肿瘤相关骨髓微环境重塑对乳腺癌细胞的调控
发布时间：2021-09-15 19:01
目的:探讨:1、原始高分子量HA（high molecular weight HA,HMW-HA）对乳腺癌细胞休眠的调控;2、肿瘤相关骨髓微环境HA代谢异常变化及对乳腺癌细胞生长的调控。方法:一、未分解代谢改变的HMW-HA对乳腺癌细胞休眠的影响:选择MDA-MB-231、MDA-MB-231BO、4T1和MCF7乳腺癌细胞。HMW-HA作用后,1、CCK-8检测生长、免疫荧光和流式细胞术分析Ki-67;2、流式细胞术检测G0/G1细胞周期;3、Western blot和流式细胞术观察P38、ERK1/2、Cyclin D1和P21cip1水平;4、免疫荧光检测3D细胞培养中Ki-67和P21cip1。二、代谢改变的HA对乳腺癌细胞生长的影响:1、骨髓基质细胞HS5与MDA-MB-231BO细胞共培养;2、化学发光方法检测HA含量;3、通过4-MU,检测HA与MDA-MB-231BO细胞生长的相关性;4、si RNA HAS2降低HS5细胞HA表达,观察MDA-MB-231BO细胞生长,确定共培养中HA的来源;5、sh RNA下调MDA-MB-231BO细胞CD44表达,观察HA-CD...
【文章来源】：上海交通大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：107 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
乳腺癌细胞侵袭能力结果
上海交通大学2016级博士研究生学位论文35图2HA抑制MDA-MB-231BO细胞生长并维持MCF7细胞慢生长Figure2.HAinhibitedMDA-MB-231BOcellgrowthandsustainedtheslowgrowthofMCF7cells为了监控HA处理后乳腺癌细胞的生长，2000个MDA-MB-231BO或MCF7细胞用100μg/mL的HA刺激6day。在各个检测终止点，检测450nm波长处的OD值。采用t-test统计学检验方法，进行实验组与HA未处理的对照组之间的比较，每组n=5,数据以mean±SEM表示。当*P<0.05时，为两组之间具有显著性差异，有统计学意义。A.HA处理MDA-MB-231BO细胞，分别2day、4day、6day的生长。B.HA处理MCF7细胞，分别2day、4day、6day的生长。3HMW-HA抑制MDA-MB-231细胞和4T1乳腺癌细胞的生长为了探讨HA抑制乳腺癌细胞生长的作用是否具有普遍性，我们选取另外两株乳腺癌细胞：MDA-MB-231细胞和小鼠来源的4T1乳腺癌细胞。用HMW-HA作用于这两种细胞，利用CCK-8细胞增殖检测方法在不同时间点观察细胞的生长。结果表明：HMW-HA对MDA-MB-231细胞（图3A）和4T1细胞（图3B）的生长同时具有抑制作用。
上海交通大学2016级博士研究生学位论文36图3HMW-HA抑制MDA-MB-231细胞和4T1细胞的生长Figure3.HMW-HAinhibitedgrowthofMDA-MB-231cellsand4T1cells.2000个MDA-MB-231或4T1细胞用100μg/mL的HA刺激6day。在各个检测终止点，检测450nm波长处的OD值。采用t-test统计学检验方法，进行实验组与未经HA处理的对照组之间的比较，每组n=5,数据以mean±SEM表示。当*P<0.05时，为两组之间具有显著性差异，有统计学意义。A.HA处理MDA-MB-231细胞，分别2day、4day、6day的生长。B.HA处理4T1细胞，分别2day、4day、6day的生长。结果显示HMW-HA可以抑制MDA-MB-231细胞和4T1细胞的生长。4HMW-HA通过延长细胞周期G0/G1期使MDA-MB-231BO细胞处于静止状态因为HMW-HA可以抑制MDA-MB-231BO细胞的生长，接下来我们研究MDA-MB-231BO和MCF7细胞经过HMW-HA处理后细胞周期的改变。用HMW-HA处理该乳腺癌细胞，分别在2day、4day、6day采用流式细胞仪检测细胞周期各期所占比例的改变。对MDA-MB-231BO细胞而言，见图4A，HMW-HA处理2天后，G0/G1期细胞周期比例为35.45±1.93%，未处理组为38.40%±0.64%，对照组和处理组在2day时间点G0/G1细胞周期比例没有统计学差异。在4day和6day时间点，经过HMW-HA处理的MDA-MB-231BO细
