贝莱斯芽胞杆菌HN-Q-8抑制马铃薯黑痣病菌活性物质研究
发布时间：2021-10-05 16:55
马铃薯黑痣病是由立枯丝核菌引起的一种土传性病害,目前主要使用噻呋酰胺与嘧菌酯等化学药剂防治该病,但是这些化学药剂长期使用会产生抗药性,同时会污染环境且破坏土壤微生物的群落结构。芽胞杆菌因其防治效果明显、绿色环保等特点被广泛应用于植物病害防治中。本研究以前期筛选到的一株拮抗马铃薯黑痣病菌效果较好的贝莱斯芽胞杆菌HN-Q-8为研究对象,对其发酵液的抑菌谱、抑菌稳定性、生防因子以及主要抑菌活性物质等方面进行了研究,主要结果如下:1.贝莱斯芽胞杆菌HN-Q-8发酵液抑菌谱广且抑菌稳定性强。贝莱斯芽胞杆菌HN-Q-8无菌发酵液对立枯丝核菌、灰葡萄孢、茄病镰刀菌、链格孢苹果专化型、茄链格孢、致病疫霉和疮痂链霉菌均具有明显的抑制作用,抑菌率为50%-90%其中,对立枯丝核菌、灰葡萄孢和疮痂链霉菌的抑菌率在85%以上,但对尖孢镰刀菌的抑菌率仅为24.17%,对胡萝卜欧文氏菌没有抑制作用。贝莱斯芽胞杆菌HN-Q-8无菌发酵液在紫外光、自然光、蛋白酶、温度以及酸碱条件下处理对立枯丝核菌有较好的稳定性,其中发酵液分别经紫外照射35 min、自然光照射10 h以及100℃高温处理后,相对抑菌率分别为74%、9...
【文章来源】：河北农业大学河北省
【文章页数】：52 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
1 引言
1.1 马铃薯黑痣病研究现状
1.1.1 马铃薯黑痣病的症状及危害
1.1.2 马铃薯黑痣病的病害循环
1.1.3 马铃薯黑痣病菌的生物学特性
1.1.4 马铃薯黑痣病的防治方法
1.2 芽胞杆菌的生防机理研究现状
1.2.1 促生作用
1.2.2 诱导作用
1.2.3 竞争作用
1.2.4 溶菌作用
1.2.5 拮抗作用
1.3 芽胞杆菌的代谢产物分类
1.3.1 核糖体途径合成的抑菌活性物质
1.3.2 非核糖体途径合成的抑菌活性物质
1.4 本研究的目的和意义
2 材料和方法
2.1 试验材料
2.1.1 供试菌株
2.1.2 供试培养基
2.1.3 主要试验仪器
2.2 HN-Q-8菌株无菌发酵液拮抗作用
2.2.1 HN-Q-8菌株无菌发酵液的制备
2.2.2 HN-Q-8菌株无菌发酵液抑菌谱的测定
2.2.3 HN-Q-8菌株发酵液对马铃薯黑痣病菌菌丝的影响
2.3 HN-Q-8菌株发酵液稳定性的测定
2.3.1 紫外光稳定性
2.3.2 自然光稳定性
2.3.3 蛋白酶稳定性
2.3.4 热稳定性
2.3.5 酸碱稳定性
2.4 拮抗菌HN-Q-8生防相关因子的测定与预测
2.4.1 拮抗菌HN-Q-8生防物质测定
2.4.2 贝莱斯芽胞杆菌HN-Q-8生防基因的预测及鉴定
2.5 脂肽类物质的分离鉴定
2.5.1 抑菌活性物质的提取及毒力测定
2.5.2 抑菌活性物质对马铃薯黑痣病菌菌丝的影响
2.5.3 抑菌活性物质的分离及抑菌活性测定
2.5.4 抑菌活性物质的成分鉴定
2.5.5 主要抑菌物质的生物活性测定
3 结果与分析
3.1 菌株HN-Q-8无菌发酵液的拮抗效果
3.1.1 菌株HN-Q-8无菌发酵液的抑菌谱
3.1.2 HN-Q-8发酵液对马铃薯黑痣病菌ZB4菌丝的影响
