植物性神经对妊娠早期大鼠子宫内Dickkopf-1和Dickkopf-3表达的影响

发布时间：2017-09-22 11:11

  本文关键词：植物性神经对妊娠早期大鼠子宫内Dickkopf-1和Dickkopf-3表达的影响

  更多相关文章： 大鼠 子宫 植物性神经 胚胎着床 Dickkopf-1 Dickkopf-3

【摘要】：胚胎着床的顺利进行是成功妊娠的关键,目前人类社会不孕不育问题普遍,畜牧养殖业也常常受到畜禽繁殖率低的困扰,许多研究报道了胚胎着床与肿瘤发生发展的相关性,已经证明多种分子及蛋白既参与肿瘤发生发展过程,也参与胚胎着床过程。Dickkopf-1 (DKK-1)和Dickkopf-3 (DKK-3)已被广泛证明参与肿瘤的发生发展,但对于其是否参与胚胎着床过程还未见报道。因此本试验将对DKK-1和DKK-3在胚胎着床过程中的角色进行研究,同时分析植物性神经对胚胎着床过程中子宫内DKK-1、DKK-3的调控作用,以进一步为胚胎着床机制的研究提供理论依据。本试验通过手术切断支配子宫的植物性神经和药物注射单独阻断交感和副交感神经的方法建立大鼠植物性神经损毁模型,应用HE染色、免疫组织化学法、实时荧光定量方法从组织学水平、蛋白水平以及RNA水平三个层面观察植物性神经对大鼠胚胎着床过程中子宫内DKK-1和DKK-3的影响,综合判定植物性神经、胚胎着床以及DKK-1和DKK-3之间的相互关系。我们观察发现DKK-1和DKK-3在子宫内主要表达于子宫腔上皮、子宫腺上皮以及部分蜕膜细胞的细胞质,正常组DKK-1和DKK-3 mRNA以及蛋白在着床前水平较低而着床启动后较高,且在胚胎着床位点均发现了二者表达。提示DKK-1和DKK-3可能参与胚胎着床过程。本试验发现了在妊娠早期子宫内血管壁也有DKK-1和DKK-3表达,且DKK-1和DKK-3的阳性血管数量随着子宫内膜血管数量增加而增加,提示二者可能还参与妊娠子宫内膜血管生成或血流调控。植物性神经的损毁对卵巢排卵点数量影响不大,但对子宫着床点数量影响显著,植物性神经损毁后表现胚胎着床数量下降,其中以植物性神经全部切除组胚胎着床数量最低,同时神经处理组均表现胚胎发育不良或着床延迟。说明植物性神经可影响胚胎着床过程。植物性神经损毁对子宫组织结构的影响主要表现在子宫腔上皮和子宫腺上皮发育不良,子宫内膜血管数量下降等。子宫组织结构的显著变化可能是造成母体子宫容受性建立与胚胎发育之间不同步而最终着床失败的关键原因。植物性神经损毁对子宫的影响还体现在DKK-1和DKK-3的mRNA和蛋白表达发生显著变化。植物性神经全部损毁后DKK-1和DKK-3在胚胎着床前超高表达,单独损毁交感神经DKK-1和DKK-3在着床前也高表达,但较植物性神经全部切除组稍弱,而单独阻断副交感神经DKK-1和DKK-3mRNA和蛋白均维持在较低水平。植物性神经损毁后DKK-1和DKK-3表达的差异性提示植物性神经可参与调控DKK-1和DKK-3的表达。
【关键词】：大鼠 子宫 植物性神经 胚胎着床 Dickkopf-1 Dickkopf-3
【学位授予单位】：山东农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S814
【目录】：

• 中文摘要8-10
• Abstract10-12
• 1 前言12-25
• 1.1 哺乳动物妊娠过程12-15
• 1.1.1 子宫组织学结构在妊娠过程中的变化12-14
• 1.1.2 胚胎着床过程14-15
• 1.2 子宫内植物性神经分布的研究15-17
• 1.2.1 植物性神经的阻断剂15-16
• 1.2.2 植物性神经与胚胎着床的研究进展16-17
• 1.3 肿瘤与胚胎着床关系17-18
• 1.4 DKK-1研究现状18-21
• 1.5 DKK-3研究现状21-23
• 1.6 DKK家族其他成员23-24
• 1.7 Wnt信号通路24-25
• 2 材料与方法25-33
• 2.1 试验材料25-28
• 2.1.1 试验动物及方案25-26
• 2.1.2 样品取材26-27
• 2.1.3 主要试剂和试验用品27-28
• 2.1.4 试验试剂的配制28
• 2.2 试验方法28-33
• 2.2.1 切片标本制备28
• 2.2.2 HE染色法28-29
• 2.2.3 免疫组织化学法29-30
• 2.2.4 实时荧光定量PCR法30-33
• 3 试验结果33-46
• 3.1 植物性神经对子宫着床点和卵巢排卵点数量的影响33-34
• 3.2 植物性神经对子宫组织结构的影响34-36
• 3.2.1 正常组34-35
• 3.2.2 手术同时切除交感和副交感神经组(手术组)35-36
• 3.2.3 阿托品阻断副交感神经组(阿托品组)36
• 3.2.4 6-OHDA损毁交感神经组(6-OHDA组)36
• 3.2.5 假手术组36
• 3.3 植物性神经对子宫内DKK-1、DKK-3免疫阳性的影响36-44
• 3.3.1 植物性神经对DKK-1免疫阳性的影响36-40
• 3.3.2 植物性神经对DKK-3免疫阳性的影响40-44
• 3.4 植物性神经对DKK-1 mRNA和DKK-3 mRNA相对表达量的影响44-46
• 3.4.1 植物性神经对DKK-1 mRNA相对表达量的影响44
• 3.4.2 植物性神经对DKK-3 mRNA相对表达量的影响44-46
• 4 讨论46-51
• 4.1 植物性神经对胚胎着床的影响46-47
• 4.2 DKK-1和DKK-3参与胚胎着床过程47-48
• 4.3 植物性神经调控DKK-1和DKK-3的表达48-49
• 4.4 DKK-1和DKK-3参与血管生成和血流调控49-51
• 5 结论51-52
• 6 参考文献52-71
• 7 致谢71

【相似文献】

中国重要会议论文全文数据库 前1条

1 杨子荣;董卫国;樊利芳;张玉;;组织芯片检测Dickkopf-3在胃癌中的表达及临床意义[A];中华医学会第12次全国内科学术会议论文汇编[C];2009年

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 宁淑杰;植物性神经对妊娠早期大鼠子宫内Dickkopf-1和Dickkopf-3表达的影响[D];山东农业大学;2015年

，

本文编号：900469