富血小板血浆对人脐带间充质干细胞增殖及成骨分化的影响
发布时间:2017-10-22 19:04
本文关键词:富血小板血浆对人脐带间充质干细胞增殖及成骨分化的影响
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【摘要】:目的探讨不同浓度富血小板血浆(PRP)对人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)的增殖及成骨分化影响。方法提取脐带血PRP,ELISA试剂盒测定PRP中转化生长因子-β_1(TGF-β_1)浓度,并将其作为PRP生长因子含量的衡量标准,分别以含不同浓度TGF-β_1的PRP培养hUC-MSCs,CCK-8法检测细胞增殖效率。将P5代hUC-MSCs接种于6孔板,分为4组:对照组只添加完全培养基培养,PRP组添加TGF-β_1为750 pg/mL的PRP培养,成骨诱导组添加成骨诱导培养基培养,PRP+成骨诱导组添加TGF-β_1为750 pg/mL的PRP和成骨诱导培养基培养。Real-time PCR检测hUC-MSCs成骨标志基因(OPN、RUNX2、ALP)的相对表达量。结果细胞培养至第5天时,含TGF-β_1浓度为750、1 000、2 000 pg/mL的PRP对细胞增殖促进作用显著。此外,成骨诱导过程中,添加PRP对细胞形态有不同程度影响,相对于成骨诱导组,PRP+成骨诱导组细胞第14天时已有明显的钙沉积。Real-time PCR结果显示,对照组细胞在各时间点成骨标志基因只有微量表达,且无明显变化。其余3组细胞随培养时间增加,成骨标志基因表达均有不同程度上调,其中,PRP组高于对照组(P0.05),成骨诱导组高于PRP组(P0.05),PRP+成骨诱导组高于成骨诱导组(P0.05)。结论体外培养时PRP可促进hUCMSCs增殖及成骨分化,PRP中TGF-β_1最佳浓度为750 pg/mL。
【作者单位】: 广东医学院附属医院骨科中心;广东医学院附属医院干细胞研发与细胞治疗中心;
【关键词】: 富血小板血浆 脐带间充质干细胞 细胞增殖 成骨分化
【基金】:广东省自然科学基金资助面上项目(编号:S2013020012866) 广东省医学科研基金立项课题(编号:B2014313) 广东省湛江市财政资金科技专项竞争性分配项目(编号:2014A06005) 广东医学院科研基金立项资助项目(编号:Z2013005)
【分类号】:R329.2
【正文快照】: 人脐带间充质干细胞(human umbilical cord-mes-enchymal stem cells,h UC-MSCs)是介于胚胎干细胞与成体干细胞之间的一种干细胞,具有多向分化能力,能够分化为脂肪、骨、软骨、神经、内皮和心肌等多种组织细胞,可作为组织损伤修复或组织工程的种子细胞。研究证实,富血小板血浆
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