枣疯病相关植原体田间寄主及症状形成效应因子的鉴定

发布时间：2023-08-08 19:22

　　植原体是危害农作物、观赏性植物等的重要病原。枣疯病相关植原体是植原体16S rV-B亚组的重要成员,能够侵染枣树、刺槐和丝棉木等多种植物。枣树是山东省重要的经济作物,枣疯病严重影响枣业的安全生产。目前枣疯病相关植原体的潜在寄主和症状形成的机制还不清楚。本论文分析了枣疯病相关植原体的潜在寄主,预测并分析了枣疯病相关植原体的潜在效应因子在枣疯病丛枝和花变叶症状形成过程中作用,鉴定了两个潜在效应因子的寄主互作蛋白,主要结果如下:(1)分析了枣疯病相关植原体的田间寄主。利用植原体16SrRNA特异性引物对山东省烟台市和泰安市采集的8种不同寄主的15个植原体疑似样品进行PCR扩增。序列分析表明枣树、樱桃、臭椿、柿子树、荆条、小蓬草和榆树上扩增到的植原体16S rRNA序列相似度达到100%,与GenBank中枣疯植原体nky株系序列相似度较高,为99.07%;基于16SrRNA部分序列的系统进化和限制性片段长度多态性的iphyclassifier分析均表明本研究获得的枣疯病相关植原体分离物属于16SrV-B亚组。(2)明确JWB406是引起丛枝症状的效应因子。利用SignalP v3.0和TMH...

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中文摘要
Abstract
前言
    1.1 植原体研究概况
        1.1.1 植原体的危害
        1.1.2 植原体的传播
        1.1.3 植原体的检测方法
        1.1.4 植原体的分类
        1.1.5 植原体的基因组
        1.1.6 植原体的分泌蛋白
    1.2 枣疯植原体研究概况
    1.3 本研究的目的和意义
2 材料与方法
    2.1 实验材料与主要试剂
        2.1.1 供试植物和样品
        2.1.2 实验菌株与载体
        2.1.3 主要试剂及溶液
    2.2 主要实验仪器
    2.3 引物设计及载体构建
    2.4 实验方法
        2.4.1 植原体疑似样品的检测
        2.4.2 基于16SrRNA序列的植原体系统进化分析
        2.4.3 植原体中效应因子的预测
        2.4.4 植原体效应因子瞬时表达
        2.4.5 酵母文库筛选拟南芥中效应因子互作蛋白
        2.4.6 酵母双杂技术验证效应因子与寄主蛋白的互作
        2.4.7 效应因子亚细胞定位分析
        2.4.8 免疫胶体金分析效应因子在植物体内定位
3 结果与分析
    3.1 枣疯病相关植原体的田间寄主
    3.2 枣疯病相关植原体的潜在效应因子
    3.3 过表达候选效应因子改变植物表型
    3.4 效应因子JWB406和JWB157 的序列分析
    3.5 效应因子JWB406和JWB157 定位于细胞核和细胞质
    3.6 枣疯病植原体效应因子JWB406在植物体内定位
    3.7 酵母双杂筛选效应因子JWB406和JWB157 拟南芥中的寄主互作蛋白
    3.8 JWB406 与拟南芥蛋白SPL11和GATA3 互作
4 讨论
    4.1 枣疯病相关植原体寄主范围
    4.2 植原体症状形成机制研究
    4.3 SPL转录因子家族
5 结论与展望
    5.1 结论
    5.2 展望
参考文献
附录
致谢



本文编号：3840339