利福喷丁聚乳酸缓释微球复合体的构建及治疗兔脊柱结核的实验研究
发布时间：2021-09-23 17:58
目的:（1）本研究制备了利福喷丁聚乳酸缓释微球,通过实验评估了微球的体外药物释放特性、抗菌活性及组织相容性为后续实验提供依据。（2）本研究以羟基磷灰石/β-磷酸三钙（HA/β-TCP）复合材料为支架,负载利福喷丁聚乳酸缓释微球构建复合体。通过体外实验评价该复合体对细胞增殖和成骨分化的影响及药物释放特性。（3）构建兔脊柱结核实验动物模型,在此基础上,利用利福喷丁聚乳酸缓释微球复合体对脊柱结核进行治疗,分别从脊柱结核病灶骨缺损处的组织修复效果及药物疗效两方面综合评估利福喷丁聚乳酸缓释微球复合体。为临床治疗脊柱结核提供一种新的治疗途径。方法:（1）以利福喷丁为目标药物,聚乳酸为药物载体,通过优化复乳-溶媒挥发法制备利福喷丁聚乳酸缓释微球,检测微球粒径、包封率及载药率,检测微球体外释放能力及抑菌能力;通过倒置显微镜、CCK-8法、碱性磷酸酶染色及测定、茜红素染色方法检测利福喷丁聚乳酸缓释微球对骨髓间充质干细胞形态、粘附、增殖、成骨及理化特性的影响。通过细胞毒性试验及溶血实验评价其生物相容性。（2）利用流式细胞仪鉴定分离培养的兔骨髓间充质干细胞,并进行了多向分化能力的考察。本研究以羟基磷灰石/β...
【文章来源】：新疆医科大学新疆维吾尔自治区
【文章页数】：128 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
利福喷丁聚乳酸缓释微球大体侧面观Figure1-1MorphologyofR
第一部分·结果19向上述试管中滴加已经好的兔抗凝血0.05mL使其混匀，水浴60分钟，温度保持为37℃。所有试管均在2500转/分，离心半径10cm，离心5min，分别留取上清液。使用紫外可见分光光度计，波长545nm处测量吸光度，每组实验均重复3次，计算平均值，考察溶血程度。溶血程度（%）=（样品吸光度-阴性吸光度）/（阳性吸光度-阴性吸光度）×100%。按照国际标准化组织规定，医用药物及材料的溶血安全性评价标准溶血率小于5%时，符合医用药物及材料的标准要求；若溶血率大于５%时，则达不到医用药物及材料的安全性的标准要求。1.3统计学处理（1）数据整理：采用SPSS22.0软件对数据进行整理、统计描述和统计分析。（2）统计描述：定量数据符合正态分布则采用均值±标准差（sx），不符合正态分布则采用中位数和四分位数间距（InterquartileRange，IQR）表示，定性数据以率的形式表示。（3）统计分析：定量资料满足正态性则采用t检验或者方差分析；不满足则采用基于秩次的非参数检验进行比较。P＜0.05认为差异有统计学意义。采用GraphPadPrism5统计软件对数据绘制分析图。2结果2.1利福喷丁聚乳酸缓释微球理化性质及体外释放的研究2.1.1利福喷丁聚乳酸缓释微球的理化性质利福喷丁聚乳酸缓释微球外观呈砖红色，粉末状，无粘连；聚乳酸微球外观呈白色，粉末状，无粘连（图1-1）。图1-1利福喷丁聚乳酸缓释微球大体侧面观及正面观聚乳酸微球大体侧面观及正面观Figure1-1MorphologyofRPSMsandPLAmicrospheres在光学显微镜下，利福喷丁聚乳酸缓释微球及聚乳酸微球绝大多数呈圆球形，外周圆整光滑，均匀分散，无聚集成团（图1-2）。
利福喷丁聚乳酸缓释微球光镜观察（放大倍数：40×，
【参考文献】：
期刊论文
[1]Effects of various antimicrobial agents on multi-directional differentiation potential of bone marrow-derived mesenchymal stem cells[J]. Hui Li,Bing Yue. World Journal of Stem Cells. 2019(06)
[2]Nanomaterials and bone regeneration[J]. Tao Gong,Jing Xie,Jinfeng Liao,Tao Zhang,Shiyu Lin,Yunfeng Lin. Bone Research. 2015(03)
[3]Bone graft substitutes for spine fusion: A brief review[J]. Ashim Gupta,Nitin Kukkar,Kevin Sharif,Benjamin J Main,Christine E Albers,Saadiq F El-Amin Ⅲ. World Journal of Orthopedics. 2015(06)
[4]腹腔镜辅助下联合侧前方小切口腹膜后入路治疗腰椎结核[J]. 陈荣春,陈云生,曾云峰,郭朝阳,陈勤,李明恒. 中国修复重建外科杂志. 2014(11)
[5]Osteogenic potential: comparison between bone marrow and adipose-derived mesenchymal stem cells[J]. Han-Tsung Liao,Chien-Tzung Chen. World Journal of Stem Cells. 2014(03)
[6]兔脊柱结核模型的构建[J]. 刘正文,呼西旦,付明花,折胜利,罗兰,宋兴华. 中华实验外科杂志. 2012 (04)
[7]乳酸-羟基乙酸共聚物载药纳米粒的制备及体外释药性[J]. 徐伟华,刘杰,金成,张福琴,窦科峰. 中国组织工程研究与临床康复. 2011(16)
