基于RAS/RAF/ERK信号通路探讨艾灸促进压疮组织血管新生的分子调控机制研究

发布时间：2023-02-28 07:52

　　目的:明确艾灸促进压疮组织创面愈合的作用;阐明艾灸促进压疮组织血管新生的分子调控机制,为临床艾灸治疗压疮,乃至皮肤溃疡提供理论和实验依据。方法:采用自制压疮造模装置通过缺血-再灌注损伤方式建立2～3期压疮动物模型,将造模成功的70只SD雌性压疮缺血-再灌注损伤模型实验大鼠采用随机数字表法随机分为模型组和艾灸组,每组35只。每组根据干预时间的长短再分为1d、3d、5d、7d、10d五个亚组,每个亚组分别纳入7只实验大鼠。将35只正常健康大鼠不予造模处理,在模拟其他两组大鼠造模部位处给予碘伏处理,采用随机数字表法随机分为1d、3d、5d、7d、10d五个亚组,每个亚组纳入7只大鼠。模型组在模型制备成功后只给予碘伏常规处理,捆绑方式同其他两组。艾灸组在模型制备成功后,先给予碘伏常规处理,而后施以艾灸干预,采用直接艾灸压疮局部,以压疮创面为中心,1cm长度为半径,进行回旋灸操作,其中艾条燃烧端距压疮创面3cm左右。每日艾灸治疗1次,每次持续15min。通过非接触式电子温度仪及时调整艾条燃烧端与压疮创面的距离,使温度计的显示数值控制在(40℃～42℃)的适宜范围内,每0.5min测量一次创面的皮...

【文章页数】：196 页

【学位级别】：博士

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缩略语表
中文摘要
Abstract
前言
文献综述
    第一部分 祖国医学对压疮的研究
        1. 压疮的概述
        2. 压疮的病因病机
        3. 压疮的辨证分型
        4. 压疮的治则治法
            4.1 内治法
            4.2 外治法
    第二部分 现代医学对压疮的研究
        1. 压疮的概念
        2. 压疮的分期
        3. 压疮的发病因素
            3.1 外源性因素
            3.2 内源性因素
            3.3 加剧性因素
        4. 压疮的防治
            4.1 压疮的预防
            4.2 压疮的治疗
实验研究
    第一部分 观察艾灸对压疮大鼠损伤修复中创面愈合率以及创面局部平均血流灌注量的影响
        一、观察艾灸对压疮大鼠损伤修复中创面愈合率的影响
            1. 实验材料
            2. 实验方法
            3. 数据的统计学处理
            4. 实验结果
            5. 实验小结
        二、观察艾灸对压疮大鼠损伤修复中创面局部平均血流灌注量的影响
            1. 实验材料
            2. 实验方法
            3. 数据的统计学处理
            4. 实验结果
            5. 实验小结
    第二部分 基于RAS/RAF/ERK信号通路探讨艾灸促进压疮组织血管新生的分子调控机制研究
        一、观察艾灸对实验大鼠压疮创面组织的病理形态学改变的影响
            1. 实验材料
            2. 实验方法
            3. 实验结果
            4. 实验小结
        二、观察艾灸对实验大鼠压疮创面组织的超微结构的影响
            1. 实验材料
            2. 实验方法
            3. 电镜结果
            4. 实验小结
        三、免疫荧光双标染色法观察艾灸对压疮组织血管新生的影响
            1. 实验材料
            2. 实验方法
            3. 数据的统计学处理
            4. 实验结果
            5. 实验小结
        四、免疫组织化学法检测各组大鼠在不同时间点创面组织中VEGF、RAS以及P-ERK1/2蛋白表达的变化
            1. 实验材料
            2. 实验方法
            3. 数据的统计学处理
            4. 实验结果
            5. 实验小结
        五、实时荧光定量PCR法检测各组大鼠创面组织中VEGF mRNA、VEGFR2 mRNA、RAS mRNA、RAF-1 mRNA以及ERK mRNA表达的变化
            1. 实验材料
            2. 实验方法
            3. 数据的统计学处理
            4. 实验结果
            5. 实验小结
        六、Western Blot法检测各组大鼠创面组织中VEGF、VEGFR2、RAS、P-RAF-1以及P-ERK1/2蛋白表达的变化
            1. 实验材料
            2. 实验方法
            3. 数据的统计学处理
            4. 实验结果
            5. 实验小结
讨论
    1. 立题依据
    2. 压疮模型实验动物种属及性别的选择
        2.1 种属的选择
        2.2 性别的选择
    3. 大鼠压疮缺血-再灌注损伤模型制备过程及应用的相关注意事项
    4. 压疮缺血-再灌注损伤模型的重要性
    5. 对影响艾灸治疗压疮疗效发挥相关因素的分析
        5.1 选择优质的艾条
        5.2 确定施灸操作种类
        5.3 有烟艾灸发挥疗效的作用机理
    6. 规范艾灸干预的操作过程,量化影响艾灸疗效的相关因素
    7. 对皮肤损伤后创面修复过程的分析
    8. 实验结果的讨论分析
        8.1 对创面愈合率与创面局部平均血流灌注量的分析
        8.2 对光学显微镜与透射电镜观察压疮创面组织的病理形态学变化及超微结构的分析
        8.3 从蛋白层面对RAS/RAF/ERK信号通路中关键靶蛋白的分析
        8.4 从基因层面对RAS/RAF/ERK信号通路中关键靶基因的分析
        8.5 对免疫荧光双标染色技术观测压疮创面修复中新生血管形成的分析
    9. 不足与展望
        9.1 严格把控艾灸干预温度
        9.2 多角度探究艾灸促进压疮组织血管新生的机制
        9.3 完善面积的测定手段
        9.4 完善新生血管的定量分析手段
结论
致谢
参考文献
附录
个人简历



本文编号：3751547