心室阈下电刺激对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤影响的研究

发布时间：2017-06-15 18:12

  本文关键词：心室阈下电刺激对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤影响的研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的恢复血供是目前治疗缺血性心脏病的重要途径,而心肌缺血再灌注(I/R)损伤也成为主要并发症和难题。阈下电刺激作为一种安全有效的治疗手段已经在很多领域有广泛的应用,但其对心肌I/R损伤的影响还鲜有报道。本实验拟通过观察心室阈下电刺激对大鼠急性心肌I/R损伤引起的血流动力学、心律失常、梗死面积、凋亡程度等指标的影响,评价其对I/R心肌的作用,并进一步从连接蛋白43(Cx43)、P物质(SP)、降钙素基因相关肽(CGRP)、NF-κB和Caspase-3活性等几方面深入探讨可能的机制。方法:成年雄性SD大鼠(350±20g)以结扎冠脉方法建立急性心肌I/R模型。心室电刺激强度为不引起室早的最大阈下强度,频率为动物自身心率65%-70%。动物随机分成4组(每组n=6):○1正常对照组:直接开胸取心肌标本;○2 I/R组:缺血30min+再灌注60min;○3电刺激预处理组:结扎冠脉(CAO)前15min开始持续电刺激直到再灌注结束;○4电刺激后处理组:CAO25min开始电刺激,直到再灌注结束。收集血流动力学(收缩压、舒张压、平均压和心率)和室性心律失常(室早、室速、室颤)数据。用伊文氏蓝-TTC双染法评价心梗面积,用TUNEL法和Caspase-3活性检测心肌凋亡并计算凋亡率(AR)。用ELISA法检测心肌Cx43、SP、CGRP蛋白水平,同时用q RT-PCR法检测心肌SP、CGRP、NF-κB的m RNA水平。结果:电刺激(预/后处理)并不会显著影响I/R组的死亡率、血流动力学或心律失常指标(p0.05),但可以显著限制I/R组梗死面积和凋亡率(all p0.05),后处理显著下调了I/R组NF-κB、SP的m RNA水平和Caspase-3活性(all p0.05)。与正常组相比,I/R组心肌Cx43蛋白水平、Cx43侧面化程度显著增高(all p0.05);而电刺激(预/后处理)可以显著逆转这种趋势(all p0.05),电刺激预处理和后处理之间差别并不显著(p0.05)。同时电刺激预处理还显著逆转了I/R引起的心肌CGRP蛋白水平增高(p0.05)。结论:心室阈下电刺激(预/后处理)可以通过减少梗死面积和凋亡率实现对I/R心肌的保护作用,预处理机制可能是抑制了由I/R引起的心肌Cx43、CGRP蛋白过度表达,后处理则与下调心肌SP、NF-κB m RNA水平和Caspase-3活性有关。
【关键词】：心肌缺血再灌注 梗死面积 心律失常 阈下电刺激
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R542.2
【目录】：