3.2 发酵液对外界环境稳定性的测定
3.2.1 紫外稳定性
3.2.2 自然光稳定性
3.2.3 蛋白酶稳定性
3.2.4 热稳定性
3.2.5 酸碱稳定性
3.3 菌株HN-Q-8相关生防因子
3.3.1 菌株HN-Q-8产生酶和元素的能力
3.3.2 控制次生代谢产物产生的相关基因簇预测
3.3.3 抑菌活性物质的关键合成基因的检测
3.4 抑菌活性物质的分离鉴定
3.4.1 抑菌活性物质的提取及毒力测定
3.4.2 抑菌活性物质对马铃薯黑痣病菌菌丝的影响
3.4.3 抑菌活性物质的抑菌谱
3.4.4 抑菌活性物质的洗脱
3.4.5 抑菌活性成分的鉴定
3.4.6 试剂纯品抑菌作用测定
4 讨论
4.1 芽胞杆菌代谢产物对生防作用的影响
4.2 发酵液稳定性对生防作用的影响
4.3 芽胞杆菌抑菌活性物质的分离及鉴定
4.4 脂肽的种类对抑菌作用的影响
5 结论
参考文献
在读期间发表的学术论文
作者简历
6 致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]45%噻呋酰胺·嘧菌酯SC对马铃薯黑痣病的田间防效[J]. 杨春. 农药. 2019(11)
[2]马铃薯黑痣病发生与田间防治试验[J]. 文家富,郑小惠,陆淑静,王满强. 陕西农业科学. 2019(10)
[3]解淀粉芽胞杆菌产酶多样性及应用研究进展[J]. 王世伟,王卿惠,翟丽萍,刘军,于志丹. 微生物学杂志. 2019(05)
[4]我国马铃薯病虫害发生现状与防控策略[J]. 高玉林,徐进,刘宁,周倩,丁新华,詹家绥,成新跃,黄剑,鲁宇文,杨宇红. 植物保护. 2019(05)
[5]内生解淀粉芽胞杆菌BEB33脂肽类化合物分析及对香蕉枯萎病菌拮抗作用研究[J]. 王宝,杨扬,蔡吉苗,陈奕鹏,黄贵修. 中国生物防治学报. 2019(05)
[6]中国马铃薯病虫害发生情况与农药使用现状[J]. 徐进,朱杰华,杨艳丽,汤浩,吕和平,樊明寿,石瑛,董道峰,王贵江,王万兴,熊兴耀,高玉林. 中国农业科学. 2019(16)
[7]利用响应面分析法优化贝莱斯芽孢杆菌TCS001的发酵条件[J]. 杨可,司文,林海,林方锐,袁静,陈杰. 农药学学报. 2019(04)
[8]枯草芽胞杆菌Y13挥发性物质的分析及抑菌活性[J]. 冯福山,刘君昂,胡廉成,文瑞芝,周国英. 中国生物防治学报. 2019(04)
[9]新疆维吾尔自治区北疆地区马铃薯真菌病害发生情况分析[J]. 李江涛,杨茹薇,罗正乾,徐琳黎,李克梅. 中国马铃薯. 2019(03)
[10]解淀粉芽胞杆菌PHODB35对小麦的促生作用及产量影响[J]. 赵卫松,李社增,鹿秀云,张晓云,王培培,郭庆港,齐永志,董丽红,毛晓曦,苏振贺,马平. 中国生物防治学报. 2019(03)
博士论文
[1]防治稻瘟病芽胞杆菌的筛选及生防机制研究[D]. 沙月霞.中国农业大学 2016
[2]枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis RN-61）抗菌蛋白的纯化及鉴定[D]. 任建军.北京林业大学 2013
[3]马铃薯抗黑痣病鉴定技术及其抗病机制研究[D]. 张笑宇.内蒙古农业大学 2012
