TPCK-胰蛋白酶酶解缢蛏工艺条件优化

发布时间：2021-08-09 09:42

　　酶解法是制备多肽的常用方法,对酶解工艺的控制很大程度上影响酶解的效果。文章采用具有专一性酶切位点的TPCK-胰蛋白酶酶解缢蛏鲜肉,在单因素试验基础上,通过正交试验优选TPCK-胰蛋白酶的酶解工艺条件,为充分利用缢蛏资源、有效发挥缢蛏的营养价值提供思路,为科研人员今后进一步研究制备缢蛏多肽提供数据参考。 

【文章来源】：福建轻纺. 2020,(11)

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

酶解时间对TPCK-胰蛋白酶酶解效果的影响

3.2.2 料液比对TPCK-胰蛋白酶酶解效果的影响称取5 g新鲜去壳的缢蛏肉，用p H值为7.8的缓冲溶液作为反应液，酶的添加量为2250 U/g，酶解温度为37℃条件下，分别按料液比1∶1.0、1∶2.0、1∶3.0、1∶4.0、1∶5.0、1∶6.0酶解2.0 h，酶解结果如图2所示。由图2可知，料液比从1∶1.0扩大至1∶6.0，多肽提取量呈先上升后下降的变化趋势。当料液比为1∶3.0时，多肽提取量达到单因素试验的最高水平。当料液比大于1∶3.0时，反应体系中溶液的增多，减少了TPCK-胰蛋白酶与底物蛋白碰撞接触的机会，导致多肽提取量下降。因此，料液比选取在1∶3.0左右。

称取5g新鲜的去壳缢蛏肉，用p H值为7.8的缓冲溶液作为反应液，酶解温度为37℃，料液比为1∶3.0，酶添加量为4500、9000、13500、18000、22500 U/g条件下，分别酶解2.0 h，酶解结果如图3所示。由图3可知，在一定范围内，随酶添加量的增加，多肽提取量也相应增加。当酶添加量为18000 U/g时，多肽提取量达到单因素试验的最高水平。当酶添加量大于18000 U/g时，多肽提取量反而开始降低。这可能是由于TPCK-胰蛋白酶将缢蛏蛋白反应完全后，酶解液中还有适合酶切位点的肽段，TPCK-胰蛋白酶对这些肽段进行酶解，使之降解成游离氨基酸，导致多肽提取量降低。综上，TPCK-胰蛋白酶的酶添加量选择为18000 U/g左右。3.2.4 TPCK-胰蛋白酶酶解工艺的正交试验优化结果

【参考文献】：
期刊论文
[1]生物活性肽的研究进展[J]. 薛荣,苏秀兰,李国华.  中国疗养医学. 2015(03)
[2]测序级胰蛋白酶的制备工艺与质量检测[J]. 喻峰,卢大儒,陈薇.  生物技术通讯. 2014(01)
[3]生物活性肽的研究进展[J]. 李维,兰海楠,郭风,赵雪,付志玲,杨艳红,刘禹,吴天成,郑鑫.  中国畜牧兽医. 2012(10)
[4]酶法制备海洋活性肽及其功能活性研究进展[J]. 张岩,吴燕燕,李来好,杨贤庆,宫晓静.  生物技术通报. 2012(03)
[5]应用双缩脲反应测定鳖甲中总肽含量的方法学研究[J]. 毕葳,邢延一,李燕燕,李强,雷海民.  中国实验方剂学杂志. 2011(15)
[6]蛋白水解产物中多肽得率的测定方法研究[J]. 李理,张静.  现代食品科技. 2010(08)
[7]生物活性肽的种类及应用[J]. 周永治.  江苏调味副食品. 2007(06)
[8]生物活性肽研究现况和进展[J]. 李勇.  食品与发酵工业. 2007(01)
[9]几种缢蛏的营养性和健康性分析评价[J]. 安贤惠.  海洋湖沼通报. 2005(04)
[10]蛋白水解液中多肽含量的测定方法[J]. 鲁伟,任国谱,宋俊梅.  食品科学. 2005(07)



本文编号：3331834