番茄类受体激酶SlDALR1在防御细菌性斑点病中的功能研究

发布时间：2023-12-09 16:39

　　随着我国近年来农业产业结构调整和种植技术的提高,设施蔬菜种植产业蓬勃发展,设施栽培面积不断扩大。然而,设施栽培往往面临着多种病虫害的威胁,其中丁香假单胞菌番茄变种(Pseudomonas syringae pv.tomato DC3000)引起的细菌性斑点病在全国多省市均有发生,造成的损失严重可达50%以上。当前生产上,病害防治高度依赖化学杀菌剂,这给食品安全和生态环境造成严重的隐患。因此,迫切需要深入研究植物天然免疫的分子机理。富亮氨酸重复类受体蛋白激酶(Leucine rich-repeat receptor-like kinase,LRR-RLK)是植物中已知最大的一类跨膜类受体激酶(Receptor-like kinase,RLK),研究显示,其可以作为模式识别受体(Pattern recognition receptor,PRR)感知病原菌侵染并激发植物的天然免疫反应,本文以番茄作为研究对象,研究富亮氨酸重复类受体蛋白激酶SlDALR1(Defence-associated LRR-RLK1)在参与番茄防御细菌性斑点病过程中的作用及机制,所得研究成果如下:1.研究了番茄LRR...

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致谢
摘要
Abstract
缩略词表
1 引言
    1.1 植物病害与设施生产
    1.2 植物先天免疫反应
        1.2.1 抗病基因介导的免疫反应
        1.2.2 模式识别受体介导的免疫反应
    1.3 植物LRR-RLK及其在植物抗病性中的研究进展
        1.3.1 植物LRR-RLK家族及结构特征
        1.3.2 植物LRR-RLK在植物抗病性中的研究进展
    1.4 本文的研究目的及意义
2 番茄LRR-RLK IV家族分析及其对Pst DC3000 侵染的响应
    2.1 材料与方法
        2.1.1 植物材料培养与处理
        2.1.2 番茄LRR-RLK IV基因家族成员的核苷酸及蛋白序列信息获取
        2.1.3 系统发育树构建
        2.1.4 总RNA提取和基因荧光定量分析
        2.1.5 亚细胞定位
    2.2 结果与分析
        2.2.1 番茄LRR-RLK IV家族成员对Pst DC3000 的响应
        2.2.2 Sl DALR1 的亚细胞定位
        2.2.3 Sl DALR1 的系统发育分析
    2.3 讨论
3 SlDALR1 在番茄防御Pst DC3000 中的作用鉴定
    3.1 材料与方法
        3.1.1 试验材料与处理
        3.1.2 VIGS载体构建
        3.1.3 病毒诱导基因沉默
        3.1.4 PstDC3000接种处理
        3.1.5 总RNA提取和荧光定量分析
        3.1.6 PstDC3000抗性检测
        3.1.7 激素含量测定
        3.1.8 ROS爆发测定
        3.1.9 MAPK活性检测
        3.1.10 蛋白提取与免疫印迹
    3.2 结果与分析
        3.2.1 SlDALR1 基因沉默对Pst DC3000 抗性的影响
        3.2.2 SlDALR1 基因沉默对早期PTI免疫反应的影响
        3.2.3 激素对SlDALR1 沉默对Pst DC3000 抗性的影响
    3.3 讨论
4 番茄SlDALR1 的互作蛋白筛选
    4.1 材料与方法
        4.1.1 试验材料与试剂
        4.1.2 载体构建
        4.1.3 酵母双杂交筛库
        4.1.4 生物信息学分析
        4.1.5 双分子荧光互补
        4.1.6 植物材料培养与处理
    4.2 结果与分析
        4.2.1 自激活和毒性检测
        4.2.2 互作蛋白的筛选结果及其序列分析
        4.2.3 候选蛋白互作的确认
        4.2.4 候选蛋白在番茄对PstDC3000抗性中的作用初探
    4.3 讨论
5 总结及展望
参考文献
附表



本文编号：3871830