miR-150-5p/SOCS1在类风湿关节炎中的临床意义及其调控机制

发布时间：2023-04-05 02:12

　　背景:类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种以滑膜炎为主要病理改变的系统性炎症性自身免疫病,全球发病率约为0.5-1.0%。我国大陆地区患病率约为0.42%,总患病人数约500万。目前,我国的RA治疗效果尚不理想,据估计有超过50%的中国RA患者,在诊断后没有经过规范治疗。作为一种常见的致残性疾病,本病的长期治疗及预后不佳,给患者家庭及社会带来沉重的经济负担。因此,迫切需要探求早期诊断、评估病情的生物标志物及有效的治疗靶点。细胞因子信号转导抑制因子(suppressor of cytokine signaling,SOCS)家族是特征性SOCS盒胞浆蛋白分子家族。SOCS是细胞因子信号传导的经典抑制剂,由SOCS1-7和CIS等8种成分组成。其中,SOCS1在免疫细胞的调节中发挥重要作用。SOCS1的SH2结构域可直接与激活的Janus激酶(JAKs)环结合,且通过其激酶抑制区域直接抑制JAK酪氨酸激酶活性。并且Janus激酶/信号传导和转录激活因子(Janus kinase-signal transducer and activator of trans...

【文章页数】：113 页

【学位级别】：博士

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摘要
abstract
中英文缩略词表
第1章 引言
第2章 外周血SOCS1 mRNA与 RA相关性的系统评价
    2.1 前言
    2.2 资料
        2.2.1 文献检索
        2.2.2 纳入标准与排除标准
        2.2.3 结局指标
    2.3 方法
        2.3.1 文献筛选
        2.3.2 质量评价
        2.3.3 资料提取
        2.3.4 数据分析
    2.4 结果
        2.4.1 文献检索
        2.4.2 纳入文献的一般特征及文献评价
        2.4.3 Meta分析结果
    2.5 讨论
    2.6 结论
第3章 RA患者PBL中miR-150-5p、SOCS1 mRNA的表达及其临床意义
    3.1 前言
    3.2 实验试剂与仪器
        3.2.1 实验试剂
        3.2.2 实验仪器
    3.3 研究对象和实验方法
        3.3.1 纳入受试者
        3.3.2 收集患者及健康对照者一般资料
        3.3.3 RT-PCR法测定miR-150-5p的表达水平
        3.3.4 RT-PCR法测定SOCS1mRNA的表达水平
        3.3.5 ELISA法测定RA患者血清炎症细胞因子水平
        3.3.6 统计学处理
    3.4 结果
        3.4.1 一般临床资料及实验室指标
        3.4.2 RA患者PBL中 miR-150-5p表达水平的变化
        3.4.3 RA患者PBL中 SOCS1 mRNA表达水平的变化
        3.4.4 RA患者外周血TNF-α、IL-6及IL-21 表达水平的变化
        3.4.5 miR-150-5p、SOCS1 mRNA对 RA诊断的预测分析
        3.4.6 miR-150-5p与实验室指标及临床指标的相关性分析
        3.4.7 SOCS1 mRNA与实验室指标及临床指标的相关性分析
    3.5 讨论
    3.6 结论
第4章 miR-150-5p对 RASFs细胞生长和SOCS1 表达的影响
    4.1 前言
    4.2 材料
        4.2.1 细胞株
        4.2.2 购置试剂
        4.2.3 主要仪器设备及耗材
    4.3 方法
        4.3.1 细胞培养
        4.3.2 miR-150-5p mimic及miR-150-5p NC的设计及合成
        4.3.3 克隆载体的构建
        4.3.4 双荧光素酶试验
        4.3.5 流式细胞学方法检测细胞凋亡及细胞周期
        4.3.6 CCK8 法测定细胞增殖水平
        4.3.7 RT-PCR测定miR-150-5p的表达水平
        4.3.8 RT-PCR测定SOCS1 m RNA的表达
        4.3.9 Western Blot蛋白测定
        4.3.10 ELISA测定TNF-α、IL-6 的表达水平
        4.3.11 统计学处理
    4.4 结果
        4.4.1 miR-150-5p促进MH7A细胞生长
        4.4.2 miR-150-5p靶向结合于SOCS1 基因
        4.4.3 miR-150-5p抑制SOCS1m RNA的表达
        4.4.4 miR-150-5p对SOCS1 蛋白及JAK2/ STAT3 蛋白的影响
        4.4.5 miR-150-5p对MH7A细胞IL-6 及TNF-α 的影响
    4.5 讨论
    4.6 结论
第5章 全文总结与展望
致谢
参考文献
攻读学位期间的研究成果
综述
    参考文献



本文编号：3782521