Ca 2+ 对TRPM2通道门控的机制研究

发布时间：2023-10-06 13:57

　　瞬时受体电位通道 M2(transient receptor potential melastatin 2,TRPM2)是一种Ca2+通透的非选择性阳离子通道,广泛分布于神经元,小胶质细胞,胰岛β细胞,单核细胞,巨噬细胞,内皮细胞等细胞当中。近年来研究表明,TRPM2通道参与了温度感知,炎症反应,缺血性损伤,神经退行性疾病,糖尿病,肿瘤等诸多生理病理过程。TRPM2通道的内源性配体主要为烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide,NAD+)的代谢产物腺苷二磷酸核糖(adenosine diphosphate ribose,ADPR)。同时,由于TRPM2通道能在H202的作用下被激活,因此也被认为是体内重要的氧化应激感受器。此外,Ca2+作为体内重要的信号分子,不仅可与ADPR协同激活TRPM2通道,还可以单独激活通道,但其具体门控机制还不清楚。为了探究TRPM2通道是否存在Ca2+结合位点,我们运用生物信息学方法预测出人类来源TRPM2通道(human TRPM2 channel,hTRPM2)氨基端存在两个潜在的EF-loop基序(D2...

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致谢
中文摘要
ABSTRACT
缩略词
1 引言
    1.1 离子通道
    1.2 TRP家族离子通道
    1.3 TRPM2通道
    1.4 钙离子和TRPM2通道
2 材料和方法
    2.1 仪器设备和试剂耗材
        2.1.1 仪器设备
        2.1.2 试剂及耗材
    2.2 实验方法
        2.2.1 细胞培养
        2.2.2 细胞转染
        2.2.3 TRPM2通道点突变质粒构建
        2.2.4 电生理记录
        2.2.5 表面生物素化及WesternBlot
3 结果
    3.1 鉴定HTRPM2通道钙激活调控的新位点
        3.1.1 建立hTRPM2通道电生理记录系统
        3.1.2 采用Ca²⁺与ADPR协同的方法激活hTRPM2通道
        3.1.3 预测hTRPM2通道氨基端两段潜在EF-loop基序
        3.1.4 两段潜在EF-loop基序对Ca²⁺激活hTRPM2通道的影响
        3.1.5 第一段潜在EF-loop基序对Ca²⁺激活hTRPM2通道的作用
        3.1.6 第二段潜在EF-loop基序对Ca²⁺激活hTRPM2通道的作用
        3.1.7 D267-D278及D288-E298保守位点的突变不影响通道膜表达
        3.1.8 D267-D278及D288-E298保守位点的突变对hTRPM2通道的单通道电导影响
    3.2 TPRM2通道S2-S3 DOMAIN上钙结合位点对通道门控影响
        3.2.1 Ca²⁺在hTRPM2通道和nvTRPM2通道门控过程中具有不同调节作用
        3.2.2 nvTRPM2通道S2-S3 domain上Ca²⁺结合位点内的四个残基与通道激活有关
        3.2.3 hTRPM2通道S2-S3 domain上对应位点参与通道激活
        3.2.4 TRPM2通道S2-S3 domain上Ca²⁺结合位点的谷氨酰胺影响通道失活
        3.2.5 TRPM2通道S2-S3 domain上Ca²⁺结合位点的天冬酰胺影响通道失活
4 讨论
参考文献
综述
    参考文献
作者简历



本文编号：3851831