【参考文献】：
期刊论文
[1]PI3K/Akt/mTOR inhibitors in breast cancer[J]. Joycelyn JX Lee,Kiley Loh,Yoon-Sim Yap. Cancer Biology & Medicine. 2015(04)
本文编号：3396621
【文章来源】：上海交通大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：107 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
乳腺癌细胞侵袭能力结果
上海交通大学2016级博士研究生学位论文35图2HA抑制MDA-MB-231BO细胞生长并维持MCF7细胞慢生长Figure2.HAinhibitedMDA-MB-231BOcellgrowthandsustainedtheslowgrowthofMCF7cells为了监控HA处理后乳腺癌细胞的生长，2000个MDA-MB-231BO或MCF7细胞用100μg/mL的HA刺激6day。在各个检测终止点，检测450nm波长处的OD值。采用t-test统计学检验方法，进行实验组与HA未处理的对照组之间的比较，每组n=5,数据以mean±SEM表示。当*P<0.05时，为两组之间具有显著性差异，有统计学意义。A.HA处理MDA-MB-231BO细胞，分别2day、4day、6day的生长。B.HA处理MCF7细胞，分别2day、4day、6day的生长。3HMW-HA抑制MDA-MB-231细胞和4T1乳腺癌细胞的生长为了探讨HA抑制乳腺癌细胞生长的作用是否具有普遍性，我们选取另外两株乳腺癌细胞：MDA-MB-231细胞和小鼠来源的4T1乳腺癌细胞。用HMW-HA作用于这两种细胞，利用CCK-8细胞增殖检测方法在不同时间点观察细胞的生长。结果表明：HMW-HA对MDA-MB-231细胞（图3A）和4T1细胞（图3B）的生长同时具有抑制作用。
上海交通大学2016级博士研究生学位论文36图3HMW-HA抑制MDA-MB-231细胞和4T1细胞的生长Figure3.HMW-HAinhibitedgrowthofMDA-MB-231cellsand4T1cells.2000个MDA-MB-231或4T1细胞用100μg/mL的HA刺激6day。在各个检测终止点，检测450nm波长处的OD值。采用t-test统计学检验方法，进行实验组与未经HA处理的对照组之间的比较，每组n=5,数据以mean±SEM表示。当*P<0.05时，为两组之间具有显著性差异，有统计学意义。A.HA处理MDA-MB-231细胞，分别2day、4day、6day的生长。B.HA处理4T1细胞，分别2day、4day、6day的生长。结果显示HMW-HA可以抑制MDA-MB-231细胞和4T1细胞的生长。4HMW-HA通过延长细胞周期G0/G1期使MDA-MB-231BO细胞处于静止状态因为HMW-HA可以抑制MDA-MB-231BO细胞的生长，接下来我们研究MDA-MB-231BO和MCF7细胞经过HMW-HA处理后细胞周期的改变。用HMW-HA处理该乳腺癌细胞，分别在2day、4day、6day采用流式细胞仪检测细胞周期各期所占比例的改变。对MDA-MB-231BO细胞而言，见图4A，HMW-HA处理2天后，G0/G1期细胞周期比例为35.45±1.93%，未处理组为38.40%±0.64%，对照组和处理组在2day时间点G0/G1细胞周期比例没有统计学差异。在4day和6day时间点，经过HMW-HA处理的MDA-MB-231BO细
【参考文献】：
期刊论文
[1]PI3K/Akt/mTOR inhibitors in breast cancer[J]. Joycelyn JX Lee,Kiley Loh,Yoon-Sim Yap. Cancer Biology & Medicine. 2015(04)
本文编号：3396621
本文链接：https://www.wllwen.com/shoufeilunwen/yxlbs/3396621.html
