温郁金细菌性枯萎病菌的鉴定及其生防菌的筛选与应用研究

发布时间：2023-10-17 19:19

　　由茄科劳尔氏菌(Ralstonia solanaceraum)引起的温郁金细菌性枯萎病对温郁金种植可造成毁灭性危害。本研究将实验室已经保存的解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens ZJU-C612-4和加米那类芽孢杆菌Paenibacillus jamilae ZJUC612-3按比例混合研制出抗温郁金细菌性枯萎病的生物有机肥。通过温室和田间试验研究了该生物有机肥对温郁金细菌性枯萎病的防病效果,并初步探讨了两者的机制,主要结果如下:1.利用选择性培养基M-SMSA从温郁金发病块茎中分离得到4株强致病力茄科劳尔氏菌菌株,根据形态特征、flic基因、egl基因系统发育分析及组培苗回接试验等方法,将菌株TSC7,TSC8,TSC9和TSC10鉴定为茄科劳尔氏菌R.solanacearum种系型Ⅰ;通过菌株对3种己醇和3种二糖氧化产酸能力的分析,将菌株TSC7,TSC8,TSC9鉴定为生化型4,将菌株TSC10鉴定为生化型3。2.从实验室保存的37株菌株中有8株对茄科劳尔氏菌TSC7有抑制作用,其中菌株ZJU-C612-3和ZJU-C612-4对茄科劳尔氏菌TSC7...

【文章页数】：83 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
致谢
摘要
Abstract
缩略词及专有词汇检索表
第一章 文献综述
    1 引言
    2 温郁金药用价值及病害研究进展
        2.1 温郁金产区及产品功效
        2.2 温郁金的病害研究进展
        2.3 茄科劳尔氏菌的致病机理及种内分型研究
            2.3.1 茄科劳尔氏菌的致病机理
            2.3.2 茄科劳尔氏菌的种内分型
    3 茄科劳尔氏菌引起的病害生物防治研究进展
        3.1 利用细菌防治茄科劳尔氏菌引起的病害
            3.1.1 利用无(弱)致病力茄科劳尔氏菌防治
            3.1.2 利用芽孢杆菌防治
            3.1.3 利用假单胞菌防治
            3.1.4 其他细菌防治
        3.2 利用真菌防治
        3.3 利用链霉菌防治
        3.4 利用噬菌体防治
    4 本篇论文研究概况
        4.1 研究内容
        4.2 技术路线
第二章 溫郁金枯萎病调查与病原菌的鉴定
    1 引言
    2 材料与方法
        2.1 调查区域基本情况
            2.1.1 调查区域的基本情况
            2.1.2 温郁金生产技术规程
        2.2 样品采集与病原菌分离纯化
        2.3 病原菌菌株分子生物学鉴定
            2.3.1 DNA提取
            2.3.2 16SrRNA基因序列扩增
            2.3.3 茄科劳尔氏菌种系型测定
            2.3.4 特异基因序列扩增
        2.4 茄科劳尔氏菌生物型测定
        2.5 茄科劳尔氏菌致病性验证
    3 结果
        3.1 温郁金细菌性枯萎病田间发病规律
        3.2 温郁金块茎中致病菌的检测
        3.3 茄科劳尔氏菌菌株鉴定
            3.3.1 菌株16SrRNA基因测序
            3.3.2 菌株种系型测定
        3.4 茄科劳尔氏菌菌株生物型测定
        3.5 茄科劳尔氏菌菌株致病性验证
    4 小结与讨论
        4.1 小结
        4.2 讨论
第三章 温郁金细菌性枯萎病拮抗细菌的鉴定及特性研究
    1 引言
    2 材料与方法
        2.1 室内筛选拮抗细菌
        2.2 生防菌对植物病原真菌的抑菌能力
        2.3 生防菌的鉴定
            2.3.1 形态特征
            2.3.2 分子生物学鉴定
            2.3.3 生理生化实验
        2.4 生防菌产酶和代谢产物活性测定
            2.4.1 蛋白酶活性测定
            2.4.2 几丁质酶活性测定
            2.4.3 β-1,3-葡聚糖酶活性检测
            2.4.4 纤维素酶活性检测
            2.4.5 产嗜铁素活性检测
        2.5 生防菌MALDI-TOF-MS检测脂肽类化合物
    3 结果
        3.1 生防菌对茄科劳尔氏菌的抑制作用
        3.2 生防菌对植物病原真菌的抑制作用
        3.3 生防菌株ZJU-C612-3鉴定
            3.3.1 形态特征
            3.3.2 16SrRNA鉴定
            3.3.3 生理生化实验
        3.4 生防菌产酶及代谢物活性测定
        3.5 生防菌脂肽类化合物检测
    4 小结与讨论
        4.1 小结
        4.2 讨论
第四章 生物有机肥对温郁金细菌性枯萎病的防效研究
    1 引言
    2 材料与方法
        2.1 制备生物有机肥
        2.2 温室防病试验
        2.3 田间防病试验
        2.4 统计与分析
    3 结果
        3.1 BOF温室防病效果
        3.2 BOF田间防病效果
    4 小结与讨论
        4.1 小结
        4.2 讨论
第五章 全文总结
    1 全文结论
    2 创新点
    3 相关展望
参考文献
附录
    附录一 本论文使用培养基
    附录二 分离到的菌株形态
    附录三 R.solanacearum TSC7和P.jamilae ZJU-C612-3序列信息
    附录四 构建egl基因系统进化树采用菌株序列信息
    附录五 脂肽检测图谱



本文编号：3854855