• 摘要9-11
• Abstract11-13
• 常用缩写词中英文对照表13-14
• 前言14-16
• 第一部分 大鼠急性心肌I/R和持续心室阈下电刺激预/后处理模型建立及评价16-37
• 1 材料与方法16-25
• 1.1 实验材料16-17
• 1.2 实验分组17-18
• 1.3 实验方法18-25
• 2 结果25-27
• 3 讨论27-36
• 3.1 关于心肌缺血再灌注模型27-32
• 3.2 电刺激模型32-36
• 4 结论36-37
• 第二部分 电刺激预/后处理对大鼠急性心肌I/R损伤心肌梗死面积影响的研究37-49
• 1 材料和方法37-40
• 1.1 实验材料37-38
• 1.2 模型及分组38
• 1.3 心肌梗死面积测定（Even’s blue+TTC双染法）38-40
• 2 结果40-42
• 3 讨论42-48
• 3.1 关于实验方法42-45
• 3.2 关于实验结果45-48
• 4 结论48-49
• 第三部分 电刺激预/后处理对大鼠急性心肌I/R损伤血流动力学影响的研究49-60
• 1 材料与方法49-51
• 1.1 实验材料49
• 1.2 模型及分组49-50
• 1.3 数据采集50
• 1.4 数据处理及统计方法50-51
• 2 实验结果51-56
• 3 讨论56-59
• 4 结论59-60
• 第四部分 电刺激预/后处理对大鼠急性心肌I/R损伤心律失常影响的研究60-92
• 1 材料与方法61-63
• 1.1 模型及分组61
• 1.2 模型及分组61
• 1.3 数据采集61-62
• 1.4 数据处理及统计方法62-63
• 2 结果63-75
• 3.1 三次及三次以下室早结果63-67
• 2.2 三次以上心律失常结果67-72
• 2.3 相关分析72-75
• 3 讨论75-91
• 3.1 关于心律失常模型75-76
• 3.2 关于统计方法76-79
• 3.3 关于实验结果79-90
• 3.4 不足和展望90-91
• 4 结论91-92
• 第五部分 电刺激预/后处理对大鼠急性心肌I/R损伤凋亡程度及心肌NF-κBm RNA影响的研92-127
• 1 材料与方法92-106
• 1.1 凋亡程度检测（TUNEL法）92-96
• 1.2 Caspase-3 活性检测96-101
• 1.3 心肌NF-κB(p65) m RNA检测（q RT-PCR法）101-106
• 2 结果106-117
• 2.1 TUNEL106-108
• 2.2 蛋白定量108-109
• 2.3 Caspase-3 活性109-111
• 2.4 q RT-PCR结果111-117
• 3 讨论117-126
• 3.1 关于制片方法117-120
• 3.2 凋亡120-123
• 3.3 NF-κB123-126
• 4 结论126-127
• 第六部分 电刺激预/后处理对大鼠急性I/R损伤心肌和血清Cx43影响的研究127-157
• 1 材料与方法127-133
• 1.1 Cx43在心脏表达分布的观察127-129
• 1.2 CX43蛋白含量测定（ELISA法）129-133
• 2 结果133-143
• 2.1 免疫荧光结果133-137
• 2.2 蛋白定量结果137-138
• 2.3 ELISA结果138-143
• 3 讨论143-156
• 3.1 Cx43的研究背景回顾143-146
• 3.2 关于实验结果146-153
• 3.3 关于检测方法153-156
• 4 结论156-157
• 第七部分 电刺激预/后处理对大鼠急性心肌I/R损伤SP、CGRP表达影响的研究157-203
• 1 材料与方法158-163
• 1.1 心肌SP、CGRP的形态学观察158-160
• 1.2 SP、CGRP蛋白含量测定（ELISA法）160-162
• 1.3 心肌SP、CGRP m RNA检测（q RT-PCR法）162-163
• 2 结果163-189
• 2.1 SP结果163-175
• 2.2 CGRP结果175-189
• 3 讨论189-196
• 3.1 SP189-191
• 3.2 CGRP191-196
• 4 结论196-203
• 参考文献203-238
• 综述238-254
• 参考文献246-254
• 附录254-255
• 致谢255-256
• 在学期间承担/参与的科研课题与研究成果256-257
• 个人简介257

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 姚青;宋治远;马显光;;脉冲微交流电刺激促进体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞向心肌分化[J];第三军医大学学报;2008年05期

2 程芳洲,余细球,唐国华,李庚山,郭衍坤,鲍翠玉,周云;缺血预处理对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡及相关基因蛋白表达的影响[J];中国组织化学与细胞化学杂志;2002年01期

3 杨宝峰;蔡本志;;心律失常发病机制研究进展[J];国际药学研究杂志;2010年02期

4 姚震,焦解歌,冯建章,翁阳,尹瑞兴,顾申红;心肌缺血-再灌注损伤与细胞凋亡关系的实验研究[J];海南医学院学报;2000年03期

5 徐振平,郭萍,郭志坤;大鼠心脏连接蛋白43表达的增龄变化[J];解剖学报;2002年05期

6 华琦,王西凤,邢华,李秀珍,邢建刚;高血压病患者的收缩压和舒张压与左心功能相关关系的研究[J];首都医科大学学报;1998年03期

7 焦博;张琳;余立群;卢元明;岳志杰;余志斌;;模拟在体心脏缺血-再灌注损伤的离体心脏模型[J];生理学报;2013年06期

8 王东琦;舒娟;崔长琮;薛小临;马奕;苏显明;赵小静;朱参战;张海柱;;双心室起搏-不应期电刺激的急性血液动力学变化和离子机制[J];西安交通大学学报(医学版);2008年02期

9 商立军,臧益民,臧伟进;CGRP对正常及模拟缺血缺氧状态下豚鼠心肌细胞L型钙通道电流的影响[J];中国药理学通报;2000年05期

10 邱汉婴，毛焕元，李裕舒，毛方方，李赞飞;阈下条件刺激对心房不应期的影响及对心房起搏节律的抑制作用[J];中国病理生理杂志;1994年06期

中国博士学位论文全文数据库 前2条

1 袁华兵;不同强度绝对不应期电刺激对心力衰竭兔心脏功能影响的实验研究[D];河北医科大学;2011年

2 贾玉和;人类心脏瓣膜病慢性心房颤动心肌中缝隙连接通道CX43和CX40的重构[D];中国协和医科大学;2002年

  本文关键词：心室阈下电刺激对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤影响的研究，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：453156