探究OGC和DIC在人视网膜色素上皮细胞中的特性及其调控mGSH作用

发布时间：2024-11-02 11:25

　　背景/目的:线粒体谷胱甘肽（mitochondrial glutathione,mGSH）作为一种细胞抗氧化剂,对人视网膜色素上皮（human retinal pigment epithelium,hRPE）细胞的功能具有重要保护作用。虽然,目前对mGSH的转运机制尚未完全了解,但以往的研究表明,位于线粒体内膜的2-氧戊二酸酯（OGC;SLC25A11）和二羧酸盐（DIC;SLC25A10）作为mGSH转运体,在肝、肾和肺组织细胞中发挥重要作用。本课题主要研究OGC和DIC在hRPE细胞中的表达及定位特性,在氧化应激状态下的表达变化、对细胞凋亡的影响,以及参与调节细胞mGSH平衡的作用。方法:通过免疫印迹和共聚焦显微镜观察OGC和DIC在非极化、极化hRPE细胞以及小鼠视网膜中的表达和定位特性。分别用H₂O₂、琥珀酸苯基酯（phenylsuccinate,PS）或丙二酸丁酯（butylmalonate,BM）作用于hRPE细胞24小时,观察在不同时间、不同剂量刺激条件下,OGC和DIC的表达变化情况。通过测定抑制OGC或DIC后,细胞凋亡（TU...

【文章页数】：101 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

上海交通大学博士学位论文29图1.OGC和DIC在人视网膜色素上皮细胞中表达OGC和DIC在hRPE细胞的基因和蛋白质水平显著表达。图1A，hRPE细胞中OGC和DIC在mRNA水平表达。利用两个供体来源的RPE细胞，RPE1来自供体M，RPE2来自供体N，neg：阴性对照。图1....

上海交通大学博士学位论文30图2.OGC和DIC在人视网膜色素上皮细胞中的定位OGC和DIC在hRPE细胞中的免疫荧光染色的共聚焦图像。图2A、B第一行图分别表示细胞中的OGC和DIC（绿色荧光标记）与线粒体（Mitotracker，红色荧光标记）共染色，其中细胞核用DAPI复染....

上海交通大学博士学位论文32图3.极化状态对hRPE细胞中OGC和DIC表达的影响及ZO-1蛋白的变化极性状态对hRPE细胞中OGC和DIC表达的影响，ZO-1荧光染色的图像显示细胞间紧密连接。Westernblot分析显示，极化较非极化的RPE细胞中OGC和DIC的表达均明显增....

上海交通大学博士学位论文34图4.H2O2诱导的氧化应激条件下OGC和DIC的表达变化暴露于H2O2的hRPE细胞中OGC和DIC蛋白表达呈剂量和时间依赖性降低。给予不同浓度的H2O2（50，100，200，300μM）处理hRPE细胞24小时（图A、B，E、F）；同时观察200....

本文编号：4009519