c-Met CAR-T及PD1/CD28融合受体CAR-T在胃癌中的研究

发布时间：2024-03-30 12:50

　　目的:设计靶向c-Met的嵌合抗原受体T细胞(Chimeric antigen receptor T cell,CAR-T),验证其在胃癌中的有效性及安全性,并对c-Met CAR进行PD1/CD28融合受体优化以改善免疫抑制,提高抗肿瘤效果。方法:使用生物信息学的方法分析TCGA中胃癌数据的c-Met表达情况及其与生存预后的关系。收集手术患者的胃癌肿瘤及癌旁组织标本,用免疫组化的方法检测c-Met的表达。并用PCR、WB、流式细胞计数等方法检测6种不同胃癌细胞系c-Met、PD-L1的基因和蛋白表达情况。构建c-Met CAR和cMet-PD1/CD28 CAR质粒,包装慢病毒、感染T细胞,制备对应的CAR-T。在体外细胞实验中,检测CAR-T细胞不同亚群和表型的变化,及靶细胞刺激对CAR-T激活和PD-1表达的影响。检测CAR-T的细胞因子分泌水平,并通过乳酸脱氢酶释放实验、7-AAD染色、CD107a脱颗粒反应等方法反映c-Met CAR-T、cMet-PD1/CD28 CAR-T对靶细胞的杀伤能力。在体内动物模型中,通过活体小动物成像等方法观测两种CAR-T对小鼠胃癌皮下移植肿...

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【学位级别】：博士

【部分图文】：

图1-1胃癌CAR-T基础和临床研究的数量

兰州大学博士学位论文c-MetCAR-T及PD1/CD28融合受体CAR-T在胃癌中的研究8图1-1胃癌CAR-T基础和临床研究的数量。(a)胃癌CAR-T基础研究各靶点的研究数量；(b)各地区胃癌CAR-T基础研究的数量；(c)胃癌CAR-T临床试验各靶点的注册数量；(d)各地....

图2-1(a)MET基因在胃癌和正常组织中的表达差异，MET基因表达与胃癌组织(b)微卫星稳定性、(c)病理分期、(d)Lauren分型之间的关系

兰州大学博士学位论文c-MetCAR-T及PD1/CD28融合受体CAR-T在胃癌中的研究0.045)，Lauren分型中肠型的MET转录水平高于弥漫型(p=0.019)（图2-1）。但是MET的转....

图2-2MET基因表达量与胃癌患者(a)性别、(b)年龄、(c)组织学分级、(d)幽门螺杆菌感染之间的关系

兰州大学博士学位论文c-MetCAR-T及PD1/CD28融合受体CAR-T在胃癌中的研究18图2-2MET基因表达量与胃癌患者(a)性别、(b)年龄、(c)组织学分级、(d)幽门螺杆菌感染之间的关系。Figure2-2RelationshipbetweenMETgeneexpr....

图2-3MET基因表达水平对胃癌患者(a)总生存期、(b)疾病相关生存期、(c)无进展生存期、(d)无病生存期的影响

兰州大学博士学位论文c-MetCAR-T及PD1/CD28融合受体CAR-T在胃癌中的研究19图2-3MET基因表达水平对胃癌患者(a)总生存期、(b)疾病相关生存期、(c)无进展生存期、(d)无病生存期的影响。Figure2-3TheeffectofMETgeneexpress....

本文编号：3942380