构建罗丹明B及顺铂表面功能化纳米颗粒用于药物体内命运及肿瘤治疗的研究

发布时间：2023-03-29 18:25

　　聚合纳米药物由于自身尺寸效应,可在肿瘤特殊微环境中实现高渗透性和高滞留(EPR),相比较于小分子药物具有明显优势,因此在肿瘤治疗中显示出良好的前景。纳米药物的递送效率和治疗效果与其体内命运(如药代动力学和生物分布等)密切相关,因此研究纳米药物的体内命运是开发纳米药物中必不可少的部分。荧光染料是标记纳米药物最常用且最简单的方法,广泛应用于纳米药物的基础研究中。大多数传统纳米药物通过疏水相互作用将荧光染料包载入内核,但这种制备纳米药物的方式具有很大的弊端,即荧光染料被注射入体内后会发生“爆释”,很快与纳米载体分离成为游离小分子,无法准确标记纳米药物,更无法反应纳米药物真实的体内命运。同样的问题也出现在药物包载上,通过疏水相互作用包载的药物分子在体内也很容易发生“爆释”成为游离分子,很快被机体清除,从而限制纳米药物的最终治疗效果。为了解决上述问题,我们摒弃了传统包载的方式,采用化学键合的方法将荧光染料和药物分子键合在聚合物上,然后通过自组装制备出表面含有荧光基团或化疗药物分子的功能化纳米颗粒,它们分别具有荧光指示和肿瘤细胞杀伤的功能。在本论文中,我们旨在设计功能化的纳米颗粒用于可靠的纳米药物...

【文章页数】：113 页

【学位级别】：博士

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摘要
ABSTRACT
英文缩略词表
第一章 绪论
    1.1 癌症治疗的现状
    1.2 纳米药物载体
        1.2.1 纳米药物载体的定义
        1.2.2 纳米药物载体的分类
        1.2.3 纳米药物载体的应用现状
    1.3 功能化纳米颗粒
        1.3.1 功能化纳米颗粒定义
        1.3.2 功能化纳米颗粒的应用
    1.4 纳米颗粒在癌症治疗中面临的问题
    1.5 本课题的选题目的及主要研究内容
    参考文献
第二章 荧光标记的纳米颗粒用于体内外定量检测的研究
    2.1 引言
    2.2 实验材料
        2.2.1 主要材料
        2.2.2 主要药品和试剂
        2.2.3 细胞株
        2.2.4 实验小鼠
    2.3 实验方法
        2.3.1 罗丹明与聚己内酯的键合(PCL-RhoB)
        2.3.2 含有PCL-RhoB的聚合物纳米颗粒(RhoB-PNPs)的制备
        2.3.3 动态光散射仪检测RhoB-PNPs的粒径分布及表面电势
        2.3.4 纳米颗粒中PCL_3.5k-RhoB的萃取
        2.3.5 PCL-RhoB在RhoB-PNPs中的稳定性检测
        2.3.6 含有PCL-RhoB的聚合物纳米颗粒输送至肿瘤细胞内部的研究
        2.3.7 含有PCL-RhoB的聚合物纳米颗粒的药代动力学研究
        2.3.8 含有PCL-RhoB的聚合物纳米颗粒体内脏器分布情况研究
        2.3.9 血浆和脾脏中含有PCL-RhoB的聚合物纳米颗粒积累的定量研究
    2.4 结果与讨论
        2.4.1 PCL-RhoB的合成与表征
        2.4.2 通过UPLC定量分析PCL-RhoB的浓度
        2.4.3 含有PCL-RhoB的聚合物纳米颗粒(RhoB-PNPs)的制备和表征
        2.4.4 在各种生物环境中萃取PCL-RhoB
        2.4.5 含有PCL-RhoB的聚合物纳米颗粒可以在体外检测细胞摄取
        2.4.6 含有PCL-RhoB的聚合物纳米颗粒可以在体内定量检测
        2.4.7 含有PCL-RhoB的聚合物纳米颗粒药代动力学和体内脏器分布
    2.5 本章小结
    参考文献
第三章 胶束顺铂前药同时消除肺癌中的肿瘤细胞和肿瘤干细胞
    3.1 引言
    3.2 实验材料
        3.2.1 主要材料
        3.2.2 细胞系
        3.2.3 实验动物
        3.2.4 主要药品及试剂
    3.3 实验方法
        3.3.1 聚合物(NH₂-PEG-b-PCL)的合成
        3.3.2 键合顺铂前药(Pt₍(Ⅳ))-PEG-b-PCL)的合成
        3.3.3 胶束纳米颗粒的制备
        3.3.4 键合顺铂前药胶束纳米颗粒的表征
        3.3.5 ICP-MS检测胶束纳米颗粒的药物释放
        3.3.6 键合顺铂前药纳米颗粒在血清中的稳定性检测
        3.3.7 细胞培养
        3.3.8 MTT比色法检测键合顺铂前药胶束纳米颗粒抑制细胞增殖能力的影响
        3.3.9 ICP-MS检测肿瘤细胞对NP₍Pt(Ⅳ))的摄取
        3.3.10 激光共聚焦观察NP₍Pt(Ⅳ))进入A549和H460细胞的能力
        3.3.11 实验动物
        3.3.12 小鼠肿瘤模型的构建
        3.3.13 键合顺铂前药胶束纳米颗粒体内肿瘤生长抑制实验
        3.3.14 免疫组化
    3.4 结果与讨论
        3.4.1 键合顺铂前药(Pt₍(Ⅳ))-PEG-b-PCL)的合成与表征
        3.4.2 键合顺铂前药(Pt₍(Ⅳ))-PEG-b-PCL)纳米颗粒的构建与表征
        3.4.3 纳米颗粒在酸性和还原条件下对药物的释放能力
        3.4.4 NP₍Pt(Ⅳ))对贴壁细胞的细胞摄取和细胞杀伤能力
        3.4.5 NP₍Pt(Ⅳ))对球囊细胞的摄取和细胞杀伤能力
        3.4.6 NP₍Pt(Ⅳ))对CSC群体和肿瘤球囊细胞形成的影响
        3.4.7 体内肿瘤生长抑制
    3.5 本章小结
    参考文献
第四章 全文总结与展望
    4.1 全文总结
    4.2 展望
附录一 主要仪器设备
附录二 常规试剂
附录三 主要溶液配制
附录四 常规实验方法及检测条件
致谢
在读期间发表的学术论文与取得的研究成果



本文编号：3774250