靶向肿瘤干细胞纳米药物的设计与评价

发布时间：2021-09-06 23:27

　　目的:明确肿瘤干细胞内铁代谢情况,筛选肿瘤干细胞中发挥重要作用的铁代谢基因,并初步探讨其作用机制。同时我们通过合成包载降铁药物的纳米材料,靶向肿瘤内肿瘤干细胞,抑制肿瘤进展。方法:我们培养肿瘤干细胞并检测了肿瘤干细胞内的铁代谢情况,发现与铁调节相关的基因很多发生了明显的改变,随后我们探究了在肿瘤干细胞内的铁代谢情况及可能的主要调节基因;随后我们通过相关动物实验发现,肿瘤干细胞具有很强的肿瘤起始能力,我们构建了BMPR1A,TFRC,SFXN5等稳转低表达细胞系,并进一步检测肿瘤干细胞成瘤能力;同时通过流式细胞学方法,检测肿瘤细胞凋亡的影响;并检测了PC3细胞化疗敏感性相关ABC蛋白家族成员蛋白表达水平的影响。我们合成降铁药物-去铁胺（DFO）衍生物DFCAF和纳米脂质体-DFO,并通过肿瘤干细胞形成能力检测等方法检测小分子化合物DFCAF对肿瘤干细胞能力的抑制作用和纳米脂质体的降铁效果。结果:肿瘤干细胞具有很强的肿瘤起始和快速生长能力,根据基因转录组测序结果,肿瘤干细胞的铁代谢调节基因稳态明显改变,同时WNT等与肿瘤干细胞明显相关性的基因表达量也明显升高;根据RT-qPCR及WB蛋白检... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：97 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

肿瘤细胞中铁代谢基因[9]

图 2 肿瘤干细胞和肿瘤细胞铁代谢的不同最近几个实验室报告了肿瘤干细胞与铁之间的新联系。有报道称胶质母细胞瘤 CSCs 高表达 TFR1 和其配体 Tf。同时进行铁追踪实验，证明了肿瘤干细胞显示这些细胞比肿瘤细胞，能够更加有效的从微环境中提取铁。随后的分析表明TFR1 和铁蛋白是对体内肿瘤的繁殖和形成至关重要。相关实验发现了。与肿瘤细胞相比，乳腺肿瘤干细胞中的细胞铁和 Tf 含量很高[13]。对来自 MCF7 细胞的成球实验的结果表明，体外培养的肿瘤干细胞内含有的 LIP，线粒体铁含量也明显升高，肿瘤干细胞对铁螯合剂的敏感性更高。卵巢肿瘤干细胞也表达了更高的 TFR1 和 TF 水平，和低水平的 FPN。这些变化的最终结果是过量细胞内铁的积累，细胞的快速增殖可能和细胞内铁含量呈现相关依赖性。细胞内铁的含量减少会减少卵巢干细胞的致瘤性，随后的分析表明，细胞内铁增加增加能够通过基质金属蛋白酶的表达，促进侵袭的转移性扩散并促进与肿瘤 EMT 过程相关 IL-6的合成。目前，关于肿瘤干细胞内铁代谢情况，引起了相关科学家的广泛研究。在肿

一、对象和方法1.1 研究对象1.1.1 细胞系及组织人源 PC3，A549,G2 细胞系，鼠源 RM-1,4T1,LG-12 细胞系，由天津医科大学第二医院前列腺研究室及中科院生态环境研究中心冻存。我们分别构建了TGF-β，BMPR1,TFRC 和 SFXN5 稳定低表达的各个肿瘤细胞系，由天津医科大学第二医院及中科院生态环境研究中心构建并转染后冻存并传代培养。1.1.2 质粒质粒 1：PLK0.1-Control Vector 由公司购买，具体信息如下图 3。


本文编号：3388391