[8]硬组织替代材料对成骨细胞骨钙蛋白、碱性磷酸酶水平的影响[J]. 黄永光,陈治清,李芃. 华西口腔医学杂志. 2000(03)
[9]结核病诊断细菌学检验规程[J]. 中国防痨杂志. 1996(02)
[10]牙科材料细胞毒性评定的新方法（MTT试验）[J]. 吕晓迎. 中华口腔医学杂志. 1995(06)
博士论文
[1]利福喷丁海藻酸钠缓释微球肺部靶向给药系统的研究[D]. 杨楠.北京市结核病胸部肿瘤研究所 2011
[2]SOX9基因修饰骨髓间充质干细胞修复关节软骨损伤[D]. 杨自权.华中科技大学 2008
[3]羟基磷灰石/聚酰胺/聚乙烯三元复合仿生材料研究[D]. 左奕.四川大学 2006
硕士论文
[1]纳米抗菌复合膜对成骨样细胞生长的影响[D]. 刘曼.四川大学 2007
本文编号：3406157
【文章来源】：新疆医科大学新疆维吾尔自治区
【文章页数】：128 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
利福喷丁聚乳酸缓释微球大体侧面观Figure1-1MorphologyofR
第一部分·结果19向上述试管中滴加已经好的兔抗凝血0.05mL使其混匀，水浴60分钟，温度保持为37℃。所有试管均在2500转/分，离心半径10cm，离心5min，分别留取上清液。使用紫外可见分光光度计，波长545nm处测量吸光度，每组实验均重复3次，计算平均值，考察溶血程度。溶血程度（%）=（样品吸光度-阴性吸光度）/（阳性吸光度-阴性吸光度）×100%。按照国际标准化组织规定，医用药物及材料的溶血安全性评价标准溶血率小于5%时，符合医用药物及材料的标准要求；若溶血率大于５%时，则达不到医用药物及材料的安全性的标准要求。1.3统计学处理（1）数据整理：采用SPSS22.0软件对数据进行整理、统计描述和统计分析。（2）统计描述：定量数据符合正态分布则采用均值±标准差（sx），不符合正态分布则采用中位数和四分位数间距（InterquartileRange，IQR）表示，定性数据以率的形式表示。（3）统计分析：定量资料满足正态性则采用t检验或者方差分析；不满足则采用基于秩次的非参数检验进行比较。P＜0.05认为差异有统计学意义。采用GraphPadPrism5统计软件对数据绘制分析图。2结果2.1利福喷丁聚乳酸缓释微球理化性质及体外释放的研究2.1.1利福喷丁聚乳酸缓释微球的理化性质利福喷丁聚乳酸缓释微球外观呈砖红色，粉末状，无粘连；聚乳酸微球外观呈白色，粉末状，无粘连（图1-1）。图1-1利福喷丁聚乳酸缓释微球大体侧面观及正面观聚乳酸微球大体侧面观及正面观Figure1-1MorphologyofRPSMsandPLAmicrospheres在光学显微镜下，利福喷丁聚乳酸缓释微球及聚乳酸微球绝大多数呈圆球形，外周圆整光滑，均匀分散，无聚集成团（图1-2）。
利福喷丁聚乳酸缓释微球光镜观察（放大倍数：40×，
【参考文献】：
期刊论文
[1]Effects of various antimicrobial agents on multi-directional differentiation potential of bone marrow-derived mesenchymal stem cells[J]. Hui Li,Bing Yue. World Journal of Stem Cells. 2019(06)
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[3]Bone graft substitutes for spine fusion: A brief review[J]. Ashim Gupta,Nitin Kukkar,Kevin Sharif,Benjamin J Main,Christine E Albers,Saadiq F El-Amin Ⅲ. World Journal of Orthopedics. 2015(06)
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[6]兔脊柱结核模型的构建[J]. 刘正文,呼西旦,付明花,折胜利,罗兰,宋兴华. 中华实验外科杂志. 2012 (04)
[7]乳酸-羟基乙酸共聚物载药纳米粒的制备及体外释药性[J]. 徐伟华,刘杰,金成,张福琴,窦科峰. 中国组织工程研究与临床康复. 2011(16)
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[9]结核病诊断细菌学检验规程[J]. 中国防痨杂志. 1996(02)
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博士论文
[1]利福喷丁海藻酸钠缓释微球肺部靶向给药系统的研究[D]. 杨楠.北京市结核病胸部肿瘤研究所 2011
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[3]羟基磷灰石/聚酰胺/聚乙烯三元复合仿生材料研究[D]. 左奕.四川大学 2006
硕士论文
[1]纳米抗菌复合膜对成骨样细胞生长的影响[D]. 刘曼.四川大学 2007
本文编号：3406157
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