Fc-FnBPB-CIfA亚单位疫苗对金黄色葡萄球菌奶牛乳腺炎免疫效果研究
发布时间：2019-08-09 16:00
【摘要】：奶牛乳腺炎(Bovine mastitis)主要是由乳腺受细菌感染而导致的炎症。引发奶牛乳腺炎的细菌多种多样,目前已发现约150多种,其中金黄色葡萄球菌是致使奶牛患乳腺炎的主要原因之一。金黄色葡萄球菌黏附上皮细胞或细胞外基质蛋白被认为是早期感染的关键,而纤连结合蛋白B(FnBPB)和凝集因子A(ClfA)是奶牛感染金黄色葡萄球菌引起乳腺炎的重要黏附因子。FnBPB的D区(FnBPB-D)和ClfA的A区(ClfA-A)是其黏附的重要功能区。Fc受体在猪、反刍动物等乳腺中表达,能够与IgG的Fc片段直接结合运输IgG,使IgG维持稳定的动态平衡。因此本研究针对金黄色葡萄球菌性奶牛乳腺炎,在本实验室过去的研究基础上,制备了 Fc-FnBPB-ClfA亚单位疫苗,并分别配合铝盐佐剂及1%盐酸左旋咪唑佐剂以不同免疫方式对奶牛进行免疫,评价其免疫效果。以盐酸左旋咪唑(LMS)或氢氧化铝(ALUM)为佐剂与纯化的重组蛋白(bFc-FnBPB-ClfA)混合以首次免疫肌肉注射,加强免疫乳头管灌注或首次免疫、二次免疫及三次免疫均以肌肉注射方式免疫临近干奶期的奶牛。用间接ELISA法检测各组牛血清及初乳乳清中的抗体水平。结果表明:以LMS为佐剂免疫的(A组)牛血清滴度最高可达到1:1600,乳清滴度达到1:400;而以ALUM为佐剂免疫的B组血清效价为1:800,乳清效价为1:200;C组血清抗体滴度为1:400,乳清效价为1:200。在奶牛产犊后30d、45d及60d对其乳汁进行CMT检测,免疫组多数奶牛乳样体细胞数在0-2万个/mL,而对照组中奶牛乳样体细胞数则50万个/mL,证明疫苗有较好的预防效果。采集奶牛乳汁,免疫前试验组奶牛乳汁中金黄色葡萄球菌分离率为85%,免疫后分菌率降低到15%,说明该疫苗同时具有治疗的作用。本研究结果表明,以首次免疫肌肉注射,加强免疫乳头管灌注的方式较好并且bFc-FnBPB-ClfA与LMS佐剂混合后免疫奶牛能最有效激发奶牛免疫反应。
【图文】：
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本文编号：2524877
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