单核细胞增生李斯特氏菌荧光RPA快速检测方法的建立

发布时间：2021-10-08 15:10

　　本研究旨在建立一种单核细胞增生李斯特氏菌荧光RPA检测方法。根据NCBI数据库中单核细胞增生李斯特氏菌actA基因序列的比对分析,选择同源性好的片段以此设计引物及探针,建立检测单核细胞增生李斯特氏菌的RPA方法。结果表明,本实验所建立的方法特异性较强,只对单核细胞增生李斯特氏菌为检出阳性,对其他菌种无扩增,该方法的检出限为2.3×102cfu/mL。在对实验室分离菌株的检测分析中,其检测结果与传统培养方法一致。在人工污染样品的检测中,经过4 h的培养后,该方法可检出DNA浓度为2.3×102cfu/mL的单核细胞增生李斯特氏菌。本研究所建立的RPA检测方法能够快速准确地检测单核细胞增生李斯特氏菌,为基层检测实验室和疫情突发现场单核细胞增生李斯特氏菌的快速检测提供了有效的技术手段。 

【文章来源】：基因组学与应用生物学. 2020,39(12)北大核心CSCD

【文章页数】：7 页

【部分图文】：

单核细胞增生李斯特氏菌荧光RPA检测方法的建立

单核细胞增生李斯特氏菌荧光RPA方法和RT-PCR方法的特异性实验

将人工污染单核细胞增生李斯特氏菌的猪肉样品放于30℃培养箱中培养，分别于培养0、2 h、4 h、6 h后，每个稀释度取1 m L模拟污染液，提取核酸，利用荧光RPA方法检测。结果显示模拟污染的猪肉样品在培养4 h后，荧光RPA方法的检出限为2.3×102cfu/m L (图4)。从而表明该方法在实际样品检测中具有较高的灵敏度，具有极强的实际应用价值。2 讨论

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3424413