班氏跳小蜂寄主定位的嗅觉机制

发布时间：2018-04-14 23:18

  本文选题：班氏跳小蜂 + 寄主定位　； 参考：《华中农业大学》2017年硕士论文

【摘要】：嗅觉在寄生蜂寄主定位过程中发挥着非常重要的作用。寄生蜂可利用嗅觉感器接收来自植物或寄主的信息化学物质作为其寄主定位的线索,探索寄生蜂的嗅觉系统及其寄主定位的嗅觉机制,将为害虫的生物防治提供新思路。扶桑绵粉蚧(Phenacoccus solenopsis Tinsley)是我国严重的入侵性害虫,班氏跳小蜂(Aenasius bambawalei Hayat)是其专性寄生天敌,对扶桑绵粉蚧具有较高的防控潜能。信息化学物质在寄生蜂寄主定位过程中起着重要的作用,如果能够探明班氏跳小蜂寄主定位的嗅觉机制,将可为扶桑绵粉蚧的生物防治提供理论基础。为此,本课题以班氏跳小蜂为研究对象,在构建分析其触角转录组的基础上,筛选鉴定了与嗅觉相关的功能基因;明确了部分气味结合蛋白在班氏跳小蜂成虫不同部位的表达模式;测定了气味结合蛋白(Abam OBP1)与棉花挥发物的结合特性,从中筛选出具有较强结合活性的物质,并测定了班氏跳小蜂对这些物质的行为反应。主要结果如下:1班氏跳小蜂的触角转录组分析通过高通量测序技术(Illumina Hiseq 2000)分析,班氏跳小蜂触角转录组总计产出7154582040nt数据,contigs序列89469条,经组装得到Unigene 60198个,其中的30959条被注释到NR蛋白数据库。NR注释的结果显示61.5%的班氏跳小蜂Unigenes能够与蝇蛹金小蜂Nasonia vitripennis的基因序列比对上。通过筛选和在NCBI上比对,从班氏跳小蜂触角转录组中发现有OBPs 54条,其中4条为片段,ORs 226条,其中有63条片段;41条GRs,其中有13条片段;3条全长的SNMPs。2班氏跳小蜂OBP的表达模式通过q-PCR检测了10个Abam OBPs基因在班氏跳小蜂雌雄虫不同部位的表达量。结果显示,基因Abam OBP31在雌虫触角特异性表达;基因Abam OB1、Abam OBP23、Abam OBP24和Abam OBP30在雄虫触角特异性表达。基因Abam OBP26、Abam OB34和Abam OBP43高表达于雌虫足部;而基因Abam OBP2和Abam OBP50在雌、雄虫的头部特异性表达。3班氏跳小蜂Abam OBP1与气味物质的结合特性分析克隆了Abam OBP1基因,构建了以p ET-17b为表达载体的重组质粒(p ET17b-Abam OBP1),通过原核表达最终获得了纯的蛋白Abam OBP1;利用荧光竞争结合技术测定了不同p H值条件下Abam OBP1与22种棉花挥发物单体的结合特性。结果表明,在酸性环境下,Abam OBP1与大部分挥发物的结合能力普遍高于中性环境下。酸性条件下,除了与壬醛和辛二酸二乙酯这两种物质的结合能力较差(20μMKi50μM),Abam OBP1蛋白与大部分气味物质的结合能力都较强(Ki≤20μM)。在中性条件下,Aban OBP1与1-辛烯-3-酮、2,4,4-三甲基-2-戊烯、苯甲酸甲酯、十二烷、橙花叔醇、(S)-(-)-柠檬烯、(R)-(-)-柠檬烯和芳樟醇的结合能力较强(Ki≤20μM)。4班氏跳小蜂对气味物质的行为反应利用Y-型嗅觉仪测定了班氏跳小蜂成虫对1-辛烯-3-酮、2,4,4-三甲基-2-戊烯和S-(-)-柠檬烯这3种挥发物单体的行为反应。结果表明,班氏跳小蜂雌虫和雄虫对1-辛烯-3-酮、2,4,4-三甲基-2-戊烯均表现出明显的偏好性,且班氏跳小蜂的雄虫对2,4,4-三甲基-2-戊烯的选择性达极显著水平,但班氏跳小蜂雌、雄虫对S-(-)-柠檬烯无明显的选择性。
[Abstract]:On the basis of constructing and analyzing its antennal transcriptome , it has been found that it is a serious invasive pest in China . The results of this study are as follows : In this paper , we find out that there are 63 fragments , including 13 fragments , and 3 full - length SNMPs . Aban OBP1 and Abam OBP50 were highly expressed in the foot of female worm . The binding ability of Aban OBP1 and Abam OBP50 was higher than that in neutral environment ( Ki 鈮，

本文编号：1751468