大豆疫霉RxLR类效应子Avh113抑制植物免疫反应的分子机理研究

发布时间：2022-04-27 18:39

　　大豆疫霉（Phytophthora sojae）是属于卵菌纲、霜霉目、腐霉科的疫霉属,和真菌的致病机理有很大的不同。大豆疫霉能够侵染植物的整个生长发育期和不同组织,导致了大豆根腐病会频繁发生,造成了严重的经济损失。在自然选择和协同进化的过程中,大豆疫霉与宿主能够通过相互作用和竞争来维持各自的生理活动:一方面,大豆疫霉通过分泌效应子能够干扰或抑制植物体内的免疫反应,使植物发生病害;另一方面,大豆通过防卫相关的抗病蛋白与大豆疫霉效应子相互作用从而激活植物体的免疫防御体系来抵御大豆疫霉的入侵。为了深入研究大豆疫霉效应子如何抑制植物防御反应,本研究以大豆疫霉效应子为研究对象,鉴定了一个具有毒性功能的效应子,并对其生物学功能和宿主靶标互作机制进行了系统的研究,获得了以下主要结果:1、利用PVX病毒介导的植物病原毒性因子筛选体系,鉴定出一个RxLR类效应子Avh113能够增强病毒症状,导致本氏烟的生长发育缺陷。Northern blot分析发现Avh113的表达积累了更多的PVX病毒RNA,表明大豆疫霉效应子Avh113是一个潜在的毒性因子。2、大豆疫霉在宿主中的接种实验结合实时荧光定量（qRT-... 

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【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略词表及其英汉对照
第1章 绪论
    1.1 引言
    1.2 大豆疫霉病的产生与防治研究
        1.2.1 大豆概述
        1.2.2 大豆疫霉概述
        1.2.3 大豆疫霉的繁殖器官的形态特征研究
        1.2.4 大豆疫霉的生活习性研究
        1.2.5 大豆疫霉病害流行循环规律的研究
        1.2.6 大豆疫霉的治理进展与方法
        1.2.7 大豆疫霉的分类地位研究
    1.3 植物与病原菌互作研究
        1.3.1 病原菌与植物互作理论机制
        1.3.2 病原菌与植物免疫功能之间的互相调节
    1.4 卵菌效应子的分析研究
        1.4.1 卵菌RxLR类效应子
        1.4.2 其他类型卵菌效应子
    1.5 类异染色质蛋白1(LHP1)相关的生物学研究
        1.5.1 类异染色质蛋白1(LHP1)
        1.5.2 类异染色质蛋白1(LHP1)结构功能研究
        1.5.3 类异染色质蛋白1(LHP1)调控植物表观的研究
    1.6 研究的目的和意义
第2章 材料与方法
    2.1 试验材料
        2.1.1 供试植物
        2.1.2 供试菌株
        2.1.3 试验所需试剂
    2.2 试验方法
        2.2.1 制备感受态
        2.2.2 烟草叶片的RNA的提取
        2.2.3 大豆c DNA的合成
        2.2.4 载体构建
        2.2.5 所需载体
        2.2.6 农杆菌转化
        2.2.7 检测单克隆农杆菌
        2.2.8 烟草瞬时表达
        2.2.9 提取烟草总蛋白
        2.2.10 Western blot检测
        2.2.11 酵母双杂(Y2H)
        2.2.12 亚细胞定位
        2.2.13 双分子荧光互补(BiFC)验证互作
        2.2.14 免疫共沉淀(Co-IP)验证互作
        2.2.15 辣椒疫霉孢子的释放
        2.2.16 辣椒疫霉(LT263)的接种
        2.2.17 烟草叶片DNA的提取
        2.2.18 辣椒疫霉生物量分析
第3章 结果与讨论
    3.1 结果
        3.1.1 大豆疫霉毒性因子的鉴定
        3.1.2 Avh113的蛋白序列分析
        3.1.3 在大豆疫霉侵染大豆不同阶段的Avh113 转录特征的分析
        3.1.4 Avh113及其突变体的亚细胞定位
        3.1.5 Avh113在烟草中的表达提高了辣椒疫霉侵染能力
        3.1.6 Avh113宿主靶标的鉴定
        3.1.7 酵母双杂验证Avh113与GmLHP1互作
        3.1.8 BiFC验证Avh113和GmLHP1互作
        3.1.9 Co-IP验证Avh113和GmLHP1互作
        3.1.10 在烟草中表达GmLHP1对辣椒疫霉侵染的分析
    3.2 讨论
第4章 结论与展望
    4.1 结论
    4.2 展望
参考文献
附录
攻读硕士学位期间取得的研究成果
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]植物表达抗原蛋白及其免疫原性的研究进展[J]. 张怡然,张占路,唐益雄,吴燕民.  草业科学. 2015(06)
[2]Genome engineering using the CRISPR/Cas system[J]. Takuro Horii,Izuho Hatada.  World Journal of Medical Genetics. 2014(03)
[3]植物与病原菌互作理论研究进展[J]. 韩长志.  河南农业科学. 2012(11)
[4]25%甲霜灵种衣剂防治大豆疫霉根腐病效果研究[J]. 刘惕若.  黑龙江八一农垦大学学报. 2004(03)
[5]嗜线虫致病杆菌代谢物拮抗大豆疫霉[J]. 杨秀芬,杨怀文,简恒.  大豆科学. 2002(01)
[6]大豆疫霉和大豆疫病[J]. 彭金火,谭红,赵改萍.  植物检疫. 1998(03)

博士论文
[1]大豆疫霉RxLR效应分子Avh262和Avh172的功能研究[D]. 景茂峰.南京农业大学 2015
[2]寄生疫霉菌结构独特的质膜氢离子通道蛋白基因PnPMA1功能的初步研究[D]. 张美祥.西北农林科技大学 2012
[3]大豆疫霉效应分子的功能研究[D]. 韩长志.南京农业大学 2010

硕士论文
[1]发根农杆菌诱导大豆毛状根体系的建立与应用[D]. 宗晓秋.中国农业科学院 2012



本文编号：3648976