人卵巢子宫内膜异位症中MYH8基因突变及其功能研究

发布时间：2024-04-22 06:22

　　背景与目的:子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)是子宫内膜腺体及间质等组织存活于子宫腔外并浸润生长的妇科常见病,主要症状包括盆腔疼痛、性交痛及不育等。EMs虽为良性疾病,却往往表现细胞增殖增强、向周围组织蔓延侵蚀等恶性肿瘤的生物学特性。研究发现,特定基因突变在EMs发生发展中扮演重要作用。肌球蛋白(Myosin)是一组高度保守、在所有真核细胞中均表达的蛋白质,其主要功能是参与转化细胞运动所需的机械能,在细胞迁移和肌肉收缩等过程过发挥作用。肌球蛋白重链8(MYH8)是肌球蛋白家族重要成员,可介导细胞的迁移和粘附等生物学过程。研究发现,包括肠癌、肺癌、卵巢癌和子宫内膜癌在内的多种肿瘤中均存在MYH8基因体细胞突变;功能研究表明MYH8表达异常可导致恶性肿瘤发生。因EMs具有异常增殖、凋亡、侵袭迁移等类肿瘤特征,我们假设EMs患者可能存在MYH8基因突变且在EMs发展中扮演重要作用,影响下游相关信号通路,共同促进EMs发病。方法:收集江西省妇幼保健院病理确诊的152名卵巢EMs患者静脉外周血和卵巢囊壁组织,以及485例非EMs卵巢良性疾病对照女性血和卵巢病变组织样品。经提取血...

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【学位级别】：博士

【部分图文】：

图2.Lentivirus滴度测定六孔板示意图

第2章实验和方法252.3.6.2Lentivirus病毒滴度测定（稀释计数法）（1）稀释计数法:板孔内按10倍梯度稀释病毒，感染细胞后计算每孔中含有活性的转染病毒数。（2）293T细胞准备:用0.25%胰酶-EDTA消化293T细胞，加入新鲜培养液，重悬浮液后计细胞数，取细胞数....

图3.MYH8突变的代表性胶图，箭头所指相关突变位点

第3章实验结果41鉴定出MYH8基因的两个杂合错义突变位点，即c.1441A>C(p.I481L)和C.4057G>A(p.E1353K)（如图1，2表示）。在我们研究样本里，这些突变既未在公共数据库中发现，也未在485名汉族对照组（无子宫内膜异位症的妇女）中检测到。图3.MYH....

图4.MYH8突变在多个脊椎动物物种中的进化保守性分析

第3章实验结果41鉴定出MYH8基因的两个杂合错义突变位点，即c.1441A>C(p.I481L)和C.4057G>A(p.E1353K)（如图1，2表示）。在我们研究样本里，这些突变既未在公共数据库中发现，也未在485名汉族对照组（无子宫内膜异位症的妇女）中检测到。图3.MYH....

图5.琼脂糖凝胶电泳显示组织样本PCR产物电泳图

第3章实验结果42DNA提取后，设计相应引物（表1）进行PCR扩增（图5）。图5.琼脂糖凝胶电泳显示组织样本PCR产物电泳图Figure5.ElectrophoresisofPCRproductsintissuesamplesrevealedbyagarosegelelectro....

本文编号：3962057