YAP1-AGK正反馈环路促进胃癌细胞进展的分子机制

发布时间：2023-03-04 13:44

　　背景:酰基甘油激酶AGK位于人类染色体7q34区域,是一个多功能的脂质激酶,通过催化酰基甘油磷酸化产生溶血磷脂酸(LPA),从而参与到人体众多生物学过程中。最近多项证据表明,AGK表达失调与各种人类癌症的发生、发展有关。本课题研究了AGK对胃癌细胞增殖和癌变的影响,并深入研究了其中的分子作用机制。方法:采用免疫组织化学和蛋白质印迹分析检测了胃癌细胞系和胃癌组织中的AGK表达情况;基于免疫组化的结果分析了AGK表达水平与胃癌患者临床病理特征的关系。通过检测上皮-间充质转变标志物以及CCK-8,集落形成,transwell侵袭和迁移实验以及异种移植模型明确AGK在胃癌中的生物学功能。之后,在胃癌细胞和组织中分析AGK和YAP1之间的相关性,并通过荧光素酶报告基因实验,染色质免疫共沉淀,免疫荧光和qRT-PCR等实验进一步研究两者之间的相互作用机制。结果:免疫组化和western blot实验均显示AGK的表达在胃癌细胞系和组织样品中上调,高表达AGK蛋白与胃癌患者组织分化不佳(P=0.009)并且与胃癌患者预后不良密切相关。过表达AGK能促进胃癌细胞的增殖、侵袭能力和上皮-间充质转变标志物...

【文章页数】：116 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
abstract
前言
第一部分 AGK在胃癌中的表达及其临床意义
    1.引言
    2.材料与方法
        2.1 实验材料
        2.2 实验方法
    3.结果
        3.1 AGK在胃癌中表达水平改变的分析
        3.2 AGK在胃癌及癌旁组织中蛋白表达水平的差异
        3.3 胃癌组织中AGK的表达水平与患者临床病理参数之间的关系
        3.4 胃癌组织中AGK高表达患者预后不佳
    4.讨论
    5.结论
第二部分 AGK对人胃癌细胞生物学行为的研究
    1.引言
    2.材料与方法
        2.1 实验材料
        2.2 实验方法
    3.结果
        3.1 瞬时转染效率检验
        3.2 AGK促进胃癌细胞恶性增殖
        3.3 AGK促进胃癌细胞侵袭和上皮-间质转化(EMT)
        3.4 裸鼠成瘤实验检验干扰AGK的表达对瘤体生长及Hippo-YAP通路的影响
    4.讨论
    5.结论
第三部分 AGK与 YAP1 之间关系及相互作用机制探讨
    1.引言
    2.材料与方法
        2.1 实验材料
        2.2 实验方法
    3.结果
        3.1 AGK与 YAP1 蛋白表达呈正相关
        3.2 YAP1 正向调控AGK的表达
        3.3 AGK是 YAP1/TEADs下游转录靶基因
        3.4 YAP1/TEADs通过TEAD结合位点1(TRE1)与AGK启动子结合
        3.5 AGK抑制Hippo-YAP1 信号通路提高TEADs转录活性
        3.6 AGK过表达能缩短LATS1/2 蛋白的半衰期
    4.讨论
    5.结论
全文总结
致谢
参考文献
攻读学位期间的主要成果
综述
    参考文献



本文编号：3754389