大豆GmNH23基因的抗病毒功能相关及下游信号通路基因的筛选鉴定

发布时间：2025-01-11 03:54

　　大豆花叶病毒(Soybean mosaic virus,SMV)是大豆的主要病原,感染大豆后出现叶片黄斑、卷曲和种粒斑驳等症状,从而影响大豆的正常生长发育并导致产量及品质的下降。本实验室在前期研究中发现了一个与烟草N基因同源的对烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)和SMV均具有抗性的大豆基因GmNH23(Glycine max N Homolog 23)。GmNH23是一个典型的TN(TIR-NBS)型的R蛋白。虽然GmNH23基因的抗病毒功能已经鉴定,但是GmNH23基因的下游信号通路及功能相关基因的研究未见报道。因此,本论文中我们筛选并研究了参与GmNH23抗病免疫反应的大豆相关及下游基因的作用。首先我们克隆了20个功能相关基因,成功构建了16个候选基因的RNAi重组载体,通过农杆菌介导的瞬时过表达系统在大豆品种合丰55的叶片中瞬时沉默了这些基因的表达。GmNH23的过表达抑制SMV的侵染。通过候选基因的沉默对GmNH23介导的SMV抗性的变化来筛选出与GmNH23基因功能相关的基因。实验结果显示GmEDS1、GmSGT1-1、GmSGT1-2、GmJAR...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1.1NBS-LRR家族的抗病蛋白[9]

）序列[9]。根据其N末端，NLR蛋白可分类为CC-NLR（CNLs）或TIR-NLR（TNLs）（如图1.1）。研究发现，TNL和CNL需要不同的信号途径来触发ETI反应。但是，迄今为止仅发掘了较少的信号组分。为了激活免疫，大多数CNL（例如RPM1，RPS2，RPS5）都需要....

图1.2植物中病原体诱导的SA生物合成的信号通路[66]

内蒙古大学硕士论文81.4.2SA合成代谢途径通过对ICS1基因（AT1G74710）缺陷型的拟南芥sid2突变体进行丁香假单胞菌感染后发现，在拟南芥中大部分的SA都来自异分支酸，这是分支酸合酶（Isochorismatesynthase，ICS1）产生的关键中间体[63]。SA....

图1.3高等植物的SA生物合成途径[67]

内蒙古大学硕士论文9进一步证明AtPBS3和AtEPS1是SA代谢途径相关的基因。PBS3是GH3酰基-腺苷酸酶家族的成员[69]。拟南芥包含总共19种GH3蛋白，其特点是能够催化L-氨基酸与茉莉酸，吲哚乙酸和羟基苯甲酸的结合。在体外PBS3具有体外酰基酰胺基合成酶活性[69]。....

图1.4重组S5H/DMR6将SA转化为2,5-DHBA

内蒙古大学硕士论文10图1.4重组S5H/DMR6将SA转化为2,5-DHBA。S5H/DMR6在体外催化生化反应[73]Fig1.4ConversionofSAto2,5-DHBAbytherecombinantS5H/DMR6proteininvitro.Biochemica....

本文编号：4025899