内质网应激对间充质干细胞体外培养扩增过程中成软骨能力影响的研究

发布时间：2024-01-20 16:47

　　目的:间充质干细胞是近年来治疗软骨缺损的潜力巨大的种子细胞,其可来源于多种组织,大多数研究为获得足够多的细胞数量,治疗前均先将干细胞进行体外扩增,然而体外扩增会引起干细胞的衰老并影响其分化能力,既往研究显示骨髓间充质干细胞体外扩增至第三代后其成软骨能力和软骨修复治疗效果较原代骨髓间充质干细胞均有下降,但其中的具体调控机制尚不明。本研究旨在通过转录组测序比较骨髓间充质干细胞体外扩增与否产生的差异基因和不同通路,查找出影响软骨分化能力的关键基因和通路,并通过实验进一步验证其结果。方法:先进行骨髓间充质干细胞的提取,6只2.5～3kg大小2月龄新西兰大白兔,麻醉后用16G骨穿针在双侧股骨髁、胫骨上段进行穿刺,每只穿刺抽取约20ml骨髓,使用兔骨髓干细胞分离试剂盒提取骨髓间充质干细胞,将干细胞分成2组:P0组:新鲜提取的兔原代骨髓间充质干细胞,未经扩增和冻存;P3组:使用扩增传代至第三代的兔骨髓间充质干细胞,未经冻存。提取P0组和P3组细胞RNA,进行转录组测序。测序完成后通过生物信息学技术,筛选出差异基因,进行KEGG通路分析查找出相关通路,结合文献报道选择内质网应激的未折叠蛋白反应通路作为...

【文章页数】：142 页

【学位级别】：博士

本文编号：3881193