[4]米根霉CICIM F0071α-淀粉酶：基因克隆、鉴定与异源表达[D]. 李松.江南大学 2011
硕士论文
[1]侵染马铃薯立枯丝核菌病毒的筛选、鉴定及生物学性状分析[D]. 杨柳.西北农林科技大学 2019
[2]芽胞杆菌YL1的分类鉴定及其次级代谢产物分离纯化分析[D]. 易磊.华中农业大学 2018
[3]立枯丝核菌毒素对马铃薯幼苗细胞结构及抗性生理的影响[D]. 陈转成.甘肃农业大学 2017
[4]防治土传烟草黑胫病微生物有机肥的研制与生物效应研究[D]. 曹明慧.南京农业大学 2010
本文编号：3420154
【文章来源】：河北农业大学河北省
【文章页数】：52 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
1 引言
1.1 马铃薯黑痣病研究现状
1.1.1 马铃薯黑痣病的症状及危害
1.1.2 马铃薯黑痣病的病害循环
1.1.3 马铃薯黑痣病菌的生物学特性
1.1.4 马铃薯黑痣病的防治方法
1.2 芽胞杆菌的生防机理研究现状
1.2.1 促生作用
1.2.2 诱导作用
1.2.3 竞争作用
1.2.4 溶菌作用
1.2.5 拮抗作用
1.3 芽胞杆菌的代谢产物分类
1.3.1 核糖体途径合成的抑菌活性物质
1.3.2 非核糖体途径合成的抑菌活性物质
1.4 本研究的目的和意义
2 材料和方法
2.1 试验材料
2.1.1 供试菌株
2.1.2 供试培养基
2.1.3 主要试验仪器
2.2 HN-Q-8菌株无菌发酵液拮抗作用
2.2.1 HN-Q-8菌株无菌发酵液的制备
2.2.2 HN-Q-8菌株无菌发酵液抑菌谱的测定
2.2.3 HN-Q-8菌株发酵液对马铃薯黑痣病菌菌丝的影响
2.3 HN-Q-8菌株发酵液稳定性的测定
2.3.1 紫外光稳定性
2.3.2 自然光稳定性
2.3.3 蛋白酶稳定性
2.3.4 热稳定性
2.3.5 酸碱稳定性
2.4 拮抗菌HN-Q-8生防相关因子的测定与预测
2.4.1 拮抗菌HN-Q-8生防物质测定
2.4.2 贝莱斯芽胞杆菌HN-Q-8生防基因的预测及鉴定
2.5 脂肽类物质的分离鉴定
2.5.1 抑菌活性物质的提取及毒力测定
2.5.2 抑菌活性物质对马铃薯黑痣病菌菌丝的影响
2.5.3 抑菌活性物质的分离及抑菌活性测定
2.5.4 抑菌活性物质的成分鉴定
2.5.5 主要抑菌物质的生物活性测定
3 结果与分析
3.1 菌株HN-Q-8无菌发酵液的拮抗效果
3.1.1 菌株HN-Q-8无菌发酵液的抑菌谱
3.1.2 HN-Q-8发酵液对马铃薯黑痣病菌ZB4菌丝的影响
3.2 发酵液对外界环境稳定性的测定
3.2.1 紫外稳定性
3.2.2 自然光稳定性
3.2.3 蛋白酶稳定性
3.2.4 热稳定性
3.2.5 酸碱稳定性
3.3 菌株HN-Q-8相关生防因子
3.3.1 菌株HN-Q-8产生酶和元素的能力
3.3.2 控制次生代谢产物产生的相关基因簇预测
3.3.3 抑菌活性物质的关键合成基因的检测
3.4 抑菌活性物质的分离鉴定
3.4.1 抑菌活性物质的提取及毒力测定
3.4.2 抑菌活性物质对马铃薯黑痣病菌菌丝的影响
3.4.3 抑菌活性物质的抑菌谱
3.4.4 抑菌活性物质的洗脱
3.4.5 抑菌活性成分的鉴定
3.4.6 试剂纯品抑菌作用测定
4 讨论
