鼠源CD40L的原核表达及其对两种毒素半抗原免疫增强效果分析

发布时间：2024-12-11 04:18

　　通过构建大肠杆菌表达系统表达鼠源重组CD40L蛋白,探讨其对河豚毒素(tetrodotoxin,TTX)、微囊藻毒素-LR(Microcystin-LR,MC-LR)在免疫BALB/c小鼠的过程中的免疫增强作用,为进一步开发适于小分子半抗原单克隆抗体高效制备的免疫增强佐剂提供新的思路和实验基础。用Trizol试剂提取BALB/c小鼠脾脏总RNA并反转录成cDNA,根据CD40L CDs区以及可溶性CD40L(sCD40L)区设计引物,PCR扩增目的基因,构建pGEX4T-1-CD40L和pET-28a-sCD40L重组载体,进行原核表达,并纯化重组CD40L以及sCD40L蛋白。根据曼尼希反应原理,用甲醛法制备TTX免疫原TTX-BSA和检测原TTX-OVA;以人工重组蛋白CD40L佐剂组为试验组,弗氏佐剂组作为对照组,免疫BALB/c小鼠,用ELISA方法结合SPSS软件分析各组血清抗体水平,探讨重组CD40L蛋白在TTX-BSA免疫过程中对免疫效果的影响。用碳二亚胺法将MC-LR与BSA和OVA偶联,制备免疫原MC-LR-BSA和检测原MC-LR-OVA;以人工重组蛋白sCD40L佐...

【文章页数】：78 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
abstract
缩略词表
引言
第一篇 文献综述
    第1章 CD40L的研究概述
        1.1 CD40L基因及蛋白结构
        1.2 CD40L与受体之间的作用
        1.3 CD40L的佐剂效应及研究进展
    第2章 两种毒素半抗原简介
        2.1 河豚毒素
        2.2 微囊藻毒素
第二篇 研究内容
    第1章 鼠源重组CD40L的原核表达及其对河豚毒素免疫增强效果分析
        1.1 实验材料及仪器
        1.2 实验方法
        1.3 实验结果与分析
        1.4 讨论
        1.5 小结
    第2章 鼠源重组sCD40L蛋白的原核表达及其对MC-LR免疫增强效果分析
        2.1 实验材料及仪器
        2.2 实验方法
        2.3 实验结果与分析
        2.4 讨论
        2.5 小结
    第3章 鼠源重组sCD40L蛋白与CD40 受体结合以及对免疫反应的影响
        3.1 实验材料及仪器
        3.2 实验方法
        3.3 实验结果与分析
        3.4 讨论
        3.5 小结
结论
参考文献
导师简介
作者简介及科研成果
致谢



本文编号：4016175