。图3消化贴壁法原代培养VSMCs，A：正常胸主动脉平滑肌细胞；B：胸主动脉瘤VSMCs。Figure3PrimaryculturedVSMCsbythemethodofenzymedigestionandadherent.A:Normalthoracicaorticsmoothmusclecells.B:VSMCsfromthoracicaorticaneurysmtissues.2.3血管平滑肌细胞的鉴定α-acitn细胞免疫荧光染色结果显示，培养的细胞显著表达α-acitn蛋白（红色荧光），表明为主动脉平滑肌细胞；从图4中可见，源于正常胸主动脉组织的VSMCs中α-acitn表达显著高于源于胸主动脉瘤组织的VSMCS，表明胸主动脉瘤中的VSMCs发生由收缩表型向合成表型的转化。AB
细胞4细胞免疫荧胞；B：胸主动荧光染色方法
【参考文献】：
期刊论文
[1]Gax基因调控血管平滑肌细胞研究进展[J]. 郑辉,薛松. 广东医学. 2010(21)
[2]兔血管平滑肌细胞体外培养及生长特性研究[J]. 郑辉,薛松,连锋,黄日太,胡振雷. 上海交通大学学报(医学版). 2010(09)
本文编号：3344672
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