4.1 芽胞杆菌代谢产物对生防作用的影响
4.2 发酵液稳定性对生防作用的影响
4.3 芽胞杆菌抑菌活性物质的分离及鉴定
4.4 脂肽的种类对抑菌作用的影响
5 结论
参考文献
在读期间发表的学术论文
作者简历
6 致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]45%噻呋酰胺·嘧菌酯SC对马铃薯黑痣病的田间防效[J]. 杨春. 农药. 2019(11)
[2]马铃薯黑痣病发生与田间防治试验[J]. 文家富,郑小惠,陆淑静,王满强. 陕西农业科学. 2019(10)
[3]解淀粉芽胞杆菌产酶多样性及应用研究进展[J]. 王世伟,王卿惠,翟丽萍,刘军,于志丹. 微生物学杂志. 2019(05)
[4]我国马铃薯病虫害发生现状与防控策略[J]. 高玉林,徐进,刘宁,周倩,丁新华,詹家绥,成新跃,黄剑,鲁宇文,杨宇红. 植物保护. 2019(05)
[5]内生解淀粉芽胞杆菌BEB33脂肽类化合物分析及对香蕉枯萎病菌拮抗作用研究[J]. 王宝,杨扬,蔡吉苗,陈奕鹏,黄贵修. 中国生物防治学报. 2019(05)
[6]中国马铃薯病虫害发生情况与农药使用现状[J]. 徐进,朱杰华,杨艳丽,汤浩,吕和平,樊明寿,石瑛,董道峰,王贵江,王万兴,熊兴耀,高玉林. 中国农业科学. 2019(16)
[7]利用响应面分析法优化贝莱斯芽孢杆菌TCS001的发酵条件[J]. 杨可,司文,林海,林方锐,袁静,陈杰. 农药学学报. 2019(04)
[8]枯草芽胞杆菌Y13挥发性物质的分析及抑菌活性[J]. 冯福山,刘君昂,胡廉成,文瑞芝,周国英. 中国生物防治学报. 2019(04)
[9]新疆维吾尔自治区北疆地区马铃薯真菌病害发生情况分析[J]. 李江涛,杨茹薇,罗正乾,徐琳黎,李克梅. 中国马铃薯. 2019(03)
[10]解淀粉芽胞杆菌PHODB35对小麦的促生作用及产量影响[J]. 赵卫松,李社增,鹿秀云,张晓云,王培培,郭庆港,齐永志,董丽红,毛晓曦,苏振贺,马平. 中国生物防治学报. 2019(03)
博士论文
[1]防治稻瘟病芽胞杆菌的筛选及生防机制研究[D]. 沙月霞.中国农业大学 2016
[2]枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis RN-61）抗菌蛋白的纯化及鉴定[D]. 任建军.北京林业大学 2013
[3]马铃薯抗黑痣病鉴定技术及其抗病机制研究[D]. 张笑宇.内蒙古农业大学 2012
[4]米根霉CICIM F0071α-淀粉酶：基因克隆、鉴定与异源表达[D]. 李松.江南大学 2011
硕士论文
[1]侵染马铃薯立枯丝核菌病毒的筛选、鉴定及生物学性状分析[D]. 杨柳.西北农林科技大学 2019
[2]芽胞杆菌YL1的分类鉴定及其次级代谢产物分离纯化分析[D]. 易磊.华中农业大学 2018
[3]立枯丝核菌毒素对马铃薯幼苗细胞结构及抗性生理的影响[D]. 陈转成.甘肃农业大学 2017
[4]防治土传烟草黑胫病微生物有机肥的研制与生物效应研究[D]. 曹明慧.南京农业大学 2010
本文编号：3420154
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