增塑剂DEHP对几种小鼠源神经细胞系的毒性比较研究

发布时间：2024-06-29 15:26

　　邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(diethylhexyl phthalate,DEHP)是一种应用非常广泛的增塑剂。DEHP具有神经毒性,可以对神经细胞造成损伤并产生细胞毒性,长期接触还会损害神经发育以及行为和认知。然而,DEHP诱导的神经毒性的分子机制仍有待研究。在此,我们对三种小鼠源神经细胞系的神经毒性进行比较,以建立适用于DEHP神经毒性作用研究的良好细胞模型。首先,我们通过MTT实验检测了不同浓度DEHP暴露后小鼠神经瘤母细胞系(N2a),分化和未分化的小鼠海马神经元细胞系(HT22)以及小鼠神经干细胞(NE-4C)的细胞活力。结果显示,经DEHP暴露后的细胞活力成剂量依赖式下调,NE-4C的细胞活力在12μM时明显降低,N2a和分化HT22的细胞活力均在50μM的浓度出现下降,未分化HT22的细胞活力则在200μM的较高浓度才出现显著下降。其次,采用Hoechst染色和western blotting检测了不同浓度DEHP暴露后细胞的凋亡情况。结果表明,不同细胞发生显著凋亡时DEHP的暴露浓度不同,NE-4C细胞被诱导发生凋亡的DEHP浓度为12μM,N2a细胞和分化的HT22...

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图3-1浓度梯度DEHP暴露后的细胞活力（A）N2a细胞，(B）NE-4C细胞，（C）未分化的HT22细胞，(D)分化的HT22细胞

增塑剂DEHP对几种小鼠源神经细胞系的毒性比较研究

图3-3浓度梯度DEHP暴露细胞凋亡蛋白的检测（A-B）N2a细胞，（C-D）未分化HT22细胞，（E-F）分化HT22细胞，（G-H）NE-4C细胞

增塑剂DEHP对几种小鼠源神经细胞系的毒性比较研究23图3-3浓度梯度DEHP暴露细胞凋亡蛋白的检测（A-B）N2a细胞，（C-D）未分化HT22细胞，（E-F）分化HT22细胞，（G-H）NE-4C细胞。均在浓度梯度的DEHP中暴露24h后，westernblot检测细胞中Bc....

图3-4浓度梯度DEHP暴露细胞中PSD95，synapsin-1蛋白的表达情况

增塑剂DEHP对几种小鼠源神经细胞系的毒性比较研究25图3-4浓度梯度DEHP暴露细胞中PSD95，synapsin-1蛋白的表达情况（A-B）N2a细胞，（C-D）未分化HT22细胞，（E-F）分化HT22细胞，（G-H）NE-4C细胞。均在浓度梯度的DEHP中暴露24h后，w....

图3-5浓度梯度DEHP暴露细胞中BDNF蛋白水平的检测

硕士学位论文26图3-5浓度梯度DEHP暴露细胞中BDNF蛋白水平的检测(A)N2a细胞，未分化的HT22细胞，分化的HT22细胞，(B)NE-4C细胞。均在浓度梯度的DEHP中暴露24h后，采用ELISA检测细胞中BDNF蛋白表达。与对照组相比，*p＜0.05，**p＜0.01....

本文编号：3997757