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耐盐碱甜高粱种质筛选及其离体再生体系构建

发布时间:2019-09-24 23:49
【摘要】:甜高粱是最具优势的生物质能源作物之一,筛选耐盐碱性甜高粱品种,对于开发利用我国广大盐碱土地和发展乙醇燃料产业具有重要意义。构建快速、高效的甜高粱离体再生技术,是利用转基因技术快速改良甜高粱农艺性状的基础。本研究首先以不同比例的中性盐和碱性盐混合,模拟符合自然状况的4种混合盐碱胁迫土壤,对9个甜高粱品种进行芽期和幼苗期胁迫处理,基于12种不同抗逆指标的变化规律,通过隶属函数法和灰色关联分析法判定了9个甜高粱品种的抗盐碱性,并对12个指标在甜高粱耐盐碱性判定中的可靠性进行了分析。其次,以筛选出的耐盐碱性强的甜高粱品种成熟种子为外植体,以胚性愈伤组织细胞诱导率、愈伤细胞分化率、不定芽生根率为鉴定指标,通过优化愈伤组织细胞诱导分化过程中相关培养基激素种类和水平、培养基成分、培养条件等因素,构建一套适合甜高粱遗传转化所需的离体再生培养体系,并进而筛选出具有非常高的效率再生能力品种。研究结果如下:1.根据加权抗盐碱指数和抗盐碱度量值D的大小对9份材料进行抗盐碱性排序,结果表明,9个品种的综合抗盐碱性由强到弱的排序为四杂25号雅津4340号雅津4184号雅津106号雅津2号雅津4589号雅津4590号雅津10号龙杂9号。四杂25号和雅津4340号的加权抗盐碱指数和抗盐碱度量值D均是第一和第二,属于抗盐碱性强的材料。而龙杂9号和雅津10号的加权抗盐碱指数和抗盐碱度量值D均最小,属于盐碱敏感材料。2.12个性状(种子发芽率、茎叶鲜重、根长、须根数、叶片电导率、叶片SOD酶活性、叶片脯氨酸含量和5个叶绿素荧光参数)与综合抗盐碱指数的关联分析显示,茎叶鲜重、叶片相对电导率、根长和Fv/Fo比值的关联度均大于0.9,是评价甜高粱耐盐碱胁迫程度的最佳指标;其次为Fv/Fm和发芽率,其关联度均大于0.8,是可选指标;须根数、Fm、Fv和Fo的关联度最小,应谨慎使用。3.影响甜高粱成熟种子胚愈伤组织再生苗的相关因素研究结果表明:1)用0.1%升汞处理甜高粱种子10分钟,并添加2滴的增效剂Tween20,种子具有较低的污染率(低于20%)和较高的发芽率(76.7%)。2)在MSB5基本培养基上加入3.0mg/L的生长素2,4-D和0.3mg/L的6-BA,成熟种子具有最高出愈率(68.3%)。3)基因型对愈伤诱导效果分析显示,雅津106、雅津4184、雅津4340、四杂25在该培养基上出愈率差异显著,其中雅津4184出愈率最高,为81.7%。4)雅津4184成熟种子愈伤组织在添加0.2 mg/L NAA和1.6 mg/L KT的B5培养基上出芽率最高,为93.3%。5)用雅津4184成熟种子愈伤组织诱导的芽分别在添加不同浓度的IBA的1×MS、0.5×MS和MSB5培养基上培养诱导生根,结果显示在添加2.Omg/L IBA的1 xMS培养基上培养3周,具有最大的生根率(96.7%)。
【图文】:

甜高梁,发芽率,种子,消毒处理


图3-8不同浓度的升未处理甜高梁成熟种子并培养3周后的萌发情况(A)、污染率逡逑(B)、发芽率(C)和0.1%升录添加不同滴数的Tween邋20处理成熟种子10分钟并逡逑培养3周后的污染率(D)、发芽率(E)逡逑Figure邋3-8邋The邋culture邋resuIt(A),邋pollution邋rate邋(B),邋germination邋rate邋(C)邋of邋Sweet邋sorghum逡逑seeds邋on邋different邋concentrations邋of邋mercuric邋chloride邋treatment邋for邋3邋weeks邋and邋pollution逡逑rate邋(D),邋germination邋i*a化(E)邋of邋Sweet邋sorghum邋seeds邋on邋0.1%邋mercuric邋chloi'ide邋化邋add逡逑Tween邋20邋treatment邋for邋3邋weeks逡逑综合考虑1^上分析,在不添加增效剂得情况下,用0.1%的升隶处理逡逑种子10分钟是最好的消毒处理,此时,所选取的甜高梁种子同时具有较逡逑第巧页(共巧页)逡逑

甜高梁,诱导产生,愈伤组织,发芽率


逦0逦1逦三逦3逦4逦5逡逑操巧面啸逡逑图3-8不同浓度的升未处理甜高梁成熟种子并培养3周后的萌发情况(A)、污染率逡逑(B)、发芽率(C)和0.1%升录添加不同滴数的Tween邋20处理成熟种子10分钟并逡逑培养3周后的污染率(D)、发芽率(E)逡逑Figure邋3-8邋The邋culture邋resuIt(A),邋pollution邋rate邋(B),邋germination邋rate邋(C)邋of邋Sweet邋sorghum逡逑seeds邋on邋different邋concentrations邋of邋mercuric邋chloride邋treatment邋for邋3邋weeks邋and邋pollution逡逑rate邋(D),邋germination邋i*a化(E)邋of邋Sweet邋sorghum邋seeds邋on邋0.1%邋mercuric邋chloi'ide邋化邋add逡逑Tween邋20邋treatment邋for邋3邋weeks逡逑综合考虑1^上分析,在不添加增效剂得情况下,,用0.1%的升隶处理逡逑种子10分钟是最好的消毒处理,此时,所选取的甜高梁种子同时具有较逡逑第巧页(共巧页)逡逑
【学位授予单位】:南阳师范学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:S566.5

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本文编号:2541118

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