牛樟芝人工培养工艺及三萜类成分产生规律的研究

发布时间：2018-05-19 21:16

本文选题：牛樟芝 + 菌丝体　；参考：《鲁东大学》2017年硕士论文

【摘要】：牛樟芝,又名牛樟菇,只生长在台湾高山林区的珍稀食药用真菌。三萜类物质是其主要的活性物质之一。目前,人工牛樟芝子实体培育难和液体发酵三萜类物质产量低的问题仍是困扰研究者的主要问题。本论文对牛樟芝菌丝体的固体和液体培养特性进行研究,并以总三萜含量为主要目标,对液态发酵的条件和液态发酵培养基进行了优化;利用不同段木栽培牛樟芝;对牛樟芝菌丝固体培养的三萜类物质产生的规律进行了分析,添加不同种类中药提取物来提高牛樟芝液体发酵产三萜类物质含量。研究了牛樟芝的固体培养特性,采用不同固体培养基对牛樟芝进行培养,观察牛樟芝菌丝体的生长状况,对牛樟芝菌丝体的特点进行研究,并测定三萜物质在牛樟芝菌丝中的含量。在不同的固体琼脂培养基上牛樟芝菌丝体生长状况都呈现良好的状态,速度差别大,菌丝体的形态有较大的不同。胡萝卜培养基、PDA培养基和麦麸培养基比较适合于牛樟芝的生长。在GPY和胡萝卜培养基中总三萜含量是最高的。牛樟芝菌丝体在所试碳源配制成的培养基中都可以生长,在所实验的碳源中,以果糖、木糖醇、麦芽糖、甘露糖、木糖、葡萄糖为碳源时,牛樟芝菌丝生长状况较好,但是在葡萄糖为碳源时樟芝菌丝体总三萜含量高,麦芽糖和甘露糖作为碳源,总三萜含量也相对较高。除了以尿素为氮源未见到肉眼可辨的生长外,牛樟芝在不同所试氮源配制成的培养基中生长速度和菌丝形态有较大差别,牛樟芝菌丝体在以鱼蛋白胨和硫酸铵为氮源时总三萜含量较高。研究了牛樟芝的液体培养特性,采用不同的液体培养基对牛樟芝进行培养,观察其对牛樟芝菌丝的生长和总三萜含量的影响。以牛樟芝菌丝体总三萜含量为目标,通过单个因子对牛樟芝液体发酵的影响实验,从而得到牛樟芝菌丝生长所需适宜培养条件,得到的培养条件:培养时间20天,初始pH4,瓶装量150mL,转速120rpm。在摇瓶培养的基础上,通过单因素实验筛选出牛樟芝液体发酵的最佳碳源、氮源和生长因子,最适培养基配方:碳源为木糖,氮源为硝酸钠,生长因子为玉米浆。研究了牛樟芝子实体的培养工艺,将老龄的苹果木、梨木、板栗木、柞木锯成一定长度的木桩,将锯好的木桩在水中浸泡10天,接种牛樟芝,进行营养生长管理和生殖生长管理,最终在废弃的老龄苹果木上长出了牛樟芝的子实体。然后进行子实体的中试生产实验。在50L的种子罐中投料30L,置于28℃下培养3到5天。将液体种子接到苹果木、梨木、板栗木、柞木段木培养基上,进行营养生长管理和生殖生长管理,最终在老龄苹果木上长出了牛樟芝的子实体。研究了牛樟芝菌丝不同培养时期体内三萜类物质的性质和含量。采用不同固体培养基对牛樟芝进行培养,观察牛樟芝菌丝体的生长状况,测定不同时期牛樟芝菌丝体中总三萜的含量以及变化规律,利用高效液相色谱法对物质种类进行初步分析,并对其三萜类成分在不同培养基不同培养时期的变化规律进行了探讨。结果表明:牛樟芝在六种培养基上培养两个月,菌丝体中总三萜含量除了在胡萝卜培养基50天至60天时出现下降以外,在其他五种培养基上基本都会出现呈上升的趋势。三萜类物质的种类和含量在同一培养基的不同时期以及不同培养基的同一时期都呈现出一定的规律性和差异性。研究了不同中药醇提或水提物对牛樟芝在液体培养中生物量和三萜类物质含量的影响。将不同中药的水提物和醇提物分别加入到发酵基础培养基中,培养20天后测定牛樟芝菌丝体生物量和三萜含量。结果表明,薏苡仁水提物添加浓度在0.6%时,对牛樟芝生长有抑制作用,但是在加入其它水提物的情况下都会对其生长有不同程度的促进。枸杞水提物对三萜类物质含量和牛樟芝生长也均有促进作用。高浓度陈皮和当归醇提物对牛樟芝菌丝生长和三萜物质的提高会起到明显的抑制作用。连翘醇提物对三萜类物质含量的促进作用最明显。
[Abstract]:This paper studied the solid and liquid culture characteristics of Antrodia cinnamomea mycelia . The effects of different traditional Chinese medicines on the growth and growth of Antrodia camphora were studied .
【学位授予单位】：鲁东大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：S646

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