槲皮素和异槲皮素对猕猴桃糖蛋白影响的研究

发布时间：2021-10-02 01:26

　　采用荧光光谱、紫外光谱和傅里叶红外光谱法研究不同温度下槲皮素和异槲皮素对猕猴桃糖蛋白GP2的影响。确定了GP2与槲皮素和异槲皮素发生相互作用生成新的复合物,在300 K和310 K温度下的荧光猝灭机制主要是静态猝灭;结合常数分别为107.66 L/moL和63.07 L/moL,对应的结合位点数为0.65和0.57;氢键和范德华力是二者之间主要的相互作用力;通过同步荧光光谱法研究确定了槲皮素和异槲皮素与猕猴桃糖蛋白GP2结合位点更接近色氨酸残基;利用傅里叶红外光谱和紫外光谱研究槲皮素和异槲皮素的加入对糖蛋白GP2构象的变化。 

【文章来源】：粮食与油脂. 2020,33(12)北大核心

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

不同温度下GP2与槲皮素和异槲皮素相互作用的荧光猝灭光谱

荧光猝灭机制分为2种，不同荧光猝灭机制的反应原理是不同的。由猝灭剂和荧光物质反应生成不发光的物质从而影响荧光强度强弱的称为静态猝灭；而因为猝灭剂和荧光物质之间发生碰撞引起的荧光强度的改变称为动态猝灭（也称碰撞猝灭）。根据Stem-Volmer公式得到的300 K和310 K下的Stem-Volmer曲线见图2，对Stern-volmer曲线线性拟合得到结果表1。由图2和表1可知：在300 K和310 K时，糖蛋白GP2与槲皮素和异槲皮素之间相互作用的曲线的相关性较好。不同温度对荧光猝灭的影响有所不同，温度升高，动态猝灭常数随着分子之间发生碰撞的机会增加而变大。图2中，温度升高到310 K，槲皮素和异槲皮素与糖蛋白GP2相互作用时，动态猝灭常数反而减小，这说明多酚对GP2的荧光猝灭可能不是动态猝灭，而是槲皮素和异槲皮素与糖蛋白GP2混合体系中生成了复合物。对比动态猝灭中猝灭剂对荧光分子的最大碰撞猝灭常数与本试验中的双分子猝灭速率常数可知（2.0×1010 L/(mol·s)<1011 L/(mol·s)，推测槲皮素和异槲皮素与糖蛋白GP2相互作用的荧光猝灭机制是静态猝灭。

根据公式（1），做出Log[(F0-F)/F]对log[Q]不同温度下的双倒数曲线，如图3。其中，曲线的截距为Ka，斜率为n。由图3和表2可得：在300 K和310 K时，糖蛋白GP2与槲皮素和异槲皮素相互作用的双倒数曲线的线性方程相关系数R2分别为0.92(300 K）、0.88(310 K），表明线性良好。糖蛋白GP2与槲皮素和异槲皮素的结合位点数n约为1，表明多酚和糖蛋白GP2结合作用较强，且有一个结合位点形成。随着温度的升高，结合常数Ka均大幅度降低，说明温度对糖蛋白GP2与槲皮素和异槲皮素相互作用生成的复合物的稳定性有影响，确定该相互作用的猝灭机制为静态猝灭。

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3417731