结合淀粉活性乳酸菌利用生淀粉产酶条件及代谢产物

发布时间：2022-12-22 00:55

　　为研究具有特异性结合淀粉活性乳酸菌的淀粉代谢能力,以副干酪乳杆菌L1为对象,研究其产酶性质及对生淀粉的利用能力,对产酶条件进行优化,利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定生淀粉酶分子质量,高效液相色谱法测定碳水化合物和有机酸的产生及利用情况。结果表明,生淀粉酶存在于L1菌体细胞表面和上清液中,该酶对不同来源生淀粉均具有一定的水解能力,生淀粉对该酶具有诱导作用。在培养基初始p H 6.5、淀粉占碳源比例68%、碳源添加量2.03%条件下,表现出最高酶活力为（191.64±0.63）U/m L。碳水化合物水解产物麦芽低聚糖为中间产物,葡萄糖、麦芽糖为终产物;有机酸水解产物以乳酸为主要产物,柠檬酸为次级产物。本研究从代谢角度证实了L1结合生淀粉的同时,具有利用生淀粉的能力,对乳酸菌在淀粉类基质中的应用有着重要意义。 

【文章页数】：8 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料与试剂
        1.1.1 菌种
        1.1.2 试剂
        1.1.3 培养基
    1.2 仪器与设备
    1.3 方法
        1.3.1 菌种的活化
        1.3.2 L1产酶位置分析
        1.3.3 生淀粉酶活力测定
        1.3.4 产酶诱导性及稳定性分析
        1.3.5 生淀粉酶的浓缩纯化
        1.3.6 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（sodiumdodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE）及基于Native-PAGE的酶谱分析
        1.3.7 不同来源生淀粉对L1产酶活力分析
        1.3.8 副干酪乳杆菌L1产酶单因素试验
        1.3.9 乳酸菌产酶条件响应面试验
        1.3.1 0 代谢产物分析
            1.3.1 0. 1 L1淀粉水解产物变化情况
            1.3.1 0. 2 L1水解淀粉过程中产酸情况
    1.4 数据处理
2 结果与分析
    2.1 L1产酶位置分析
    2.2 L1产酶的诱导性
    2.3 SDS-PAGE及酶谱分析
    2.4 不同来源生淀粉对L1产酶的影响
    2.5 L1产酶条件优化
        2.5.1 单因素试验结果
        2.5.2 响应面设计与结果
        2.5.3 模型方差分析及响应面分析
        2.5.4 产酶最佳条件确定及验证实验
    2.6 L1利用淀粉代谢产物分析
        2.6.1 L1水解淀粉产物变化分析
        2.6.2 L1代谢淀粉产酸分析
3 结论


【参考文献】：
期刊论文
[1]乳酸菌发酵大豆糖蜜生产乳酸及糖代谢变化[J]. 江杨娟,徐丽,陈美思,周小敏,韩翠萍,王松.  食品科学. 2018(06)
[2]对甘薯淀粉具有絮凝活性的乳酸菌的分离鉴定及其特性研究[J]. 张莉力,许云贺,李新华.  食品科学. 2010(07)

硕士论文
[1]乳酸菌酸浆豆腐工艺优化及凝固机理初探[D]. 叶青.锦州医科大学 2018
[2]不同来源淀粉的分子结构对其酶解性能影响的研究[D]. 于轩.江南大学 2013



本文编号：3723108